Реактивы для молекулярной биологии — неотделимая часть ваших исследований

Реагент RIzol для выделения суммарной РНК из различных биологических образцов — это готовый к использованию реагент для выделения высококачественной суммарной РНК из образцов человеческого, животного, растительного, дрожжевого, бактериального и вирусного происхождения. Под действием реагента RIzol происходит гомогенизация биологического образца и лизис клеток, не нарушая целостность РНК за счет ингибирования действия РНКаз. Процедура выделения РНК занимает не более часа. Выделение ДНК и белков с использованием реагента RIzol — менее трех часов. Выделенная РНК может быть использована для синтеза кДНК, ОT-ПЦР, трансляции in vitro и др.

Особенности реагента RIzol

Реагент RIzol имеет следующие особенности:

• время выделения РНК — 1 час;
• время выделение ДНК — 3 часа;
• полученная РНК может быть использована после выделения для ПЦР; молекулярного клонирования, блоттинга, конструирования библиотек кДНК;
• дополнительная очистка полученной РНК после выделения не требуется.

Условия хранения и перевозки: при 20 °С в темном месте.

Набор предназначен для выделения ДНК из культур животных клеток. Выделение ДНК начинается с лизиса клеток, очистка нуклеиновой кислоты происходит за счёт связывания ДНК с сорбентом колонок diaGene. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата. Выход ДНК зависит от типа и количества клеток, поэтому надо учитывать, что ёмкость колонок — до 20 мкг нуклеиновой кислоты.

Набор diaGene для выделения ДНК из культур клеток, инструкция по применению, Стар-лаб, русск., 2 стр.

Набор предназначен для выделения до 25 мкг плазмидной ДНК длиной до 20 т.п.н. из 3-5 мл бактериальной культуры. Очистка ДНК на колонках diaGene происходит за счёт избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли с последующей отмывкой связанной ДНК от примесей и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК.

Выход ДНК зависит от ряда факторов: копийности плазмиды, условий роста, объёма культуры и т.д.

Не рекомендуется использовать для выделения плазмид длиной свыше 50 тысяч пар нуклеотидов, а также для получения препарата плазмидной ДНК для трансфекции эукариотических клеток.

Набор diaGene для выделения плазмидной ДНК из бактерий, diaGene, инструкция по применению, Стар-лаб, русск., 2 стр.

Набор FastDNA Spin for Feces быстро и эффективно выделяет геномную ДНК из свежих или замороженных образцов экскрементов человека и животных, а также из почвы, водоемов, сточных вод, ила и др. Рекомендовано использовать с гомогенизатором FastPrep или с альтернативным прибором.

Клетки-хозяева, а также клетки бактерий, грибов, простейших и другие клетки, присутствующие в образцах фекалий легко лизируются в течение 40 секунд.

Разрушение клеток в гомогенизаторе обеспечивается угловым движением адаптера с траекторией в форме «восьмёрки» с одновременной разнонаправленной бомбардировкой образцов лизирующими матрицами, находящимися в пробирках вместе с буферным раствором, что обеспечивает высокую воспроизводимость, превосходящую традиционную методы выделения.

Образцы помещают в 2 мл пробирки, содержащие Лизирующий матрикс E – смесь, содержащую стеклянные (диаметр 4 мм), кварцевые (диаметр 0,1 мм) и керамические (диаметр 1,4 мм) шарики, способные эффективно лизировать экскременты любых организмов.

Образцы предварительно промываются подготовительным буфером.

Гомогенизация проводится в присутствии MT буфера и натриевого фосфатного буфера. Реагенты для предварительно лизиса и лизиса были тщательно разработаны, чтобы защитить от растворения нуклеиновые кислоты при лизисе клеток, облегчают получение геномной ДНК, РНК и сводят к минимуму контаминацию от гуминовых кислот и полифенолов.

По завершении лизиса образцы центрифугируются, в результате чего образуется осадок из разрушенных частиц и матрицы.

Для выделения ДНК из супернатанта используется технология GENECLEAN, применяющая силикагелевые спин-фильтры.

Элюированная ДНК полностью готова к использованию для электрофореза, ПЦР и другим исследованиям.

Спецификация: Тип набора: для выделения НК Тип пробы: Почва, экскременты, вода из водоемов, сточные воды, ил. Пробирки: 2 мл Совместимы с гомогенизатором: FastPrep-24 и FastPrep-96 Состав матрицы: Матрица E: 1.4 мм керамический шарик, 0.1 мм кварцевый шарик и один 4 мм стеклянный шарик. Выделяемые молекулы: ДНК
Состав набора:

• Лизирующий матрикс Е в пробирках, 50×2,0 мл;
• спин – колонки, 50 шт;
• пробирк-ловушки для сбора чистой ДНК, 50 шт;
• подготовительный буфер, 25 мл;
• буфер MT, 8 мл;
• натрия фосфатный буфер, 100 мл;
• раствор PPS для осаждения белков, 25 мл;
• связывающий матрикс, 66 мл;
• промывочный буфер №1, 120 мл;
• промывочный буфер №2, 12 мл;
• раствор TES для элюирования, 20 мл;
• краситель BBS для геля, 200 мкл;
• паспорт безопасности MSDS;
• сертификат анализа.

Необходимые материалы, не входящие в комплект (не поставляются): Гомогенизатор FastPrep или альтернативный прибор с высокой скоростью вращения (микроцентрифуга), в который можно свободно устанавливать для вращения 2,0 мл пробирки; микроцентрифужные пробирки (2,0 мл или 1,5 мл); 15 мл стерильные пробирки для связывания ДНК; ротатор, 100% этанол.

Условия хранения и транспортировки: 15 – 30 °C.

Набор для выделения ДНК из клеток, присутствующих в почве или других экологических пробах (экскременты, вода из водоемов, сточные воды, ил) до 300 мг. Рекомендуется использовать с гомогенизатором FastPrep или с альтернативным прибором.

Набор для почвы эффективно менее чем за 30 минут выделяет из почвы геномную ДНК, готовую к использованию в ПЦР.

Растительные и животные ткани, бактерии, водоросли, споры грибов и другие почвенные организмы легко лизируются в течение 40 секунд.

Разрушение клеток в гомогенизаторе обеспечивается угловым движением адаптера с траекторией в форме «восьмёрки» с одновременной разнонаправленной бомбардировкой образцов лизирующими матрицами, находящимися в пробирках вместе с буферным раствором, что обеспечивает высокую воспроизводимость, превосходящую традиционную методы выделения.

До 500 мг почвенной пробы помещают в 2 мл пробирки, содержащие Лизирующую матрицу E – смесь стеклянных (4 мм в диаметре), кварцевых (0,1 мм в диаметре) и керамических (1,4 мм в диаметре) шариков, способных эффективно разрушать все почвенные организмы, включая трудные для лизиса споры эубактерий, эндоспоры, грамположительные бактерии, дрожжи, водоросли, нематоды и грибы.

Гомогенизация происходит в присутствии МТ буфера и буфера фосфата натрия, реагенты для лизиса были тщательно разработаны, чтобы защитить от растворения нуклеиновые кислоты и белки при лизисе клеток. Эти реагенты эффективно работают вместе, облегчая выделение ДНК, максимально снижая контаминацию от РНК. По завершению лизиса образцы центрифугируются, в результате чего образуется осадок из разрушенных частиц почвы, мусора и матрицы. Полученную ДНК очищают, используя технология GENECLEAN , применяющая силикагелевые фильтры SPIN и устраняющая гуминовые кислоты и полифенолы, которые могут препятствовать ПЦР.

Элюированная ДНК полностью готова к использованию для электрофореза, ПЦР и другим исследованиям.

Спецификация: Тип набора: для выделения НК Тип пробы: Почва, экскременты, вода из водоемов, сточные воды, ил. Пробирки : 2 мл Совместимы с гомогенизатором: FastPrep-24 и FastPrep-96 Состав матрицы: Матрица E: 1.4 мм керамический шарик, 0.1 мм кварцевый шарик и один 4 мм стеклянный шарик. Выделяемые молекулы: ДНК Состав набора:

• Лизирующий матрикс Е в пробирках, 50×2,0 мл; спин–колонки, 50 шт;
• пробирки-ловушки для сбора чистой ДНК, 50 шт;
• буфер MT, 8 мл;
• натрия фосфатный буфер, 60 мл;
• раствор PPS для осаждения белков, 25 мл;
• связывающий матрикс, 66 мл;
• концентрированный промывочный раствор, 12 мл;
• раствор для элюции ДНК 20 мл;
• краситель BBS для геля, 200 мкл;
• паспорт безопасности MSDS;
• сертификат анализа.

Необходимые материалы, не входящие в комплект (не поставляются): Гомогенизатор FastPrep или альтернативный прибор с высокой скоростью вращения (микроцентрифуга), в который можно свободно устанавливать для вращения 2,0 мл пробирки; микроцентрифужные пробирки (2,0 мл или 1,5 мл); 15 мл стерильные пробирки для связывания ДНК; ротатор.

Условия хранения и транспортировки: 15–30 °C.

Листовка по экстракции ДНК из андосоля, вулканической почвы >>> здесь

Ингибитор РНКаз RiboBond ингибирует рибонуклеазную активность эукариотических ферментов, таких как РНКаза A, РНКаза B, РНКаза C, и защищает РНК от неспецифического гидролиза. Представляет собой рекомбинантный белок массой 50 кДа, экспрессируемый в E.coli, предназначен для использования в приложениях, где присутствие РНКаз может снизить качество результатов экспериментов, например при выделении РНК, синтезе кДНК, ОТ-ПЦР, транскрипции и трансляции in vitro.

Условия хранения: -20 °С.

Реагент RIsave для стабилизации и хранения РНК в образцах крови или костного мозга для последующего анализа предназначен для стабилизации и хранения внутриклеточной мРНК из периферической крови или костного мозга, что актуально в случаях транспортировки, либо при длительном хранении биоматериала для последующего выполнения молекулярно-генетических исследований. Реагент содержит в своем составе вещества, стабилизирующие мРНК, что обеспечивает максимально близкие по отношению к нативному биоматериалу значения экспрессии исследуемых генов.

Особенности реагента RIsave

Реагент RIsave имеет следующие особенности:

• стабилизирует РНК в образцах крови или костного мозга;
• незаменим при анализе экспрессии генов;
• пригоден для длительного хранения образцов без деградации РНК;
• совместим с реагентом RIzol для последующего выделения РНК;
• хранение и использование при комнатной температуре.

Рекомендации по условиям хранения и транспортировки образцов крови и костного мозга с использованием реагента для стабилизации РНК:

• комнатная температура (от 18 до 25 °С) — 3 суток;
• хранение в холодильнике (от 2 до 8 °С) — 5 суток;
• заморозка (от -20 до -70 °С) — до 8 лет.

Условия хранения: 18-25 °C.

Реагент RItisave для стабилизации РНК в разнообразных образцах тканей: головного мозга, сердца, почки, селезенки, печени, яичек, скелетной мышцы, жировой ткани, легких и тимуса, быстро проникает в ткань и стабилизирует клеточную РНК при комнатной температуре, одинаково эффективен для выделения различных типов РНК.

Особенности реагента RItisave

Реагент RItisave имеет следующие особенности:

• позволяет не проводить немедленную заморозку образца в жидком азоте или выделение РНК с последующей обратной транскрипцией;
• стабилизирует РНК в разнообразных образцах тканей;
• быстро проникает в ткань и стабилизирует клеточную РНК при комнатной температуре;
• используется для длительного хранения образцов тканей без деградации РНК.
• совместим с реагентом RIzol, реагентом TRIzol или иными коммерчески доступными наборами для последующего выделения РНК из ткани;
• перед выделением РНК достаточно просто удалить реагент, дополнительная пробоподготовка при этом не требуется;
• при изоляции взвеси клеток желательно ресуспендировать их в небольшом объеме PBS.

Реагент сохраняет РНК в тканях в течение:

• 1 день при 37 °C;
• 1 неделю при 25 °C;
• 1 месяц при 4 °C;
• до 1 года при -20 °C.

Условия хранения: 18-25 °C.

Шприц-пробирки RItube предназначены для стабилизации и хранения внутриклеточной мРНК из периферической крови или костного мозга, для транспортировки, или длительного хранения биоматериала для последующего выполнения молекулярно-генетических исследований. Реагент содержит в своем составе вещества, стабилизирующие мРНК, что при последующих исследованиях обеспечивает максимально близкие по отношению к значениям экспрессии исследуемых генов в нативном биоматериале.

Шприц-пробирки RItube с биообразцами следует хранить в вертикальном положении. В случае долгосрочного хранения образцов в холодильнике при температуре 2 – 8 °C или в морозильной камере (-20 °C) требуется предварительная экспозиция при комнатной температуре (но не выше 25 °С) не менее 4 часов. При глубокой заморозке при температуре -80 °C, образцы следует предварительно заморозить при -20 °C в течении 24 часов, после чего можно перенести замороженные образцы на хранение при температуре -80 °C.

Рекомендации по хранению биообразцов периферической крови в шприц-пробирках:

• 4 – 72 часа при 18–25 °C;
• 4 – 120 часов при 2–8 °C;
  
• 4 часов — 6 месяцев при -20 °C.

Условия хранения: 18 – 25 °C.

Набор реактивов для обратной транкрипции с MMLV–RH представляет собой полную систему для эффективного синтеза первой цепи кДНК с использованием в качестве матрицы мРНК или суммарной РНК. Набор содержит все необходимые компоненты для проведения обратной транскрипции: обратную транскриптазу MMLV–RH, два варианта 5× ОТ-буфера, смесь dNTP, раствор ДТТ, растворы олиго(dT)₁₆ праймера и случайного гексапраймера, а также свободную от РНКаз воду.

MMLV–RH – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Она отличается от обратной транскриптазы MMLV дикого типа структурой, каталитическими свойствами и температурным оптимумом активности. Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность, но лишен активности РНКазы Н. MMLV–RH проявляет оптимальную активность при +42°С (активна до +50°С). Фермент способен синтезировать первую цепь кДНК длиной до 10 т.н. и включать модифицированные основания.

Кроме обратной транскриптазы, набор содержит два типа буфера на основе KCl и (NH₄)₂SO₄, оптимизированные для проведения эффективной реакции обратной транскрипции с любых матриц РНК, в том числе содержащих участки повышенной сложности (сильно структурированные или GC-богатые).

Олиго(dT)₁₆ праймер и случайный гексапраймер позволяют более узконаправленно подходить к обратной транскрипции интересующих типов или участков РНК. Случайный гексапраймер неспецифически связывается с РНК-матрицей и используется для синтеза кДНК со всех типов РНК в составе суммарной РНК. Олиго(dT)₁₆ праймер селективно отжигается на полиадениновых последовательностях РНК, обеспечивая синтез кДНК только с мРНК, содержащих поли(А)-3’-конец. Также можно использовать специфичные праймеры для синтеза определённой последовательности.

Состав набора

Компонент	Кат. #
	1967.0050	1959.0250
MMLV-RH ревертаза, 100 ед. акт./ мкл*	1 × 50 мкл (5000 ед.акт.)	2 × 250 мкл (25000 ед.акт.)
5× ОТ-буфер (KCl)	1 × 220 мкл	3 × 400 мкл
5× ОТ-буфер ((NH4)2SO4)	1 × 220 мкл	3 × 400 мкл
20× смесь dNTP (10 мМ каждого)	1 × 120 мкл	2 × 300 мкл
Дитиотреитол	1 × 110 мкл	2 × 260 мкл
Случайный гексапраймер, 20 мкМ	1 × 50 мкл	1 × 260 мкл
Олиго(dT) праймер, 20 мкМ	1 × 50 мкл	1 × 260 мкл
Вода, обработанная ДЭПК	3 × 600 мкл	5 × 1.8 мл

* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль dTMP в кислотонерастворимый продукт за 10 мин при +37 °С.

1967_Набор реактивов для обратной транскрипции с MMLV, инструкция, Стар-лаб, русск., стр. 3

Набор реактивов для ПЦР с Taq-полимеразой Hot Start (+MgCl₂) содержит рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу и растворы всех необходимых компонентов для проведения стандартной ПЦР c “горячим” стартом (за исключением матрицы ДНК и праймеров). ПЦР-буфер, входящий в состав набора, уже содержит MgCl₂ в концентрации 10 мМ, достаточной для постановки большинства рутинных ПЦР.

HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза не активна при температуре до +70 °С. Это позволяет избежать образования неспецифических продуктов и праймер-димеров при низкой температуре на стадии смешивания компонентов ПЦР-смеси. Активация осуществляется на первом цикле ПЦР путём инкубации в течение 5 мин при +95 °С. Рекомбинантная Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; она обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.

5× ПЦР-буфер (+MgCl₂) оптимизирован для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР. В состав буфера входят MgCl₂ (10 мМ) и добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР. Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы. Входящие в набор 50 мМ раствор MgCl₂ и 50× смесь dNTP позволяют легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему «матрица-праймеры», а 6× Буфер для нанесения на гель облегчает пробоподготовку для электрофореза ПЦР-продуктов и контроль над ходом электрофореза.

Состав набора

Кат. #	HS-Taq DNA-полимераза, 5 ед. акт./мкл*	5× ПЦР буфер (+MgCl2)	50 мМ MgCl2	50× смесь dNTP (10 мМ каждого)	6×буфер для нанесения на гель	Кол-во, ед. акт.
1958.0500	1 × 100 мкл	2 × 1.5 мл	1 × 1 мл	2 × 200 мкл	1 × 1.5 мл	500
1958.2250	3 × 150 мкл	8 × 1.5 мл	2 × 1 мл	4 × 400 мкл	3 × 1.5 мл	2250

* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74 °С. Условия реакции: 50 мМ Трис-HCl, pH 9.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl₂, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [³H] dTTP, 0,25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.

Буфер для хранения HS-Taq ДНК-полимеразы:
50 мМ Трис-HCl, pH 8.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 0.1 мМ ЭДТА, 1мМ дитиотреитол, 50% (v/v) глицерин и 1% (v/v) Тритон Х-100.

5× ПЦР буфер (+MgCl₂):
50 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С), 250 мM KCl, 10 мМ MgCl₂, 0.5% (v/v) Tween 20, стабилизаторы Taq ДНК-полимеразы.

Область применения:
ПЦР с “горячим” стартом.
Высокопроизводительная ПЦР.
Обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью.
Наработка ПЦР-продуктов для ТА клонирования.
Вторая стадия ОТ-ПЦР.

Ограничения к использованию:

• Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 тыс. п.н.
  

Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.

Хранение и транспортировка: при -20 °С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.

Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год.

1958_ Набор реактивов для ПЦР с Taq-полимеразой и 10 мМ MgCl2, инструкция, Стар-лаб, русск., 4 стр.