Проточная цитометрия в биотехнологическом производстве

21.02.2022

Введение

В обзоре представлены примеры использования проточной цитометрии и сортинга в биотехнологическом производстве для оптимизации и контроля за быстрыми морфологическими изменениями и внутренним состоянием клеток в реальном времени в биореакторах.

Проточная цитометрия — это метод, основанный на регистрации оптических параметров частиц, находящихся в потоке, по сигналам светорассеяния и флуоресценции. Проточная цитометрия имеет широкий спектр применения. Используется в науке, медицине, фармацевтической индустрии, сельском хозяйстве (животноводство, молочная промышленность, растениеводство, виноделие, пивоварение и агрономия) которое фокусируется на селекции и формировании гибридных форм. В 2020 - 2021 году проточные цитометры – одно из самых продаваемых оборудований в области клеточной / молекулярной биологии.

Проточная цитометрия занимает особое место в биотехнологическом производстве, поскольку является незаменимым инструментом для быстрого анализа всех промежуточных этапов до получения финального продукта. В биореакторах проточной цитметрией отслеживается состояние клеток, которое зависит в первую очередь от: генетических, физико-химических факторов. В процессе изменения параметров (pH, механические воздействия, голодание по питательным веществам, например в процессе ферментации) в биореакторах появляется большое количество внеклеточных везикул (эктосомы, экзосомы, апоптозные тельца, и т.д.) и клеточных метаболитов разных типов – из-за этого мониторинг биопроизводства является сложным процессом.

Любой этап работы с культурами клеток может быть проверен и проконтролирован с помощью проточной цитометрии.

С помощью проточной цитометрии создается база данных по клеточной морфологии – это поможет в долгосрочном мониторинге в биопроизводстве и оптимизации процессов.

Некоторые варианты использования проточной цитометрии в биопроизводстве описаны далее.

Измерение концентрации внеклеточных везикул проточным цитометром – перспективный и важный инструмент для мониторинга в промышленных биопроцессах

Внеклеточные везикулы (ВВ) действуют как многофункциональные сигнальные комплексы, так как они участвуют в контроле скоординированных процессов, важных для общего гомеостаза клеток и клеточных популяций. Высвобождение внеклеточных везикул в культуральную среду зависит от состояния клеток (апоптоза, некроза, пролиферации, аутофагии, фероптоза и т.д.).

Умирающие клетки выделяют большое количество везикул (Рисунок 1), концентрация внеклеточных везикул может быть использована в качестве параметра, который отражает условия в биореакторах и даёт информацию о текущем состоянии биопроцесса. Если концентрация внеклеточных везикул увеличивается это свидетельствует о том, что условия в биореакторах ухудшились, это последствие апоптоза или ускоренной пролиферации клеток.

Жизнеспособность клеток в биореакторах можно определить по стандартной методике: окрашивание пробы пропидий иодидом и исследованием на проточном цитометре. На большинстве проточных цитометров сбор и анализ данных по внеклеточным везикулами выполнены с помощью лазера с длиной волны 488 нм (200 мВт мощности) и стандартным набором оптических фильтров.

Определение концентрации внеклеточных везикул проводится на трех типах образцов.

1. Образцы из ферментационного бульона без обработки (Рисунок 2).

2. Супернатант клеточной культуры после того, как клетки были удалены центрифугированием.

3. Образцы изолированных и концентрированных внеклеточных везикул.

Повышение концентраций внеклеточных везикул (ВВ) в ходе культивирования клеток в биореакторе с исследованием выделенных внеклеточных везикул проточным цитометром Проточный цитометр Attune Invitrogen

Рисунок 1. Повышение концентраций внеклеточных везикул (ВВ) в ходе культивирования клеток в биореакторе с исследованием выделенных внеклеточных везикул проточным цитометром.



Измерение необработанных образцов из ферментационного бульона. Показаны репрезентативные графики прямого светорассеяния (FS) и бокового светорассеяния (SS) клетки (cells) EVs (внеклеточные везикулы)

Рисунок 2. Измерение необработанных образцов из ферментационного бульона. Показаны репрезентативные графики прямого светорассеяния (FS) и бокового светорассеяния: (SS) клетки (cells), EVs (внеклеточные везикулы).

Проточная цитометрия улучшает управление экосистемой микроводорослей in situ

Микроводоросли представляют собой разнообразную группу микроорганизмов, различающуюся по морфологии, экологии, физиологии, биохимии. Микроводоросли встречаются в пресноводных и морских экосистемах и существуют индивидуально, цепочками или группами. Микроводоросли применяются как сырье нового поколения в области фармацевтики, производства биотоплива и продуктов питания. Контаминация культуры микроводоросли, вызванная паразитами, является проблемой, снижающей продуктивность на биоперерабатывающих заводах, и ведет к экономическим потерям. С помощью проточной цитометрии микроводоросли можно отличить от прокариотических организмов (паразитов микроводорослей) по размеру и зернистости, то есть по интенсивности прямого (FSC) и бокового (SSC) светорассеяния (Рисунок 3). Проточная цитометрия позволяет оптимизировать биопроцессы, связанные как с биомассой микроводорослей, так и с производством синтезируемых соединений. Еще одни вариант использования проточной цитометрии – отслеживание динамики паразитов микроводорослей.

График плотоности (dual-density-plots) в зеленом (FL1, (533нм)) и красном (FL3,(670нм) флуоресцентном канале.

Рисунок 3. График плотоности (dual-density-plots) в зеленом (FL1, (533нм)) и красном (FL3,(670нм) флуоресцентном канале. Гейтированые области, включают водоросли, HNAp, LNAp, и HFL3p, которые показаны на А) axenic Tistrella sp., Б) axenic Sphingpyxis sp., В) Tistrella sp.– C. vulgaris - сокультивирование, Г) Sphingopyxis sp.– C. vulgaris - сокультивирование Sphingpyxis sp., Tistrella sp., Pseudomonas sp.– C. vulgaris сокультивирование и засеяны на более низкой и (Д) и более высокой (Е) начальной концентрацией прокариот (паразитов) чем C. Vulgaris.


Шейкер-инкубатор, Multitron, Infors Проточный цитофлуориметр, Guava easyCyte, Luminex

Оборудование, использованное в эксперименте по улучшению управления экосистемой микроводорослей in situ.

1. Шейкер-инкубатор, Multitron, Infors.

2. Проточный цитофлуориметр, Guava easyCyte, Luminex.

Мониторинг физиологического состояния кукурузы/травяного силоса при темном брожении с помощью проточной цитометрии

В биореакторах проходит темное брожение (Dark Fermentation) которое сопровождается большим разнообразием в основном ферментативных бактерий (например, свободные споры, палочковидные бактерии и эндоспоры, которые являются типичными для Clostridium spp.). Анализ культуры проточным цитометром, вместе с микроскопическим наблюдением позволил в ходе ферментации в темноте отслеживать преобладающие по морфологии бактерии. Использование флуоресцентного красителя DiBAC4 (Bis(1,3-dibutylbarbituric acid) trimethine oxonol) в измерениях проточным цитометром давало информацию о физиологическом состоянии бактерий при ферментации в разных фазах культивирования (Рисунок 4).

Биореактор бактериальный, стальные сосуды от 50 до 1000 л, стерилизация паром, Techfors, Infors Проточный цитофлуориметр, до 5 лазеров, до 27 флуоресцентных каналов, ZE5, Bio-Rad

Оборудование использованное в эксперименте по мониторингу физиологического состояния кукурузы/травяного силоса при темном брожении.

1. Биореактор Techfors, Infors (50-100 л).

2. Проточный цитофлуориметр, до 5 лазеров, до 27 флуоресцентных каналов, ZE5, Bio-Rad.



Анализ культуры проточным цитометром, с микроскопическим наблюдением, для отслеживания преобладающих по морфологии бактерии.

Рисунок 4. Анализ культуры проточным цитометром, с микроскопическим наблюдением, для отслеживания преобладающих по морфологии бактерии.


Проточная цитометрия с визуализацией для исследования бактерий как потенциальные инструменты для мониторинга процессов в промышленной биотехнологии

В пищевой промышленности бактерии используются в качестве заквасок при производстве пищевых продуктов, таких как йогурт, сыр, кефир, вино. Некоторые кисломолочные бактерии, такие как Lactobacillus acidophilus, употребляются как пробиотик для баланса микрофлоры в желудочно-кишечном тракте. В связи с возрастающей конкуренцией среди производителей, важно сделать промышленный процесс производства пробиотиков эффективным и надежным. Проточная цитометрия дает более глубокое представление о процессе производства, описывая не только морфологию бактерий в любой момент времени, но и количество жизнеспособных бактерий. Результаты исследования методом проточной цитометрии свидетельствуют о том, что можно обнаружить такие изменения в процессе роста бактерий, которые в противном случае могли бы остаться незамеченными.

Биореактор (ферментер) Techfors-S, Infors  Проточный цитофлуориметр, Amnis ImageStreamX Mark II, Luminex

Оборудование, использованное в эксперименте по исследованию бактерий как потенциальных инструментов для мониторинга процессов в промышленной биотехнологии.

1. Биореактор (ферментер) Techfors-S, Infors

2. Проточный цитофлуориметр, Amnis ImageStreamX Mark II, Luminex

Метод проточной цитометрии для количественной оценки бактерий и их биомассы в активном иле

Определению абсолютного количества бактерий в активном иле уделяется мало внимания. Получение информации о структуре, функции бактерий и их ответ на окружающую среду в актовном иле является необходимой для водных экосистем.

Проточная цитометрия это быстрый, лёгковоспроизводимый и экономичный метод для решения определения общего количества бактерий и концентрации биомассы в активном иле, по сравнению с другими утомительными, трудоёмкими методами. Измерение общего объёма бактерий проточной цитометрией в сочетании с секвенированием, позволит изучить биоразнообразие, филогению и систематику, физиологию, экологию и эксплуатацию в биопроизводстве.

Заключение

Проточная цитометрия — это незаменимый инструмент для улучшения оптимизации биопроцессов (в биореакторах). Проточная цитометрия позволяет контролировать быстрые морфологические изменения и оценивать внутреннее состояние клеток в реальном времени.

Литература

1) Extracellular vesicles concentration is a promising and important parameter for industrial bioprocess monitoring. Biotechnol J. 2016 May;11(5):603-9. doi: 10.1002/biot.201500049. Epub 2016 Feb 12.

2) Automated Online Flow Cytometry Advances Microalgal Ecosystem Management as in situ, High-Temporal Resolution Monitoring Tool. Front Bioeng Biotechnol. 2021 Mar 23;9:642671. doi: 10.3389/fbioe.2021.642671. eCollection 2021.

3) Monitoring the Physiological State in the Dark Fermentation of Maize/Grass Silage Using Flow Cytometry and Electrooptic Polarizability Measurements. Carlos E. Gómez-Camacho, Klaus Pellicer Alborch, Anika Bockisch, Peter Neubauer, Stefan Junne & Bernardo Ruggeri. BioEnergy Research volume 14, pages 910–923 (2021).

4) Bacterial Flow Cytometry and Imaging as Potential Process Monitoring Tools for Industrial Biotechnology. Sumana Kadamalakunte Narayana, Sanjaya Mallick, Henrik Siegumfeldt and Frans van den Berg Fermentation 2020, 6, 10; doi:10.3390/fermentation6010010.

5) A flow cytometry method for bacterial quantification and biomass estimates in activated sludge. M.R. BrownC.L. HandsT. Coello-GarciaB.S. SaniA.I.G. OttS.J. SmithR.J. Davenport. Journal of Microbiological Methods. https://doi.org/10.1016/j.mimet.2019.03.022. Volume 160, May 2019, pages 73-83.


Информация для заказа:

Пока нет данных. Перейти в каталог
0500-3115
20 582 719
20 582 719 AMD
Muse — компактный клеточный анализатор, работающий по принципу проточной цитометрии для простого и недорого и быстрого анализа. Управление через сенсорный дисплей, интуитивное программное обеспечение, оптимизированные наборы реагентов формата «смешать и измерить» вместе обеспечивают существенное упрощение решения исследовательских задач.

Клеточный анализатор Muse обеспечивает прямое измерение концентрации клеток (без использования референсных частиц) и количественную детекцию флуоресцентных параметров. Оптимизированные наборы реагентов и адаптированные к ним модули программного обеспечения позволяют определять жизнеспособность клеток, апоптоз на разных этапах, исследовать пролиферацию и клеточный цикл, клеточный сигналинг, параметры иммунного статуса и др.

Analisys

Cell concentration

Viability

Average % CV

% CV Range

Average % CV

% CV Range

Image-based Automated Counter

9,2% 1,2-23,3% 3,7% 0,8-12,1%

Manual Hemocytometer

9,2% 6,3% 4,5% 0,5-9,2%

Muse

4% 0,3-8,8% 2,2% 0,4-5,6%

Преимущества системы:

  • компактность: можно поставить в любом месте;
  • легкость и простота использования: готовые наборы реагентов c упрощенной пробоподготовкой;
  • интуитивное управление: позволяет сделать работу максимально комфортной;
  • программные модули адаптированы под наборы реагентов: простой анализ образцов;
  • универсальность: два открытых программных модуля под реагенты пользователя;
  • возможность обслуживания без участия сервисного инженера.

Другие методы анализа

Muse

Счетные камеры (например, камера Горяева)

Ограничения в связи с низким разрешением поглощения красителя для определения жизнеспособности. Погрешности, связанные с ручным подсчетом.
Анализ Muse Count and Viability

Точный, основанный на флуоресцентном окрашивании метод определения живых и мертвых клеток. Микрокапиллярная флюидика для прямого подсчета концентрации с высокой точностью.
Автоматические гемоцитометры и клеточные анализаторы на основе светлопольной микроскопии

Низкая точность в результате анализа небольшого числа клеток, использование ограничено подсчетом концентрации и жизнеспособности.
Методы анализа Muse

Флуоресцентный сигнал на основе специфичного связывания реагентов с мишенями. Статистическая достоверность достигается измерением тысяч клеток за несколько минут.
Вестерн-блот и другие методы обобщенного анализа клеточной популяции

Гетерогенность популяции теряется при пулировании.
Методы времязатратные и требуют внешнего контроля.
Реагенты должны быть оптимизированы и валидированы.
Результаты качественные или, в лучшем случае, полуколичественные.
Методы анализа Muse

Результаты для популяции в каждом образце на основе анализа каждой клетки.
Очень простые методы пробоподготовки, дополнительно нужны только пипетки.
Реагенты оптимизированы и валидированы для использования на разных типах клеток.
Большие проточные цитометры

Реагенты должны быть валидированы.
Оптимизация требует затрат времени и ценного образца.
Нужна отдельная настройка установок прибора под каждую задачу.
Методы анализа Muse

Флуоресцентные реагенты уже подобраны под лазер и детекторы Muse, оптимизированы для разных типов клеток.
Валидированные методы анализа, оптимизированная пробоподготовка и предустановленные настройки прибора в программном обеспечении.

Технические характеристики:

  • твердотельный зелёный диодный лазер — 532 нм, 20 мВт;
  • параметры: прямое светорассеяние, два параметра флуоресценции;
  • фильтры для детекции флуоресценции: 576/±28 (желтый), 680/±30нм (красный);
  • CV, % — менее 10, стандартно менее 5;
  • типы клеток: гомогенные или гетерогенные, адгезивные или суспензионные, первичные или клеточные линии;
  • диапазон концентрации клеток, тыс. кл./мл — 10-500;
  • размер клеток в диаметре, мкм — 2-60+;
  • объём образца, мкл — 50-200+;
  • формат загрузки образцов — пробирка (тип «эппендорф», 1,5 мл);
  • 3 скорости пробоотбора — 7,2, 14,4 и 36 мкл/мин;
  • кварцевая капиллярная ячейка 1,5 мм x 0,8 мм, внутренний диаметр канала — 100 мкм;
  • прецизионная шприцевая помпа с шаговым двигателем для подачи образца;
  • анализ: на самом анализаторе или внешнем компьютере (экспорт через USB pdf-отчетов, csv-файлов со статистикой, исходных данных в виде файлов fsc);
  • габариты, Ш × Г × В, мм — 207 × 283 × 221;
  • вес, кг — 5,9.


Проточный цитофлуориметр Muse, видеообзор, Luminex, 2019


Расширенные возможности клеточного анализатора Guava Muse с новыми открытыми модулями, Luminex, постер, англ. яз., 1 стр.pdf

Быстрая детекция каспазной активности в клетках, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 2 стр.pdf

Быстрая и чувствительная детекция апоптоза с использованием аннексина V, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 2 стр.pdf

Кинетика продукции внутриклеточного NO и цитотоксичности при липополисахарид- и гамма-интерферон-активации макрофагов, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 4 стр.pdf



См. также: Заказ антител Abcam
0500-4012
По запросу
По запросу

Особенность всех проточных цитофлуориметров серии Guava easyCyte – проточная ячейка на основе запатентованной микрокапиллярной технологии. Использование микрокапиллярных взаимодействий для выравнивания клеток в потоке позволило отказаться от обжимающей жидкости и снизить количество отходов (до 50 мл за 8 часов работы).

Интуитивное программное обеспечение собирает и анализирует данные с помощью готовых программных модулей либо на основе настроек, самостоятельно оптимизированных пользователем для решения исследовательских задач.

Проточные цитометры Guava easyCyte компактны, экономичны и просты в работе и обслуживании. Микрокапиллярная проточная ячейка построена на основе кварцевого капилляра квадратного сечения со стороной 100 мкм, пригодна для работы с разным типом клеток, ее обслуживание (в том числе при забивке) проводится пользователем и не требует вызова сервисного инженера. Существуют конфигурации с разным набором лазеров и детекторов, с загрузкой из одиночных пробирок (конфиг. SL) и/или из 96-луночных планшетов (конфиг. HT). В целом, это простой, надежный и недорогой прибор для решения разного типа задач.


Технические характеристики:

  • твердотельные полупроводниковые лазеры, до 3 лазеров из списка: 405, 488, 532 и 642 нм;
  • регистрация до 14 параметров: 2 детектора светорассеяния и до 12 каналов флуоресценции;
  • минимальный объем образца — 100 мкл для лунок планшета, 150 мкл для пробирок объемом 0,5 мл, 900 мкл для пробирок объемом 1,5 мл;
  • диапазон концентрации клеток, тыс. кл./мл — 10-500;
  • скорость: 7-70 мкл/мин, 10-1000 событий в секунду;
  • точность: коэффициент вариации менее 4% (определен по ядрам эритроцитов курицы);
  • размер клеток/частиц, мкм: 0,2 – 60;
  • количество отходов: 50 мл за 8 часов работы;
  • формат загрузки образцов — пробирка «эппендорф» объемом 1,5 мл (SL), 96-луночные планшеты и пробирки «эппендорф» объемом 0,5/1,5 мл (HT);
  • габариты, Ш × Г × В, см — 61 × 45 × 24 (SL), 61 × 51 × 25 (HT);
  • вес, кг — 15,9 (SL), 31,8 (HT).

Конфигурации Guava EasyCyte:

Модель

Число каналов

405 нм
(100 мВт)

488 нм
(50 мВт)

488 нм
(150 мВт)

532 нм
(100 мВт)

642 нм
(100 мВт)

5, 5HT
5 V
5HPL, 5HPL HT
5 V
6-2L, 6-2L HT
6 V V
8, 8HT
8 V V
BG, BG HT
10 V V
11, 11HT
11 V V
BGR, BGR HT
12 V V V
12, 12HT
13 V V V
BGV, BGV HT
14 V V V

Guava-8.png


Проточные цитометры Guava easyCyte, видеообзор, Luminex, 2020




Сбор данных на проточном цитометре Guava easyCyte, видео, Luminex, 2019



Проточные цитометры Guava easyCyte, Luminex, брошюра, англ. яз.,16 стр.pdf

Технические характеристики Guava easyCyte, Luminex, англ. яз., 3 стр.pdf

См. также: Заказ антител Abcam


100370
По запросу
По запросу
Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это новое направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке.

Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости.

Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей
микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого
спектра новых приложений.

Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные
с изображениями:
  • нажмите на точку в любом плоте данных, чтобы увидеть соответствующее изображение;
  • кликните на интервал на любой гистограмме, чтобы увидеть каждую клетку в этом интервале;
  • нарисуйте гейты на дот-плотах и вы увидите результирующие популяции клеток для валидации результатов.
Иннновационная технология цитометров Amnis увеличивает сигнал и уменьшает шум, обеспечивая беспрецедентную фотонную чувствительность. Детали конфигурации, такие как специальный боковой скаттер-лазер, регулируемая интенсивность лазерного излучения и анализ светлопольных изображений для прямого анализа клеток позволяют системе более эффективно разделять клеточные популяции, чем при использовании более дорогих проточных цитометров. Простота в использовании, выдающаяся производительность и анализ изображений каждой клетки отвечают потребностям как новичков, так и экспертов в области проточной цитометрии.

  • Применим в любой научно-исследовательской дисциплине;
  • детекция с использованием высокочувствительной камеры Hamamatsu, что позволяет драматически улучшить разрешение по отношению к традиционным проточным цитометрам;
  • сконфигурирован для задач лабораторий любого фокуса и бюджета;
  • характеризует популяции практически по любому визуальному или флуоресцентному параметру;
  • лазеры — до 4-х:
  • стандартно — 488 нм;
  • опция — 405, 561, 642 нм;
  • до 12 каналов детекции;
  • опциональный автосэмплер для 96-луночных планшетов;
  • увеличение 20Х (стандарт).
100220
По запросу
По запросу
Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это новое направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке.

Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости.

Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей
микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого
спектра новых приложений.

Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные
с изображениями:
  • нажмите на точку в любом плоте данных, чтобы увидеть соответствующее изображение;
  • кликните на интервал на любой гистограмме, чтобы увидеть каждую клетку в этом интервале;
  • нарисуйте гейты на дот-плотах и вы увидите результирующие популяции клеток для валидации результатов.
Иннновационная технология цитометров Amnis увеличивает сигнал и уменьшает шум обеспечивая беспрецедентную фотонную чувствительность. Детали конфигурации, такие как специальный боковой скаттер-лазер, регулируемая интенсивность лазерного излучения и анализ светлопольных изображений для прямого анализа клеток позволяют системе более эффективно разделять клеточные популяции, чем при использовании более дорогих проточных цитометров. Простота в использовании, выдающаяся производительность и анализ изображений каждой клетки отвечают потребностям как новичков, так и экспертов в области проточной цитометрии.

  • Анализирует тысячи клеток в секунду при 60X увеличении;
  • простой пользовательский интерфейс с графиками и гейтированием в режиме реального времени;
  • система может быть сконфигурирована с любым числом лазеров — от одного до семи;
  • изменение увеличения микроскопа позволяет осуществлять анализ изображений как мелких частиц, так и очень больших клеток или даже их конгломератов.
Технические характеристики:
  • лазеры – до 7:
    • стандартно 488 нм;
    • опция 375, 405, 561, 592, 642, 730 нм;
  • стандартно 6 каналов флуоресценции высокого разрешения (до 12 каналов опционально);
  • увеличение 40Х (стандарт) и 20Х, 60Х (опция);
  • опциональный автосэмплер для 96-луночных планшетов.
Система проточной визуализирующей цитометрии Amnis, Merck, русск. яз, 36 стр.

CS-100196
По запросу
По запросу
Проточный цитометр CellStream, Luminex — компактная система, обладающая высокой чувствительностью и гибкостью для мультипараметрического анализа клеток и субмикронных частиц:
  • до 7 неколлинеарных лазеров,
  • до 20 флуоресцентных каналов,
  • возможность визуальной верификации результатов.
Уникальная система детекции сигнала Amnis, используемая в цитометрах CellStream, обеспечивает высокую чувствительность, до 10 раз превышающую чувствительность фотоумножителей (PMT, photomultiplier tube) традиционных систем проточной цитометрии. CCD камера с большой скоростью захватывает усиленные с помощью технологии TDI (time delay integration, накопление сигнала во времени) изображения низкого разрешения и трансформирует их в высокоинформативные данные по интенсивности. В результате исследователь получает данные по интенсивности, привычные для традиционной проточной цитометрии, но с большей чувствительностью флуоресценции.

В отличие от традиционных систем на базе PMT, проточный цитометр CellStream регистрирует изображения, что дает возможность анализировать морфологические параметры и обеспечивает визуализацию всех событий, а следовательно, и простую верификацию выделения популяций, отделения одиночных событий от агрегатов и т.д.

Уникальные возможности CellStream:
  • запатентованная камера с уникальной технологией TDI для проточных цитометров Amnis;
  • визуальное подтверждение результатов;
  • высокие чувствительность и разрешение;
  • анализ морфологических параметров: площадь, соотношение сторон, значение интенсивности самого яркого пикселя — наряду с данными по общей интенсивности;
  • детекция и разделение субмикронных частиц;
  • автоматические очистка и калибровка;
  • автосэмплер для 96-луночного планшета уже в базовой комплектации;
  • валидация по стандартам GMP.

Технические характеристики:
  • максимально 7 лазеров, нм — 375, 405, 488, 532, 561, 642, 730 нм;
  • мощность лазеров: 375 нм — 70 мВт, 405 нм — 175 мВт, 488 нм — 200 мВт, 532 нм — 150 мВт, 561 нм — 150 мВт, 642 нм — 150 мВт, 730 нм — 40 мВт;
  • каналы детекции – FSC¹, SSC², до 20 флуоресцентных;
  • чувствительность MESF³ — <10 FITC, <5 PE;
  • разрешение по параметрам светорассеяния — FSC < 300 нм, SSC < 200 нм;
  • коэффициент вариации (CV) — < 3% (определен по ядрам эритроцитов курицы);
  • формат загрузки — 1 пробирка или 96-луночный планшет;
  • скорость потока — 3.66 / 14.64 мкл/мин;
  • скорость сбора данных — до 20 000 клеток/сек;
  • метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
  • габариты, Ш × Г × В — 440 × 625 × 495 мм.

¹ FSC, forward scatter — прямое светорассеивание.
² SSC, side scatter — боковое светорассеивание.
³ MESF, molecules of equivalent soluble fluorochrome — число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.


Проточный цитометр Amnis CellStream, видеообзор, Luminex, 2019



16-цветное иммуннофенотипирование главных субпопуляций лимфоцитов и миелоидных клеток в мононуклеарной фракции и цельной крови с помощью проточного цитометра Amnis CellStream, постер, англ.яз., 1 стр.pdf

Проточный цитометр Amnis CellStream, Luminex, брошюра, англ.яз., 7 стр.pdf

Иммуннофенотипирование экстрацеллюлярных везикул с помощью проточного цитометра Amnis CellStream, брошюра, англ.яз., 4 стр.pdf.

A31266_comp
По запросу
По запросу
Уникальная особенность Attune NxT — функция акустической фокусировки, позволяющей проводить измерения с высокой скоростью без потери качества, сохраняя низкую вариабельность.

Возможности Attune NXT при анализе плоидности:
  • высокая скорость измерения с сохранением низких значений коэффициента вариации;
  • возможность использовать готовые реагенты Thermo FS для окраски ядер или использовать реагенты сторонних производителей;
  • отработанные протоколы для разных задач в анализе плоидности;
  • классический анализ плоидности при помощи голубого лазера (488 нм) и йодистого пропидия;
  • возможность установки дополнительных лазеров (можно докупать после покупки прибора);
  • легкая замена фильтров при необходимости их оптимизации;
  • возможность использовать опциональный автосэмплер и роботизированную подачу для автоматической смены образцов и ускорения производительности;
  • универсальность — при необходимости прибор можно использовать и для других задач в области проточной цитометрии.

Технические характеристики:
  • лазеры — 1 (488 нм, 50 мВт), возможен апгрейд на рабочем месте пользователя до 4х-лазерной конфигурации;
  • профиль лазера: 10 x 50 мкм, с плоской вершиной;
  • каналы детекции — FSC¹, SSC², 4 флуоресцентных (до 14 флуоресцентных параметров при покупке дополнительных лазеров);
  • чувствительность MESF³ — ≤ 80 MESF for FITC, ≤ 30 MESF for PE;
  • формат загрузки — пробирки размерами от 17 x 100 мм до 8,5 x 45 мм (включая стандартные пробирки на 1,5, 2 и 5 мл), опциональный автозагрузчик для 96- и 384-луночных планшетов;
  • скорость потока — 12,5-1000 мкл/мин;
  • скорость сбора данных — до 65 000 событий/сек;
  • метод определения концентрации частиц — прямой подсчет;
  • габариты, Ш × Г × В — 400 × 580 × 430 мм;
  • вес — 29 кг.
Предложение включает проточный цитофлуориметр Attune NxT, оснащенный лазером 488 нм и 4 детекторами флуоресценции, 1 год гарантии. В комплект поставки входит дополнительный фильтр 603/48, оптимизированный под флуоресценцию йодистого пропидия, и стартовый набор реагентов для запуска.

¹ forward scatter, прямое светорассеивание;
² side scatter, боковое светорассеивание;
³ molecules of equivalent soluble fluorochrome, число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.

Проточный цитометр Attune NxT, Thermo FS, брошюра, русск., 36 стр.
Технические характеристики Attune Nxt, Thermo FS, брошюра, англ., 8 стр.
A24858
По запросу
По запросу
Уникальная особенность Attune NxT — функция акустической фокусировки, позволяющей проводить измерения с высокой скоростью без потери качества, сохраняя низкую вариабельность.

Возможности технологии акустической фокусировки:
  • высокая скорость анализа при минимальном расходе реагентов;
  • высокая точность и минимальная вариабельность данных;
  • быстрый анализ без потери чувствительности;
  • детекция редких событий в количестве, достаточном для статистической обработки;
  • окраска антителами без необходимости отмывки.

Технические характеристики:
  • лазеры — до 4х одновременно из 5 доступных: 405 нм (50 мВт), 488 нм (50 мВт), 532 (100 мВт), 561 нм (50 мВт), 637 нм (100 мВт);
  • профиль лазеров: 10 x 50 мкм, с плоской вершиной;
  • каналы детекции — FSC¹, SSC², до 14 флуоресцентных, опциональный дополнительный параметр SSC на фиолетовом лазере (405 нм);
  • чувствительность MESF³ — ≤ 80 MESF for FITC, ≤ 30 MESF for PE, ≤70 MESF for APC;
  • формат загрузки — пробирки размерами от 17 x 100 мм до 8,5 x 45 мм (включая стандартные пробирки на 1,5, 2 и 5 мл), опциональный автозагрузчик для 96- и 384-луночных планшетов;
  • скорость потока — 12,5-1000 мкл/мин;
  • скорость сбора данных — до 65 000 клеток/сек;
  • метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
  • габариты, Ш × Г × В — 400 × 580 × 430 мм;
  • вес — 29 кг.

¹ forward scatter, прямое светорассеивание;
² side scatter, боковое светорассеивание;
³ molecules of equivalent soluble fluorochrome, число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.

Проточный цитометр Attune NxT, Thermo FS, брошюра, русск., 36 стр.
Технические характеристики Attune Nxt, Thermo FS, брошюра, англ., 8 стр.

См. также: Заказ антител Abcam.

Bigfoot
По запросу
По запросу
P3566
10 мл
хранение +2...+8 в темноте, транспортировка комнатная температура
253 305
253 305 AMD
Красный флюоресцентный краситель, окрашивает ядро и хромосомы, так как не проникает в живые клетки, используется для окрашивания мёртвых клеток в популяции. Применяется для флюоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии, проточной цитометрии и флюорометрии.

Длина волны возбуждения флуоресценции, нм — 535.
Длина волны испускания флуоресценции, нм — 617.
P21493
100 мг
298 075
298 075 AMD
Красный флюоресцентный краситель, окрашивает ядро и хромосомы, так как не проникает в живые клетки, используется для окрашивания мёртвых клеток в популяции. Применяется для флюоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии, проточной цитометрии и флюорометрии.

Длина волны возбуждения флуоресценции, нм — 535.
Длина волны испускания флуоресценции, нм — 617.
P1304MP
100 мг
233 385
233 385 AMD
Красный флюоресцентный краситель, окрашивает ядро и хромосомы, так как не проникает в живые клетки, используется для окрашивания мёртвых клеток в популяции. Применяется для флюоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии, проточной цитометрии и флюорометрии.

Длина волны возбуждения флуоресценции, нм — 535.
Длина волны испускания флуоресценции, нм — 617.

См. также:

Аксессуары для проточных цитофлуориметров

Флуоресцентные красители

Секвенаторы

Клеточные культуры

Центрифуги


Вам также может быть интересно:

Определение плоидности клеток растений методами проточной цитометрии

Проточный цитометр ZE5, Bio-Rad для фармацевтической промышленности – технологический прорыв!


Ниже вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме

Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!