На протяжении многих лет плоидность оценивали с помощью различных методов, но в настоящее время наиболее часто используемым методом становится проточная цитометрия (ПЦ). Проточная цитометрия – высокопроизводительный, точный и чувствительный метод, позволяющий сравнивать растения с разным размером генома, а также определять абсолютное содержание ДНК, используя контрольные образцы. Популярность проточной цитометрии заключается в простоте пробоподготовки, и возможности за короткое время проанализировать ядра нескольких тысяч клеток, обеспечивая высокую скорость анализа, точность и статистическую достоверность. Анализ ДНК в ядрах клеток дает информацию о плоидности организма и представляет большую ценность для потенциального увеличения урожайности с применением биотехнологий в современном сельском хозяйстве. Данные исследования проводятся с использованием такого оборудования как цитометры и сортеры.
Подготовка образца для измерения простая: ядра выделяются при тщательном измельчении образца в буфере лезвием бритвы (рис.1 Б), далее гомогенат фильтруют через мембрану (рис. 1 В), ядра окрашиваются ДНК-связывающим флуоресцентным красителем (рис. 1 Г) и измеряются на «классическом» проточном цитометре или клеточном сортере (рис. 1 Д). Ядра обычно выделяют из свежих листьев, но также пригодны для выделения сухие семена, высушенные или замороженные ткани и даже пыльца. Автоматизация выделения, одновременное измельчение большого количества проб может достигаться путем применения гомогенизатора (рис. 1 Д).
Рис. 1. Пробоподготовка растительной такни для последующего изучения на проточном цитометре и/или сортере.
Интенсивность флуоресценции окрашенных ядер, то есть относительное содержание ДНК, может быть переведено в абсолютное значение при сравнении с образцом с известным размером генома (экспериментальный и контрольный образцы измельчаются, окрашиваются одновременно с испитуемим образцом). Результат измерения это гистограмма (Рис. 2, 3, 4) распределения флуоресцентного сигнала, где каждый пик характеризует ядра со схожим количеством ДНК, чем выше уровень плоидности, тем правее расположение пика. Для каждого пика подсчитывается среднее значение флуоресценции, которое выражается как коэффициент вариации (CV), используемые для характеристики уровня плоидности и статистической достоверности измерения. В результате, для каждого ядра подсчитывается значение интенсивности флуоресценции, которая пропорциональна количеству связанного с ДНК красителем, то есть содержанию ДНК в ядре. В результате, для каждого ядра подсчитывается значение интенсивности флуоресценции, которая пропорциональна количеству связанного с ДНК красителем, то есть содержанию ДНК в ядре.
Рис. 4. Типичные гистограммы характерные для диплоидных-2С (А) и тетраплоидных-С4 (В) форм растения R. acetosa in vitro получены методом проточной цитометрии.
Также с использованием проточного цитометра Attune NxT, (Thermo FS) возможно:
После проведения цитометрии и сортинга отобранные растительные клетки можно использовать для исследования клеточного метаболизма, генной экспрессии, претеомного анализа и др.
1) Коломиец О. О., Павлова И. В., Глушен С. В. Цитометрический анализ плоидности и пролиферации клеток у растущих in vitro линий овощных культур // Генетика. – 2015. – Т. 10. – С. 116.
2) Pellicer J., Leitch I. J. The application of flow cytometry for estimating genome size and ploidy level in plants //Molecular plant taxonomy. – Humana Press, Totowa, NJ, 2014. – С. 279-307.
3) David Galbraith, Elizabeth Villalobos. Analysis of plant genome sizes using flow cytometry: a case study demonstrating dynamic range and measurement linearity // Menuey School of Plant Sciences and Bio5 Institute.
4) Antoniadi I. et al. Fluorescence activated cell sorting—A selective tool for plant cell isolation and analysis //Cytometry Part A. – 2021.
5) Зубко О.Н., Соколов В.О., Шумеев А.Н., Ирхин С.Ю. Определение плоидности методом проточной цитометрии в селекции F1-гибридов Brassica// Всероссийский Съезд по защите растений.
A31266_comp
|
|
|
По запросу По запросу |
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Уникальная особенность Attune NxT — функция акустической фокусировки, позволяющей проводить измерения с высокой скоростью без потери качества, сохраняя низкую вариабельность.
Возможности Attune NXT при анализе плоидности:
Технические характеристики:
¹ forward scatter, прямое светорассеивание; ² side scatter, боковое светорассеивание; ³ molecules of equivalent soluble fluorochrome, число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома. Проточный цитометр Attune NxT, Thermo FS, брошюра, русск., 36 стр. Технические характеристики Attune Nxt, Thermo FS, брошюра, англ., 8 стр. |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
A24858
|
|
|
По запросу По запросу |
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Уникальная особенность Attune NxT — функция акустической фокусировки, позволяющей проводить измерения с высокой скоростью без потери качества, сохраняя низкую вариабельность.
Возможности технологии акустической фокусировки:
Технические характеристики:
¹ forward scatter, прямое светорассеивание; ² side scatter, боковое светорассеивание; ³ molecules of equivalent soluble fluorochrome, число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома. Проточный цитометр Attune NxT, Thermo FS, брошюра, русск., 36 стр. Технические характеристики Attune Nxt, Thermo FS, брошюра, англ., 8 стр. См. также: Заказ антител Abcam. |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
0500-3115
|
|
|
20 582 719
20 582 719 AMD
|
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Muse — компактный клеточный анализатор, работающий по принципу проточной цитометрии для простого и недорого и быстрого анализа. Управление через сенсорный дисплей, интуитивное программное обеспечение, оптимизированные наборы реагентов формата «смешать и измерить» вместе обеспечивают существенное упрощение решения исследовательских задач.
Клеточный анализатор Muse обеспечивает прямое измерение концентрации клеток (без использования референсных частиц) и количественную детекцию флуоресцентных параметров. Оптимизированные наборы реагентов и адаптированные к ним модули программного обеспечения позволяют определять жизнеспособность клеток, апоптоз на разных этапах, исследовать пролиферацию и клеточный цикл, клеточный сигналинг, параметры иммунного статуса и др.
Преимущества системы:
Технические характеристики:
Проточный цитофлуориметр Muse, видеообзор, Luminex, 2019
Быстрая детекция каспазной активности в клетках, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 2 стр.pdf
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
0500-4012
|
|
|
По запросу По запросу |
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Особенность всех проточных цитофлуориметров серии Guava easyCyte – проточная ячейка на основе запатентованной микрокапиллярной технологии. Использование микрокапиллярных взаимодействий для выравнивания клеток в потоке позволило отказаться от обжимающей жидкости и снизить количество отходов (до 50 мл за 8 часов работы). Технические характеристики:
Конфигурации Guava EasyCyte:
Сбор данных на проточном цитометре Guava easyCyte, видео, Luminex, 2019 Проточные цитометры Guava easyCyte, Luminex, брошюра, англ. яз.,16 стр.pdf Технические характеристики Guava easyCyte, Luminex, англ. яз., 3 стр.pdf См. также: Заказ антител Abcam |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
100370
|
|
|
По запросу По запросу |
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это новое направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке.
Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости. Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого спектра новых приложений. Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные с изображениями:
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
100220
|
|
|
По запросу По запросу |
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это новое направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке.
Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости. Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого спектра новых приложений. Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные с изображениями:
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CS-100196
|
|
|
По запросу По запросу |
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Проточный цитометр CellStream, Luminex — компактная система, обладающая высокой чувствительностью и гибкостью для мультипараметрического анализа клеток и субмикронных частиц:
В отличие от традиционных систем на базе PMT, проточный цитометр CellStream регистрирует изображения, что дает возможность анализировать морфологические параметры и обеспечивает визуализацию всех событий, а следовательно, и простую верификацию выделения популяций, отделения одиночных событий от агрегатов и т.д. Уникальные возможности CellStream:
Технические характеристики:
¹ FSC, forward scatter — прямое светорассеивание. ² SSC, side scatter — боковое светорассеивание. ³ MESF, molecules of equivalent soluble fluorochrome — число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома. Проточный цитометр Amnis CellStream, видеообзор, Luminex, 2019 16-цветное иммуннофенотипирование главных субпопуляций лимфоцитов и миелоидных клеток в мононуклеарной фракции и цельной крови с помощью проточного цитометра Amnis CellStream, постер, англ.яз., 1 стр.pdf Проточный цитометр Amnis CellStream, Luminex, брошюра, англ.яз., 7 стр.pdf Иммуннофенотипирование экстрацеллюлярных везикул с помощью проточного цитометра Amnis CellStream, брошюра, англ.яз., 4 стр.pdf. |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Bigfoot
|
|
|
По запросу По запросу |
|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
R37169
|
|
|
хранение комнатная температура, транспортировка комнатная температура
|
236 366
236 366 AMD
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Наборы Invitrogen Ready Flow представляют собой готовые к применению растворы красителей, устойчивые к длительному хранению при комнатной температуре.
Флаконы в формате капельницы и разработанные для того, чтобы вы могли окрашивать клетки тратя время на приготовление растворов и расчёты. Просто добавьте несколько капель красителя в культуру клеток и проинкубируйте. Преимущества.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
Фильтрующие насадки (шприцевые фильтры)
Мельница для измельчения растительной ткани
Набор для проведения прямой ПЦР из образцов растений
Реагент Plant DNAzol для экстракции ДНК из растений
Набор для выделения геномной ДНК из растительных образцов DNEasy Plant Mini Kit
Центрифуги для осаждения на низких оборотах
Фитогормоны и другие стимуляторы роста
Высокопроизводительное генотипирование в сельском хозяйстве
Решения Thermo Fisher Scientific для генетического анализа
С помощью личного кабинета Вы сможете: