Проточная цитометрия в биотехнологическом производстве

Muse — компактный клеточный анализатор, работающий по принципу проточной цитометрии для простого и недорого и быстрого анализа. Управление через сенсорный дисплей, интуитивное программное обеспечение, оптимизированные наборы реагентов формата «смешать и измерить» вместе обеспечивают существенное упрощение решения исследовательских задач.

Клеточный анализатор Muse обеспечивает прямое измерение концентрации клеток (без использования референсных частиц) и количественную детекцию флуоресцентных параметров. Оптимизированные наборы реагентов и адаптированные к ним модули программного обеспечения позволяют определять жизнеспособность клеток, апоптоз на разных этапах, исследовать пролиферацию и клеточный цикл, клеточный сигналинг, параметры иммунного статуса и др.

Analisys	Cell concentration		Viability
	Average % CV	% CV Range	Average % CV	% CV Range
Image-based Automated Counter	9,2%	1,2-23,3%	3,7%	0,8-12,1%
Manual Hemocytometer	9,2%	6,3%	4,5%	0,5-9,2%
Muse	4%	0,3-8,8%	2,2%	0,4-5,6%

Преимущества системы:

• компактность: можно поставить в любом месте;
• легкость и простота использования: готовые наборы реагентов c упрощенной пробоподготовкой;
• интуитивное управление: позволяет сделать работу максимально комфортной;
• программные модули адаптированы под наборы реагентов: простой анализ образцов;
• универсальность: два открытых программных модуля под реагенты пользователя;
• возможность обслуживания без участия сервисного инженера.

Другие методы анализа	Muse
Счетные камеры (например, камера Горяева) Ограничения в связи с низким разрешением поглощения красителя для определения жизнеспособности. Погрешности, связанные с ручным подсчетом.	Анализ Muse Count and Viability Точный, основанный на флуоресцентном окрашивании метод определения живых и мертвых клеток. Микрокапиллярная флюидика для прямого подсчета концентрации с высокой точностью.
Автоматические гемоцитометры и клеточные анализаторы на основе светлопольной микроскопии Низкая точность в результате анализа небольшого числа клеток, использование ограничено подсчетом концентрации и жизнеспособности.	Методы анализа Muse Флуоресцентный сигнал на основе специфичного связывания реагентов с мишенями. Статистическая достоверность достигается измерением тысяч клеток за несколько минут.
Вестерн-блот и другие методы обобщенного анализа клеточной популяции Гетерогенность популяции теряется при пулировании. Методы времязатратные и требуют внешнего контроля. Реагенты должны быть оптимизированы и валидированы. Результаты качественные или, в лучшем случае, полуколичественные.	Методы анализа Muse Результаты для популяции в каждом образце на основе анализа каждой клетки. Очень простые методы пробоподготовки, дополнительно нужны только пипетки. Реагенты оптимизированы и валидированы для использования на разных типах клеток.
Большие проточные цитометры Реагенты должны быть валидированы. Оптимизация требует затрат времени и ценного образца. Нужна отдельная настройка установок прибора под каждую задачу.	Методы анализа Muse Флуоресцентные реагенты уже подобраны под лазер и детекторы Muse, оптимизированы для разных типов клеток. Валидированные методы анализа, оптимизированная пробоподготовка и предустановленные настройки прибора в программном обеспечении.

Технические характеристики:

• твердотельный зелёный диодный лазер — 532 нм, 20 мВт;
• параметры: прямое светорассеяние, два параметра флуоресценции;
• фильтры для детекции флуоресценции: 576/±28 (желтый), 680/±30нм (красный);
• CV, % — менее 10, стандартно менее 5;
• типы клеток: гомогенные или гетерогенные, адгезивные или суспензионные, первичные или клеточные линии;
• диапазон концентрации клеток, тыс. кл./мл — 10-500;
• размер клеток в диаметре, мкм — 2-60+;
• объём образца, мкл — 50-200+;
• формат загрузки образцов — пробирка (тип «эппендорф», 1,5 мл);
• 3 скорости пробоотбора — 7,2, 14,4 и 36 мкл/мин;
• кварцевая капиллярная ячейка 1,5 мм x 0,8 мм, внутренний диаметр канала — 100 мкм;
• прецизионная шприцевая помпа с шаговым двигателем для подачи образца;
• анализ: на самом анализаторе или внешнем компьютере (экспорт через USB pdf-отчетов, csv-файлов со статистикой, исходных данных в виде файлов fsc);
• габариты, Ш × Г × В, мм — 207 × 283 × 221;
• вес, кг — 5,9.

Проточный цитофлуориметр Muse, видеообзор, Luminex, 2019

Расширенные возможности клеточного анализатора Guava Muse с новыми открытыми модулями, Luminex, постер, англ. яз., 1 стр.pdf

Быстрая детекция каспазной активности в клетках, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 2 стр.pdf

Быстрая и чувствительная детекция апоптоза с использованием аннексина V, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 2 стр.pdf

Кинетика продукции внутриклеточного NO и цитотоксичности при липополисахарид- и гамма-интерферон-активации макрофагов, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 4 стр.pdf

См. также: Заказ антител Abcam

Особенность всех проточных цитофлуориметров серии Guava easyCyte – проточная ячейка на основе запатентованной микрокапиллярной технологии. Использование микрокапиллярных взаимодействий для выравнивания клеток в потоке позволило отказаться от обжимающей жидкости и снизить количество отходов (до 50 мл за 8 часов работы).

Интуитивное программное обеспечение собирает и анализирует данные с помощью готовых программных модулей либо на основе настроек, самостоятельно оптимизированных пользователем для решения исследовательских задач.

Проточные цитометры Guava easyCyte компактны, экономичны и просты в работе и обслуживании. Микрокапиллярная проточная ячейка построена на основе кварцевого капилляра квадратного сечения со стороной 100 мкм, пригодна для работы с разным типом клеток, ее обслуживание (в том числе при забивке) проводится пользователем и не требует вызова сервисного инженера. Существуют конфигурации с разным набором лазеров и детекторов, с загрузкой из одиночных пробирок (конфиг. SL) и/или из 96-луночных планшетов (конфиг. HT). В целом, это простой, надежный и недорогой прибор для решения разного типа задач.

Технические характеристики:

• твердотельные полупроводниковые лазеры, до 3 лазеров из списка: 405, 488, 532 и 642 нм;
• регистрация до 14 параметров: 2 детектора светорассеяния и до 12 каналов флуоресценции;
• минимальный объем образца — 100 мкл для лунок планшета, 150 мкл для пробирок объемом 0,5 мл, 900 мкл для пробирок объемом 1,5 мл;
• диапазон концентрации клеток, тыс. кл./мл — 10-500;
• скорость: 7-70 мкл/мин, 10-1000 событий в секунду;
• точность: коэффициент вариации менее 4% (определен по ядрам эритроцитов курицы);
• размер клеток/частиц, мкм: 0,2 – 60;
• количество отходов: 50 мл за 8 часов работы;
• формат загрузки образцов — пробирка «эппендорф» объемом 1,5 мл (SL), 96-луночные планшеты и пробирки «эппендорф» объемом 0,5/1,5 мл (HT);
• габариты, Ш × Г × В, см — 61 × 45 × 24 (SL), 61 × 51 × 25 (HT);
• вес, кг — 15,9 (SL), 31,8 (HT).

Конфигурации Guava EasyCyte:

Модель	Число каналов	405 нм (100 мВт)	488 нм (50 мВт)	488 нм (150 мВт)	532 нм (100 мВт)	642 нм (100 мВт)
5, 5HT	5		V
5HPL, 5HPL HT	5			V
6-2L, 6-2L HT	6		V			V
8, 8HT	8			V		V
BG, BG HT	10			V	V
11, 11HT	11	V		V
BGR, BGR HT	12			V	V	V
12, 12HT	13	V		V		V
BGV, BGV HT	14	V		V	V

Проточные цитометры Guava easyCyte, видеообзор, Luminex, 2020




Сбор данных на проточном цитометре Guava easyCyte, видео, Luminex, 2019



Проточные цитометры Guava easyCyte, Luminex, брошюра, англ. яз.,16 стр.pdf

Технические характеристики Guava easyCyte, Luminex, англ. яз., 3 стр.pdf

См. также: Заказ антител Abcam

Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это новое направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке.

Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости.

Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей
микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого
спектра новых приложений.

Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные
с изображениями:

• нажмите на точку в любом плоте данных, чтобы увидеть соответствующее изображение;
• кликните на интервал на любой гистограмме, чтобы увидеть каждую клетку в этом интервале;
• нарисуйте гейты на дот-плотах и вы увидите результирующие популяции клеток для валидации результатов.

Иннновационная технология цитометров Amnis увеличивает сигнал и уменьшает шум, обеспечивая беспрецедентную фотонную чувствительность. Детали конфигурации, такие как специальный боковой скаттер-лазер, регулируемая интенсивность лазерного излучения и анализ светлопольных изображений для прямого анализа клеток позволяют системе более эффективно разделять клеточные популяции, чем при использовании более дорогих проточных цитометров. Простота в использовании, выдающаяся производительность и анализ изображений каждой клетки отвечают потребностям как новичков, так и экспертов в области проточной цитометрии.

• Применим в любой научно-исследовательской дисциплине;
• детекция с использованием высокочувствительной камеры Hamamatsu, что позволяет драматически улучшить разрешение по отношению к традиционным проточным цитометрам;
• сконфигурирован для задач лабораторий любого фокуса и бюджета;
• характеризует популяции практически по любому визуальному или флуоресцентному параметру;
• лазеры — до 4-х:
• стандартно — 488 нм;
• опция — 405, 561, 642 нм;
• до 12 каналов детекции;
• опциональный автосэмплер для 96-луночных планшетов;
• увеличение 20Х (стандарт).

Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это новое направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке.

Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости.

Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей
микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого
спектра новых приложений.

Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные
с изображениями:

• нажмите на точку в любом плоте данных, чтобы увидеть соответствующее изображение;
• кликните на интервал на любой гистограмме, чтобы увидеть каждую клетку в этом интервале;
• нарисуйте гейты на дот-плотах и вы увидите результирующие популяции клеток для валидации результатов.

Иннновационная технология цитометров Amnis увеличивает сигнал и уменьшает шум обеспечивая беспрецедентную фотонную чувствительность. Детали конфигурации, такие как специальный боковой скаттер-лазер, регулируемая интенсивность лазерного излучения и анализ светлопольных изображений для прямого анализа клеток позволяют системе более эффективно разделять клеточные популяции, чем при использовании более дорогих проточных цитометров. Простота в использовании, выдающаяся производительность и анализ изображений каждой клетки отвечают потребностям как новичков, так и экспертов в области проточной цитометрии.

• Анализирует тысячи клеток в секунду при 60X увеличении;
• простой пользовательский интерфейс с графиками и гейтированием в режиме реального времени;
• система может быть сконфигурирована с любым числом лазеров — от одного до семи;
• изменение увеличения микроскопа позволяет осуществлять анализ изображений как мелких частиц, так и очень больших клеток или даже их конгломератов.

Технические характеристики:

• лазеры – до 7:
• стандартно 488 нм;
• опция 375, 405, 561, 592, 642, 730 нм;
• стандартно 6 каналов флуоресценции высокого разрешения (до 12 каналов опционально);
• увеличение 40Х (стандарт) и 20Х, 60Х (опция);
• опциональный автосэмплер для 96-луночных планшетов.

Система проточной визуализирующей цитометрии Amnis, Merck, русск. яз, 36 стр.

Проточный цитометр CellStream, Luminex — компактная система, обладающая высокой чувствительностью и гибкостью для мультипараметрического анализа клеток и субмикронных частиц:

• до 7 неколлинеарных лазеров,
• до 20 флуоресцентных каналов,
• возможность визуальной верификации результатов.

Уникальная система детекции сигнала Amnis, используемая в цитометрах CellStream, обеспечивает высокую чувствительность, до 10 раз превышающую чувствительность фотоумножителей (PMT, photomultiplier tube) традиционных систем проточной цитометрии. CCD камера с большой скоростью захватывает усиленные с помощью технологии TDI (time delay integration, накопление сигнала во времени) изображения низкого разрешения и трансформирует их в высокоинформативные данные по интенсивности. В результате исследователь получает данные по интенсивности, привычные для традиционной проточной цитометрии, но с большей чувствительностью флуоресценции.

В отличие от традиционных систем на базе PMT, проточный цитометр CellStream регистрирует изображения, что дает возможность анализировать морфологические параметры и обеспечивает визуализацию всех событий, а следовательно, и простую верификацию выделения популяций, отделения одиночных событий от агрегатов и т.д.

Уникальные возможности CellStream:

• запатентованная камера с уникальной технологией TDI для проточных цитометров Amnis;
• визуальное подтверждение результатов;
• высокие чувствительность и разрешение;
• анализ морфологических параметров: площадь, соотношение сторон, значение интенсивности самого яркого пикселя — наряду с данными по общей интенсивности;
• детекция и разделение субмикронных частиц;
• автоматические очистка и калибровка;
• автосэмплер для 96-луночного планшета уже в базовой комплектации;
• валидация по стандартам GMP.

Технические характеристики:

• максимально 7 лазеров, нм — 375, 405, 488, 532, 561, 642, 730 нм;
• мощность лазеров: 375 нм — 70 мВт, 405 нм — 175 мВт, 488 нм — 200 мВт, 532 нм — 150 мВт, 561 нм — 150 мВт, 642 нм — 150 мВт, 730 нм — 40 мВт;
• каналы детекции – FSC¹, SSC², до 20 флуоресцентных;
• чувствительность MESF³ — <10 FITC, <5 PE;
• разрешение по параметрам светорассеяния — FSC < 300 нм, SSC < 200 нм;
• коэффициент вариации (CV) — < 3% (определен по ядрам эритроцитов курицы);
• формат загрузки — 1 пробирка или 96-луночный планшет;
• скорость потока — 3.66 / 14.64 мкл/мин;
• скорость сбора данных — до 20 000 клеток/сек;
• метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
• габариты, Ш × Г × В — 440 × 625 × 495 мм.
  

¹ FSC, forward scatter — прямое светорассеивание.
² SSC, side scatter — боковое светорассеивание.
³ MESF, molecules of equivalent soluble fluorochrome — число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.


Проточный цитометр Amnis CellStream, видеообзор, Luminex, 2019



16-цветное иммуннофенотипирование главных субпопуляций лимфоцитов и миелоидных клеток в мононуклеарной фракции и цельной крови с помощью проточного цитометра Amnis CellStream, постер, англ.яз., 1 стр.pdf

Проточный цитометр Amnis CellStream, Luminex, брошюра, англ.яз., 7 стр.pdf

Иммуннофенотипирование экстрацеллюлярных везикул с помощью проточного цитометра Amnis CellStream, брошюра, англ.яз., 4 стр.pdf.

Уникальная особенность Attune NxT — функция акустической фокусировки, позволяющей проводить измерения с высокой скоростью без потери качества, сохраняя низкую вариабельность.

Возможности Attune NXT при анализе плоидности:

• высокая скорость измерения с сохранением низких значений коэффициента вариации;
• возможность использовать готовые реагенты Thermo FS для окраски ядер или использовать реагенты сторонних производителей;
• отработанные протоколы для разных задач в анализе плоидности;
• классический анализ плоидности при помощи голубого лазера (488 нм) и йодистого пропидия;
• возможность установки дополнительных лазеров (можно докупать после покупки прибора);
• легкая замена фильтров при необходимости их оптимизации;
• возможность использовать опциональный автосэмплер и роботизированную подачу для автоматической смены образцов и ускорения производительности;
• универсальность — при необходимости прибор можно использовать и для других задач в области проточной цитометрии.

Технические характеристики:

• лазеры — 1 (488 нм, 50 мВт), возможен апгрейд на рабочем месте пользователя до 4х-лазерной конфигурации;
• профиль лазера: 10 x 50 мкм, с плоской вершиной;
• каналы детекции — FSC¹, SSC², 4 флуоресцентных (до 14 флуоресцентных параметров при покупке дополнительных лазеров);
• чувствительность MESF³ — ≤ 80 MESF for FITC, ≤ 30 MESF for PE;
• формат загрузки — пробирки размерами от 17 x 100 мм до 8,5 x 45 мм (включая стандартные пробирки на 1,5, 2 и 5 мл), опциональный автозагрузчик для 96- и 384-луночных планшетов;
• скорость потока — 12,5-1000 мкл/мин;
• скорость сбора данных — до 65 000 событий/сек;
• метод определения концентрации частиц — прямой подсчет;
• габариты, Ш × Г × В — 400 × 580 × 430 мм;
• вес — 29 кг.

Предложение включает проточный цитофлуориметр Attune NxT, оснащенный лазером 488 нм и 4 детекторами флуоресценции, 1 год гарантии. В комплект поставки входит дополнительный фильтр 603/48, оптимизированный под флуоресценцию йодистого пропидия, и стартовый набор реагентов для запуска.

¹ forward scatter, прямое светорассеивание;
² side scatter, боковое светорассеивание;
³ molecules of equivalent soluble fluorochrome, число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.

Проточный цитометр Attune NxT, Thermo FS, брошюра, русск., 36 стр.
Технические характеристики Attune Nxt, Thermo FS, брошюра, англ., 8 стр.

Уникальная особенность Attune NxT — функция акустической фокусировки, позволяющей проводить измерения с высокой скоростью без потери качества, сохраняя низкую вариабельность.

Возможности технологии акустической фокусировки:

• высокая скорость анализа при минимальном расходе реагентов;
• высокая точность и минимальная вариабельность данных;
• быстрый анализ без потери чувствительности;
• детекция редких событий в количестве, достаточном для статистической обработки;
• окраска антителами без необходимости отмывки.

Технические характеристики:

• лазеры — до 4х одновременно из 5 доступных: 405 нм (50 мВт), 488 нм (50 мВт), 532 (100 мВт), 561 нм (50 мВт), 637 нм (100 мВт);
• профиль лазеров: 10 x 50 мкм, с плоской вершиной;
• каналы детекции — FSC¹, SSC², до 14 флуоресцентных, опциональный дополнительный параметр SSC на фиолетовом лазере (405 нм);
• чувствительность MESF³ — ≤ 80 MESF for FITC, ≤ 30 MESF for PE, ≤70 MESF for APC;
• формат загрузки — пробирки размерами от 17 x 100 мм до 8,5 x 45 мм (включая стандартные пробирки на 1,5, 2 и 5 мл), опциональный автозагрузчик для 96- и 384-луночных планшетов;
• скорость потока — 12,5-1000 мкл/мин;
• скорость сбора данных — до 65 000 клеток/сек;
• метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
• габариты, Ш × Г × В — 400 × 580 × 430 мм;
• вес — 29 кг.

¹ forward scatter, прямое светорассеивание;
² side scatter, боковое светорассеивание;
³ molecules of equivalent soluble fluorochrome, число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.

Проточный цитометр Attune NxT, Thermo FS, брошюра, русск., 36 стр.
Технические характеристики Attune Nxt, Thermo FS, брошюра, англ., 8 стр.

См. также: Заказ антител Abcam.

Красный флюоресцентный краситель, окрашивает ядро и хромосомы, так как не проникает в живые клетки, используется для окрашивания мёртвых клеток в популяции. Применяется для флюоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии, проточной цитометрии и флюорометрии.

Длина волны возбуждения флуоресценции, нм — 535.
Длина волны испускания флуоресценции, нм — 617.

Красный флюоресцентный краситель, окрашивает ядро и хромосомы, так как не проникает в живые клетки, используется для окрашивания мёртвых клеток в популяции. Применяется для флюоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии, проточной цитометрии и флюорометрии.

Длина волны возбуждения флуоресценции, нм — 535.
Длина волны испускания флуоресценции, нм — 617.

Красный флюоресцентный краситель, окрашивает ядро и хромосомы, так как не проникает в живые клетки, используется для окрашивания мёртвых клеток в популяции. Применяется для флюоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии, проточной цитометрии и флюорометрии.

Длина волны возбуждения флуоресценции, нм — 535.
Длина волны испускания флуоресценции, нм — 617.