Видео. Проведение ПЦР в реальном времени с помощью амплификатора StepOne, Thermo FS, англ., 2011 г.

Система QuantStudio Absolute Q – это единый прибор для всех этапов цифровой ПЦР, который позволяет проводить абсолютное определение количества мишени за 90 минут, анализируя более 95% образца, имеет простой процесс подготовки реакции сходный с пробоподготовкой при кПЦР, и возможность мультиплексирования с использованием до четырех оптических каналов системы.

Принцип цПЦР состоит в том, что реакционная смесь после добавления ДНК делится на множество микрореакторов, в каждом из которых проходит амплификация целевого участка ДНК. Некоторая часть этих реакций содержит целевую молекулу (положительный результат), в то время как другие не содержат (отрицательный результат). Соотношение количества положительных и отрицательных ПЦР используются для подсчета общего количества молекул образца. Таким образом цПЦР позволяет провести абсолютное количественное определение без потребности в калибровочных кривых.

В системе QuantStudio Absolute Q амплификация ДНК и оценка продуктов ПЦР проводятся на микрофлюидном планшете MAP16, обеспечивающем легкую и последовательную оцифровку 20 000 точно определенных микрореакторов. С менее чем 5% «мертвого» объема, система с высокой точностью определяет редкие мишени.

Области применения системы QuantStudio Absolute Q

• Обнаружение редких мутаций в онкологии;
• обнаружение редких патогенов, оценка вирусной нагрузки;
• создание стандартов и референтных образцов;
• мониторинг семян и продуктов на наличие ГМО контаминации;
• исследование копийности генов;
• анализ библиотек для NGS;
• подтверждение результатов NGS.

Технические характеристики системы QuantStudio Absolute Q

Система QuantStudio Absolute Q имеет следующие параметры:

• анализируемый выход, % – более 95;
• время прохождения амплификации, мин – 90;
• кол-во образцов за запуск – 16 (может быть запущен в формате 4, 8, 12, 16 образцов за запуск);
• объем реакционной смеси, мкл – 9;
• кол-во микрореакторов – 20 480;
• заполнение камеры с микрореакторами, % – 99;
• чувствительность, копий – 1–100,000;
• точность, % – ±10;
• количество каналов измерения флуоресценции – 4;
• совместимость с красителями – FAM, HEX, VIC, ABY, ROX, CY5, JUN;
• габариты, Ш × Г × В, см – 62 × 60 × 54;
• вес, кг – 60.

Комплектация QuantStudio Absolute Q

• Система для цПЦР QuantStudio Absolute Q;
• компьютер;
• стартовый набор: 12 планшетов MAP16, крышки для стрипов, изоляционный буфер, 5х ДНК мастер-микс, верификационный набор;
• гарантийное обслуживание – 1 год;
• 1 день обучения на площадке заказчика.

• Формат термоблока — 48-луночный;
• источник возбуждения — светодиоды;
• детектор флуоресценции – фотодиоды;
• количество каналов измерения флуоресценции — 3;
• длина волны возбуждения, нм — 475–495, 515–545, 530–560, 560–590, 615–645;
• длина волны флуоресценции, нм — 515–545, 565–585, 575–595, 610–640, 670–700;
• исполнительное устройство термоблока — элемент Пельтье;
• диапазон температур, °С — 4–100;
• гомогенность температур, °C — ± 0,5;
• точность поддержания температуры, °C — ±0,25;
• скорость нагрева/ охлаждения, °C/с — 4,6/4,6;
• реакционный объем, мкл — 10–40;
• продолжительность ПЦР, мин — 40;
• сенсорный дисплей;
• поставляется с ноутбуком;
• габариты, Ш х Г х В, мм — 246 х 427 х 512;
• масса, кг — 23,6.

Возможность работы с красителями: Fam/Sybr Green, Vic/Joe и Rox. Количественная оценка, определение генной экспрессии, анализ однонуклеотидных полиморфизмов (SNP), качественных исследований с применением внутреннего положительного контроля; режим скоростной амплификации; дистанционное управление; e-mail — клиент; ПО QuickStart; система самодиагностики, может быть модернизирован до StepOne Plus.