Набор позволяет количественно измерить одновременно два параметра клеточного здоровья: апоптоз (по активности каспаз-3/7) и клеточную гибель (по проникновению в клетки 7-AAD). Протокол без этапов отмывки клеток от реагентов позволяет быстро получить статистически надежные результаты по процентному соотношению и концентрации клеток: жизнеспособных, в раннем апоптозе, на стадии позднего апоптоза и мертвых.

Наборы Muse характеризуются максимально упрощенной пробоподготовкой, они оптимизированы для использования на клеточном анализаторе Muse, но совместимы также с другими проточными цитометрами (при наличии соответствующего лазера и светофильтров*).

* Пожалуйста, уточняйте возможность использования набора на вашем проточном цитометре у специалиста Стар-лаб Александра Шумеева

Набор позволяет количественно измерить одновременно два параметра клеточного здоровья: апоптоз (по связыванию аннексина V с фосфатидилсерином) и клеточную гибель (по проникновению в клетки 7-AAD). Протокол без этапов отмывки клеток от реагентов позволяет быстро получить статистически надежные результаты по процентному соотношению и концентрации клеток: жизнеспособных, в раннем апоптозе, на стадии позднего апоптоза и мертвых.

Наборы Muse характеризуются максимально упрощенной пробоподготовкой, они оптимизированы для использования на клеточном анализаторе Muse, но совместимы также с другими проточными цитометрами (при наличии соответствующего лазера и светофильтров*).

* Пожалуйста, уточняйте возможность использования набора на вашем проточном цитометре у специалиста Стар-лаб Александра Шумеева

Набор позволяет количественно измерить одновременно два параметра клеточного здоровья: апоптоз (по суммарной активности каспаз-1, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и 9) и клеточную гибель (по проникновению в клетки 7-AAD). Протокол без этапов отмывки клеток от реагентов позволяет быстро получить статистически надежные результаты по процентному соотношению и концентрации клеток: живых, с мультикаспазной активностью и мертвых.

Наборы Muse характеризуются максимально упрощенной пробоподготовкой, они оптимизированы для использования на клеточном анализаторе Muse, но совместимы также с другими проточными цитометрами (при наличии соответствующего лазера и светофильтров*).

* Пожалуйста, уточняйте возможность использования набора на вашем проточном цитометре у специалиста Стар-лаб Александра Шумеева

Аналит	Вид
Akt/PKB (Ser473)	человек, мышь, крыса
JNK/SAPK1 (Thr183/Tyr185)	человек, мышь, крыса
BAD (Ser112)	человек
Bcl-2 (Ser70)	человек
p53 (Ser46)	человек
активная Caspase-8 (total)	человек
активная Caspase-9 (total)	человек

Подробнее о мультиплексном анализе.

Набор позволяет количественно измерить одновременно два параметра клеточного здоровья: деполяризацию мембран митохондрий (считается ранним признаком апоптоза) и клеточную гибель (по проникновению в клетки 7-AAD). Протокол без этапов отмывки клеток от реагентов позволяет быстро получить статистически надежные результаты по процентному соотношению и концентрации клеток: живых, с деполяризованной митохондриальной мембраной, на стадии позднего апоптоза (с деполяризованной митохондриальной и поврежденной цитоплазматической мембранами) и мертвых.

Наборы Muse характеризуются максимально упрощенной пробоподготовкой, они оптимизированы для использования на клеточном анализаторе Muse, но совместимы также с другими проточными цитометрами (при наличии соответствующего лазера и светофильтров*).

* Пожалуйста, уточняйте возможность использования набора на вашем проточном цитометре у специалиста Стар-лаб Александра Шумеева

Muse — компактный клеточный анализатор, работающий по принципу проточной цитометрии для простого и недорого и быстрого анализа. Управление через сенсорный дисплей, интуитивное программное обеспечение, оптимизированные наборы реагентов формата «смешать и измерить» вместе обеспечивают существенное упрощение решения исследовательских задач.

Клеточный анализатор Muse обеспечивает прямое измерение концентрации клеток (без использования референсных частиц) и количественную детекцию флуоресцентных параметров. Оптимизированные наборы реагентов и адаптированные к ним модули программного обеспечения позволяют определять жизнеспособность клеток, апоптоз на разных этапах, исследовать пролиферацию и клеточный цикл, клеточный сигналинг, параметры иммунного статуса и др.

Analisys	Cell concentration		Viability
	Average % CV	% CV Range	Average % CV	% CV Range
Image-based Automated Counter	9,2%	1,2-23,3%	3,7%	0,8-12,1%
Manual Hemocytometer	9,2%	6,3%	4,5%	0,5-9,2%
Muse	4%	0,3-8,8%	2,2%	0,4-5,6%

Преимущества системы:

• компактность: можно поставить в любом месте;
• легкость и простота использования: готовые наборы реагентов c упрощенной пробоподготовкой;
• интуитивное управление: позволяет сделать работу максимально комфортной;
• программные модули адаптированы под наборы реагентов: простой анализ образцов;
• универсальность: два открытых программных модуля под реагенты пользователя;
• возможность обслуживания без участия сервисного инженера.

Другие методы анализа	Muse
Счетные камеры (например, камера Горяева) Ограничения в связи с низким разрешением поглощения красителя для определения жизнеспособности. Погрешности, связанные с ручным подсчетом.	Анализ Muse Count and Viability Точный, основанный на флуоресцентном окрашивании метод определения живых и мертвых клеток. Микрокапиллярная флюидика для прямого подсчета концентрации с высокой точностью.
Автоматические гемоцитометры и клеточные анализаторы на основе светлопольной микроскопии Низкая точность в результате анализа небольшого числа клеток, использование ограничено подсчетом концентрации и жизнеспособности.	Методы анализа Muse Флуоресцентный сигнал на основе специфичного связывания реагентов с мишенями. Статистическая достоверность достигается измерением тысяч клеток за несколько минут.
Вестерн-блот и другие методы обобщенного анализа клеточной популяции Гетерогенность популяции теряется при пулировании. Методы времязатратные и требуют внешнего контроля. Реагенты должны быть оптимизированы и валидированы. Результаты качественные или, в лучшем случае, полуколичественные.	Методы анализа Muse Результаты для популяции в каждом образце на основе анализа каждой клетки. Очень простые методы пробоподготовки, дополнительно нужны только пипетки. Реагенты оптимизированы и валидированы для использования на разных типах клеток.
Большие проточные цитометры Реагенты должны быть валидированы. Оптимизация требует затрат времени и ценного образца. Нужна отдельная настройка установок прибора под каждую задачу.	Методы анализа Muse Флуоресцентные реагенты уже подобраны под лазер и детекторы Muse, оптимизированы для разных типов клеток. Валидированные методы анализа, оптимизированная пробоподготовка и предустановленные настройки прибора в программном обеспечении.

Технические характеристики:

• твердотельный зелёный диодный лазер — 532 нм, 20 мВт;
• параметры: прямое светорассеяние, два параметра флуоресценции;
• фильтры для детекции флуоресценции: 576/±28 (желтый), 680/±30нм (красный);
• CV, % — менее 10, стандартно менее 5;
• типы клеток: гомогенные или гетерогенные, адгезивные или суспензионные, первичные или клеточные линии;
• диапазон концентрации клеток, тыс. кл./мл — 10-500;
• размер клеток в диаметре, мкм — 2-60+;
• объём образца, мкл — 50-200+;
• формат загрузки образцов — пробирка (тип «эппендорф», 1,5 мл);
• 3 скорости пробоотбора — 7,2, 14,4 и 36 мкл/мин;
• кварцевая капиллярная ячейка 1,5 мм x 0,8 мм, внутренний диаметр канала — 100 мкм;
• прецизионная шприцевая помпа с шаговым двигателем для подачи образца;
• анализ: на самом анализаторе или внешнем компьютере (экспорт через USB pdf-отчетов, csv-файлов со статистикой, исходных данных в виде файлов fsc);
• габариты, Ш × Г × В, мм — 207 × 283 × 221;
• вес, кг — 5,9.

Проточный цитофлуориметр Muse, видеообзор, Luminex, 2019

Расширенные возможности клеточного анализатора Guava Muse с новыми открытыми модулями, Luminex, постер, англ. яз., 1 стр.pdf

Быстрая детекция каспазной активности в клетках, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 2 стр.pdf

Быстрая и чувствительная детекция апоптоза с использованием аннексина V, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 2 стр.pdf

Кинетика продукции внутриклеточного NO и цитотоксичности при липополисахарид- и гамма-интерферон-активации макрофагов, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 4 стр.pdf

См. также: Заказ антител Abcam

Проточный цитометр Attune CytPix для широкого спектра задач – компактный, простой, удобный в использовании.

С помощью изображений полученных Attune CytPix можно оценит морфологию клеток, отслеживать контаминацию, показать межклеточные взаимодействия, морфологические характеристики апоптотических клеток и убедиться, что через луч лазера проходит отдельная клетка, а не конгломераты, их обломки или мусор, а так же можно просматривать и группировать изображения.

Уникальные особенности проточного цитометра Attune CytPix

• Возможность протокола анализа без лизиса и отмывок для минимизации потери клеток, и экономии время, а также упрощение подготовки;
• снижение времени пробоподготовки на 65%;
• характеристика клеточных популяций;
• стабильное качество изображения при высокой скорости потока;
• описание морфологии апоптотических клеток;
• исследование межклеточных взаимодействий;
• контроль качества клеточных культур, отслеживание контаминации;
• просмотр и группировка изображений, а также определение типов клеток;
• визуализация для подтверждения и настройки гейта, включая только отдельные клетки, представляющие интерес;
• система очистки, которая механически уменьшает возникновение засорения.

Протоколы подготовки образцов.

Примеры использования проточного цитометр Attune CytPix

Рисунок 1. Ядра эритроцитов курицы (CEN) склонны слипаться в дублеты или другие агрегаты. Стратегия гейтирования слипшихся ядер эритроцитов курицы с Attune CytPix.

Рисунок 2. С помощью проточного цитометра Attune CytPix можно просматривать и группировать изображения, а также определять типы клеток E. coli на основе их морфологических характеристик. В течении роста клетки E. coli, развиваются в два типа колониеобразующих клеток - короткие, которые напоминают отдельные клетки, и удлиненные структуры.

Рисунок 3. Отслеживание контаминации критически важно для анализа клеточных линий. На пример, перед трансплантацией клеток Вы можете их проверить на контаминацию с помощью Attune CytPix.

Рисунок 4. Визуализация Attune CytPix показывает межклеточные взаимодействия на примере CAR T-клеток, нацеленных на клетки лимфомы.

Рисунок 5. Анализ апоптоза клеток (с использованием аннексина V и PI) дополняется изображениями с выявленным морфологическим особенностями каждой клетки. Морфологические характеристики апоптотических клеточных популяции, полученные проточным цитометром Attune CytPix.

Особые преимущества проточного цитометра с визуализацией Attune CytPix

• Программное обеспечение и камера проточного цитометра Attune CytPix гарантируют, что события, которые анализируются, являются отдельными клетками, а не дублетами, скоплениями, обломками клеток или мусором.
• Акустическая фокусировка в 10 раз быстрее любой другой в проточном цитометре Attune CytPix.

Гидродинамическая фокусировка обеспечивает точное позиционирование клеток по центральной оси, позволяя клеткам быть сосредоточенными на точку лазерного луча и совместно с высокоскоростной камерой обеспечивает качественную картинку (Рисунок 6).

Проточный цитометр Attune CytPix с высокоскоростной камерой имеет большое значение для исследования в области клеточной биологии, генной терапии и оптимизации их протоколов.

Рисунок 6. Акустическая фокусировка в сравнении с традиционной гидродинамической фокусировкой.

Рисунок 7. Стабильное качество изображения при высокой скорости потока 12,5 мик/мин, 25 мик/мин, 100 мик/мин, 200 мик/мин, 500 мик/мин и 1000 мик/мин. Нет изменений в частоте визуализации и получению картин. Простая настройка фокуса и камеры для получения качественного изображения.

Технические характеристики проточного цитометра Attune CytPix

• Количество лазеров – 2/4;
• каналы детекции – канал прямого и бокового светорассеяния и 14 флуоресцентных каналов;
• освещение изображения – 405 нм лазер с менее 50 наносекундный импульс;
• акустическая фокусировка;
• чувствительность – ≤80 MESF for FITC, ≤30 MESF for PE, ≤70 MESF for APC;
• скорость анализа, событий/сек – более 35 тыс.;
• скорость фотографии, фото/сек – 6000;
• кратность увеличения – 20×;
• разрешение камеры, нм/Мп – 0,3;
• размер частиц, нм – до 800;
• статус использования – только для исследований;
• программное обеспечение – Invitrogen Attune 21 CFR Part 11;
• процессор – Nvidia Quadro P2200 GPU;
• жесткий диск – 2 x 8TB SSD, 2,5-inch Samsung 870 QVO, 560 MB/s;
• габариты, В × Ш × Г, см – 49 × 58 × 43.

Опции: автоподатчик Invitrogen CytKick Autosampler и робот подачи планшетов Orbitor RS2 Microplate Mover увеличат операционную мощность, уменьшат количество ошибок, связанных с человеческим фактором.

Рисунок 8. Дополнительные конфигурации увеличивают операционную мощность, уменьшают количество ошибок, связанных с человеческим фактором.
(A) Attune CytPix Flow Cytometer
(B) Invitrogen CytKick Autosampler
(C) Orbitor RS2 Microplate Mover

Таблица 1. Сравнение автосэмплеров Invitrogen CytKick и CytKick Max

Характеристика	Автосэмплер CytKick	Автосэмплер CytKick Max
Пропускная способность	42 мин для 96-луночного планшета в высокопропускном режиме	22 мин для 96-луночного планшета (в ускоренном режиме с одной промывкой, одного смешивания и полного анализа образца 20 мкл)
Совместимость	96-луночные глубоколуночные планшеты 96-луночные стандартные планшеты 384-луночные глубоколуночные планшеты 384-луночные стандартные планшеты	96-луночные глубоколуночные планшеты 96-луночные стандартные планшеты 384-луночные глубоколуночные планшеты 384-луночные стандартные планшеты 1,5 и 2 мл микроцентрифужные пробирки в шативе (до 24 мест) 96-луночные планшеты, запечатанные фольгой 384-луночные планшеты, запечатанные фольгой, дополнительные типы планшет

Таблица 2. Конфигурации цитометра Attune CytPix.

Лазеры	Конфигурация лазеров	Число каналов детекции для выбранных лазеров				Всего каналов детекции*	Каталожный номер
		Фиолетовый, 405 нм	Синий, 488 нм	Желтый, 561 нм	Красный, 637 нм
2	Синий / желтый	†	3	4	†	9	A51842
	Синий / красный	†	4	†	3	9	A51840
	Синий / фиолетовый	4	4	†	†	10	A51841
	Синий / фиолетовый 6	6	4	†	†	11	A51843
3	Синий / красный / желтый	†	3	4	3	12	A51845
	Синий / фиолетовый /желтый	4	3	4	†	13	A51846
	Синий / красный / фиолетовый	4	4	†	3	13	A51844
	Синий / красный / фиолетовый 6	6	3	†	3	14	A51847
4	Синий / красный / желтый / фиолетовый	4	3	4	3	16	A51848
	Синий / красный / желтый / фиолетовый 6	6	2	3	3	16	A51849

* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.

† - Доступна модификация лазеров, зеленый лазер не доступен в Attune CytPix.

Таблица 3. Конфигурация лазеров, количество каналов детекции в сравнении Attune CytPix с Attune NxT

Лазеры	Конфигурация лазеров	Фиолетовый, 405 нм	Синий, 488 нм	Желтый, 561 нм	Зеленый, 532 нм	Красный, 637 нм	Всего каналов детекции*	Attune CytPix	Attune NxT
1	Синий	**	4	**	**	**	6	N/A	A24864
2	Синий / зеленый	**	3		4	**	9	N/A	A28995
	Синий / желтый	**	3	4		**	9	A51842	A24861
	Синий / красный	**	4	**	**	3	9	A51840	A24863
	Синий / фиолетовый	4	4	**	**	**	10	A51841	A24862
	Синий / фиолетовый 6	6	3	**		**	11	A51843	A29002
3	Синий / зеленый / красный	**	3		4	3	12	N/A	A28997
	Синий / красный / желтый	**	3	4		3	12	A51845	A28993
	Синий / зеленый / фиолетовый	4	3		4	**	13	N/A	A28999
	Синий / фиолетовый / желтый	4	3	4		**	13	A51846	A24859
	Синий / красный / фиолетовый	4	4	**	**	3	13	A51844	A24860
	Синий / красный / фиолетовый 6	6	3	**		3	14	A51848	A29003
4	Синий / красный / фиолетовый / зеленый	4	3		4	3	16	N/A	A29001
	Синий / красный / желтый / фиолетовый	4	3	4		3	16	A51848	A24858
	Синий / красный / желтый / фиолетовый 6	6	2	3		3	16	A51849	A29004

* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.

** - Доступна модификация лазеров, зеленый лазер не доступен в Attune CytPix.

Выбрать можно конфигурацию прибора, соответствующую вашим потребности. Проточный цитометр Attune CytPix доступен в конфигурациях с 2–4 лазерами с визуализацией в светлом поле, а проточный цитометр Attun NxT доступен с 1–4 лазерами без визуализации.

Таблица 4. Выбор красителей для определения жизнеспособности клеток

Лазер	Нефиксирующие красители	Фиксирующие красители
УФ	DAPI (470)	LIVE / DEAD Fixable Blue (450)
405 нм	SYTOX Blue (480)	LIVE / DEAD Fixable Violet (451)
		LIVE / DEAD Fixable Lime (506)
		LIVE / DEAD Fixable Aqua (526)
		LIVE / DEAD Fixable Yellow (575)
405 нм	SYTOX Green (523)	LIVE / DEAD Fixable Green (520)
	Propidium Iodide (617)	LIVE / DEAD Fixable Olive (557)
	SYTOX AADvanced (647)	LIVE / DEAD Fixable Red (615)
561 нм	SYTOX Orange (570)	LIVE / DEAD Fixable Orange (602)
	SYTOX AADvanced (647)
633/5 нм	SYTOX Red (660/20*)	LIVE / DEAD Fixable Far Red (665)
		LIVE / DEAD Fixable Scarlet (723)
		LIVE / DEAD Fixable Near IR (775)
		LIVE / DEAD Fixable Near IR (780)
808 нм		LIVE / DEAD Fixable Near IR (876)

• Формат образцов:
– 12×75 или 55 мм (пробирки);
– 1,5 или 2 мл (микропробирки);
– d 35 мм (чашки Петри);
– до 20 мл (виалы);
• детектор ― фотонный счетчик;
• диапазон длин волн, нм — 300 – 600;
• чувствительность — 0,5 зептомоль люциферазы светляков, 1 аттомоль АТФ в ячейке;
• динамический диапазон ― 6 декад;
• измерительная камера ― выдвижная, со сменными отражателями и адаптером для образца;
• дозатор (опция) ― до 2-х; объем дозирования — 20 – 5000 мкл с шагом 1 мкл;
• интерфейс USB или RS-232;
• управление с помощью ПК;
• ПО;
• габариты, В×Ш×Г, мм — 241×349×150;
• вес (без дозаторов), кг — 3,6.

Области применения:

• анализ репортерных генов;
• быстрое обнаружение заражения клеточных культур микоплазмой (Lonza MycoAlert);
• анализ АТФ;
• пролиферация клеток, цитотоксичность и анализ биомассы;
• анализ апоптоза;
• клеточная люминесценция / реактивные виды кислорода;
• анализ токсичности для окружающей среды и мутагенности.

Аксессуары и опции: дозаторы, виалы, калибровочная пробирка, протоколы валидации IQ/OQ/PQ.

• Формат образцов:
– 12×75 или 55 мм (пробирки);
– 1,5 или 2 мл (микропробирки);
– d 35 мм (чашки Петри);
– до 20 мл (виалы);
• детектор ― фотонный счетчик;
• диапазон длин волн, нм — 300 – 600;
• чувствительность — 0,5 зептомоль люциферазы светляков, 1 аттомоль АТФ в ячейке;
• динамический диапазон ― 6 декад;
• измерительная камера ― выдвижная, со сменными отражателями и адаптером для образца;
• дозатор (опция) ― до 2-х; объем дозирования — 20 – 5000 мкл с шагом 1 мкл;
• интерфейс 2×USB 2.0, Ethernet;
• управление:
– сенсорный экран (можно работать в перчатках);
– ПК;
• сохранение данных на USB-накопителе в формате CSV (Excel), PDF, HTML;
• ПО;
• габариты, В×Ш×Г, мм — 456×349×150;
• вес (без дозаторов), кг — 5,3.

Области применения:

• анализ репортерных генов;
• быстрое обнаружение заражения клеточных культур микоплазмой (Lonza MycoAlert);
• анализ АТФ;
• пролиферация клеток, цитотоксичность и анализ биомассы;
• анализ апоптоза;
• клеточная люминесценция / реактивные виды кислорода;
• анализ токсичности для окружающей среды и мутагенности.

Аксессуары и опции: дозаторы, протоколы валидации IQ/OQ/PQ, виалы, набор для калибровки (пробирка, зарядное устройство, бокс для хранения).

Это надёжная компактная система мультиплексного анализа исследовательского класса, совместимая с магнитными частицами xMAP (MagPlex).

Области применения:

• изучение иммунного статуса;
• анализ маркеров дисфункции эндокринной системы;
• анализ маркеров острой фазы воспалительных процессов;
• анализ онкомаркеров и онкодиагностика;
• маркеры апоптоза;
• ангиогенез.

Преимущества:

• позволяет одновременно определять до 50 мишеней в одном образце;
• улучшенная производительность и удобство мультиплексного анализа с использованием магнитных частиц;
• настольное и компактное исполнение системы;
• экономия на обслуживании системы и ценных реагентах;
• ПО Bio-Plex Manager 6.1 для анализа данных и оптимизации результатов.

Технические характеристики:

• скорость анализа, мин/планшет – 60;
• 96-луночный формат системы;
• 2 светодиодных лазера с длинами волн 532 и 635 нм;
• габариты, ШxГxВ, см – 16,5 x 60 x 43.

Реагенты и наборы для проведения исследований – по запросу.

Это надёжная компактная система мультиплексного анализа исследовательского класса, совместимая с магнитными частицами xMAP (MagPlex).

Области применения:

• изучение иммунного статуса;
• анализ маркеров дисфункции эндокринной системы;
• анализ маркеров острой фазы воспалительных процессов;
• анализ онкомаркеров и онкодиагностика;
• маркеры апоптоза;
• ангиогенез.

Преимущества:

• позволяет одновременно определять до 50 мишеней в одном образце;
• улучшенная производительность и удобство мультиплексного анализа с использованием магнитных частиц;
• настольное и компактное исполнение системы;
• экономия на обслуживании системы и ценных реагентах;
• ПО Bio-Plex Manager 6.1 для анализа данных и оптимизации результатов.

Технические характеристики:

• скорость анализа, мин/планшет – 60;
• 96-луночный формат системы;
• 2 светодиодных лазера с длинами волн 532 и 635 нм;
• габариты, ШxГxВ, см – 16,5 x 60 x 43.

Реагенты и наборы для проведения исследований – по запросу.

Краситель НК Hoechst 33258 является популярным ядерным контрастирующим веществом, который испускает синюю/голубую флуоресценцию при связывании с дцДНК. Его использование аналогично Hoechst 33342 (H-1399) для изучения окрашивания, апоптоза и клеточного цикла, но Hoechst 33258, по сообщениям, хуже проникает в клетки. Этот краситель также доступен в растворе (H-3569).

• Длина волны возбуждения флуоресценции, нм — 352 (УФ).
• Длина волны испускания флуоресценции, нм — 461 (зеленый).

Краситель НК Hoechst 33258 является популярным ядерным контрастирующим веществом, который испускает синюю/голубую флуоресценцию при связывании с дцДНК. Его использование аналогично Hoechst 33342 (H-1399) для изучения окрашивания, апоптоза и клеточного цикла, но Hoechst 33258, по сообщениям, хуже проникает в клетки. Этот краситель также доступен в растворе (H-3569).

• Длина волны возбуждения флуоресценции, нм — 352 (УФ).
• Длина волны испускания флуоресценции, нм — 461 (зеленый).