Высокопроизводительный скрининг содержания сиаловой кислоты для оценки качества терапевтических иммуноглобулинов

При скрининге клеточных линий или при разработке терапевтических протеинов, большое внимание уделяется пост-трансляционным модификациям целевых молекул. Такие модификации, как фосфорилирование, гликозилирование, метилирование и др. могут оказывать влияние на функциональные характеристики получаемых молекул.

Наиболее важная модификация, которой уделяется особое внимание со стороны фармацевтов, это гликозилирование белка. Гликозилирование — это сложнейший биохимический процесс, в который вовлечены множество ферментов и субстратов и на результат которого влияет масса параметров (например тип клеточной линии или параметры культивирования клеток-продуцентов).

Уровень содержания гликозилированных форм протеина является наиболее важным показателем оценки качества и эффективности конечного препарата, поскольку эта модификация определяет биологическую активность и свойства протеинов: сворачивание молекулы, её конформацию, распределение в организме после введения, а так же его стабильность и активность при длительном хранении в виде готовой формы.

Таким образом уровень содержания гликозилированных форм протеина может повлиять на такие показатели как: фармакокинетика препарата (его период полураспада в организме), выбор метода выделения и очистки молекул на производстве, срок годности препарата, его стабильность при хранении и транспортировке.

Основным индикаторным показателем содержания гликозилированных форм протеина является сиаловая кислота. Классические методы анализа содержания сиаловой кислоты, такие как ВЭЖХ / МС / ЖХМС, предъявляют жесткие требования к качеству очистки образца, требуют много затрат времени и реагентов для пробоподготовки.

Что бы упростить процесс анализа и сделать его более эффективным, компания Forte Bio разработала набор GlyS kit, который предназначен для быстрого скрининга содержания сиаловой кислоты в образцах.

GlyS biosensor pre-immobilized with lectin

Binding

Selective amplification

Secondary amplification

Набор для относительного анализа содержания сиаловой кислоты (GlyS kit) ForteBio позволяет работать с неочищенными образцами (лизаты, гомогенаты, биологические жидкости) на стадиях разработки и оптимизации биопроцесса (отбор клонов-продуцентов, подбор параметров культивирования), а так же с очищенными образцами на стадии очистки и выходного контроля качества готовых форм.

• Не требуют предварительной очистки образцов.
• Высокая чувствительность.
• Возможность регенерации сенсоров.
• Не требует флуоресцентных меток.
• Минимальная чувствительность к примесям (спирты и ДМСО).
• Валидация IQ/OQ/PQ.

Система Octet RED96e, 8 каналов

Система Octet RED384, 16 каналов

Система Octet HTX, 96 каналов

Формат загрузки образца

96 лун. планшет

2х96/384 лун. планшета

2х96/384 лун. планшета

Время анализа

Менее 2.5 часов на 96 образцов

1,5 часа на 96 образцов

менее 1 часа на 96 образцов

Тип образца

Не очищенные лизаты клеточных культур
Культуральный супернатант

Не очищенные лизаты клеточных культур
Культуральный супернатант

Не очищенные лизаты клеточных культур
Культуральный супернатант