Трансфекция и трансформация: инструменты и реактивы

Электропоратор Nepa21 Super Electroporator обеспечивает эффективную трансфекцию с высокой жизнеспособностью клеток без использования специальных буферов.

Четырёхступенчатый импульс с понижением напряжения обеспечивает более высокую эффективность трансфекции и более высокую степень выживаемости в условиях in vitro, in vivo, in utero, in ovo и ex vivo.

1. Первая ступень: многократные короткие импульсы высокого напряжения, с последующим снижением напряжения. На данной ступени формируются поры в клеточной мембране, при минимальных повреждениях;
2. Вторая ступень аналогична первой ступени, но с противоположной полярностью импульса. Может также использоваться при трансфекции тканей;
3. Третья ступень: многократные длинные импульсы низкого напряжения с последующим снижением напряжения. Данная ступень обеспечивает доставку молекул (ДНК, РНК) в клетки, при минимальных повреждениях;
4. Четвертая ступень аналогична третьей ступени, но с противоположной полярностью импульса, повышает эффективность трансфекции.

Применения:

• трансфекция in vitro:
• трудно поддающиеся трансфекции клетки (зародышевые, стволовые и проч.) – с помощью электропорационных кювет;
• клеточные линии – с помощью специальных электродов для культуральных планшетов;
• трансфекция in vivo:
• мышиный/крысиный мозг, глаза, мышцы, кожа, печень, почки и проч. – с помощью электродов in vivo;
• трансфекция in utero:
• мышиные/крысиные эмбрионы, кора головного мозга, гиппокампус, спинной мозг и проч. – с помощью электродов in utero;
• трансфекция in ovo:
• куриные эмбрионы: нервная трубка, органы пищеварения, зачатки конечностей и проч. – с помощью электродов in ovo;


• трансфекция ex vivo:
• эксплантаты, срезы мозга, органы, эмбрионы (целиком) и проч. – с помощью электродов ex vivo.


• Габариты, В × Ш × Г, мм — 113 × 346 × 330;
  
• вес, кг — 7,5 кг

Универсальный электропоратор, позволяющий производить трансфекцию клеток бактерий и грибов, а также, когда необходимо воздействие высокого напряжения на малые объёмы материала.

• Гибкие возможности программирования вручную;
• предустановленные протоколы для трансфекции наиболее популярных бактерий;
• импульсное напряжение, В — 200-3000;
• форма импульса — экспоненциальная и квадратная;
• сопротивление (параллельное), Ом — 50-1000 в увеличении в 50 Ом + бесконечность;
• квадратный импульс:
• 10-500 В: 0,05 × 10 мс — с увеличением 0,05 мс, 100 × 10 мс с увеличением 1 мс, пульсация 1-10, временной интервал 0,1-10 с;
• 500-3000 В: 0,05 × 10 мс — 5 × 10 мс с увеличением 0,05 мс, пульсация 1-2, временной интервал 5 с;
• габариты, В × Ш × Г, мм:
• базовый блок — 140 × 310 × 300;
• PC модуль — 50 × 310 × 280;
• вес, кг:
• базовый блок — 6,6;
• PC модуль — 1,9.

Комплект поставки: базовый блок, PC модуль, держатель кювет, 10 стерильных кювет (зазор шириной, мм — 1 и 2), ShockPod камера.

Универсальный электропоратор, позволяющий производить трансфекцию эукариотических клеток.

• Гибкие возможности программирования вручную;
• предустановленные протоколы для наиболее популярных клеток млекопитающих;
• импульсное напряжение, В — 10-3000;
• форма импульса — экспоненциальная и квадратная; сопротивление (параллельное), Ом — 50-1000 в увеличении в 50 Ом + бесконечность;
• квадратный импульс:
• 10-500 В: 0,05 × 10 мс — с увеличением 0,05 мс, 100 × 10 мс с увеличением 1 мс, пульсация 1-10, временной интервал 0,1-10 с;
• 500-3000 В: 0,05 × 10 мс — 5 × 10 мс с увеличением 0,05 мс, пульсация 1-2, временной интервал 5 с;
• габариты, В × Ш × Г, мм:
• базовый блок — 140 × 310 × 300;
• CE модуль — 90 × 310 × 280;
• вес, кг :
• базовый блок — 6,6;
• CE модуль — 3,1.

Комплект поставки: базовый блок, CE модуль, держатель кювет, 5 стерильных кювет (зазор шириной, мм —4), ShockPod камера.

Электропоратор, позволяющий производить трансфекцию бактерий, грибов и других микроорганизмов.

• Максимальное напряжение, В — 3000;
• форма импульса — затухающая, спадает экспоненциально;
• импульсное напряжение регулируется, В — 200-3000, шаг 10;
• длительность импульса, с — от 1×10-3 до 4×10-3, с шагом 0,1 мс;
• предустановленные программы для трансфекции бактерий (5 видов) и грибов (5 видов);
• широкий диапазон параметров для ручного программирования;
• габариты, В × Ш × Г, мм — 80 × 290 × 210;
• вес, кг — 2,9.

Комплект поставки: электропоратор, кюветодержатель, 10 стерильных кювет (ширина зазора, мм — 1 и 2).

• Быстро и легко программируемый аппарат — 2 кнопки позволяют сохранять и вызывать наиболее часто используемые параметры;
• базовые установки для оптимизированной трансформации E.coli;
• специальные функции — электронная цепь защиты сети во избежание дугообразования;
• форма импульса — экспоненциально убывающий;
• длительность импульса, с — номинально 5×10^-3;
• импульсное напряжение, В — 200 - 2,500;
• сопротивление, Ом — 600;
• конденсатор, μF — 10;
• интерфейс — порт USB 2.0;
• габариты, мм — 275 × 190 × 125;
• вес нетто, кг — 3,2.

Генная (биобаллистическая) пушка

Альтернативой электропорации является метод биобаллистической трансформации, заключающийся в том, что ДНК, напыленная на мельчайшие частички вольфрама, платины или золота, диаметром от 0,1 до 3,5 мкм выбрасываются с большой скоростью из пушки и входят в цитоплазму и ядра клеток. Главным преимуществом данного метода является высокая эффективность встройки векторной ДНК, а также то, что можно получить трансгенные клетки в самые кратчайшие сроки.

• Условия эксперимента - In situ, in vitro, in vivo, ex vivo;
• размер площади, см² - 2;
• сила давления, psi - 100-600;
• типы объектов:
• животные: клетки, экспланты, культуры органов;
• растения: полевые и тепличные, клеточные культуры, экспланты;
• другие организмы: дрожжи, бактерии, другие микроорганизмы.

Генная пушка PDS-1000/He System обеспечивает высокоэффективную, высоковоспроизводимую и контролируемую трансфекцию ДНК в клетки, ткани или органеллы эукариот, бактерий и дрожжей.

Перенос ДНК осуществляется за счет перемещаемых гелиевым импульсом микрочастиц вольфрама диаметром от 0,1 до 3,5 мкм, нанесённых на пластиковые диски, разрывающиеся при действии на них давления определённой силы. Специальный экран удерживает частицы, позволяя им проходить сквозь клеточные стенки клеток-мишеней. Для увеличения эффективности процесса в камере прибора можно установить субатмосферное давление, что уменьшит силу трения, действующую на микрочастицы, проходящие сквозь клетки.

• Площадь воздействия, см² — 40;
• давление газа (гелий), кПа — 450-2200;
• напряжение, — 100-120 В, 50-60 Гц;
• габариты, В × Ш ×Г, мм — 475 × 290 × 255;
• вес, кг –—15.

Программируемый микроинъектор применяется для воспроизводимых микроинъекций растворов в адгезивные и суспензионные клетки.

• Возможность автоматизации и синхронизации с микроманипуляторами производства Eppendorf.
• собственный источник давления со встроенным компрессором;
• объем инъекции — от фемтолитра (10-15 л) до 100 пиколитров;
• может быть установлен на всех стандартных системах микроманипуляции, в том числе и других фирм-производителей;
• большой ЖК-дисплей.

Технические характеристики:

• Установка параметров: время инъекции, инъекционное давление и компенсационное давление;
• продолжительность инъекции, с — 0-99,9, с шагом 0,01;
• давление при инъекции, гПа — 5-6000, с шагом 1;
• давление при компенсации, гПа — 5-6000, с шагом 1;
• давление при промывке, гПа — макс. 6000;
• габариты, см — 21,3×25×20,7;
• вес, кг — 5,0.

Скачать:
Микроинъекторы FemtoJet 4i и FemtoJet 4x, Eppendorf, брошюра, англ., 4 стр., 3 MB

Видео:
Уникальная полуавтоматическая инъекция с InjectMan 4

Записаться на бесплатное тестирование оборудования.

Гидравлический микроинъектор CellTram 4r Air является обновлённой версией микроинъектора предыдущего поколения CellTram Air, но в отличие от ранней версии имеет винт грубой и точной регулировки.

Пневматический микроинъектор CellTram 4r Air предназначен для бережного удержания суспензионных клеток, например яйцеклетки, при проведении микроманипуляций.

Инъектор снащен системами поршня и цилиндра, не требующими ухода и позволяющими проводить инъекцию с минимальной силой трения. Большие эргономичные ручки управления и устойчивое основание максимально уменьшают возможность случайных вибраций, что предотвращает гибель клеток вследствие повреждения капиллярами.

• Точная и грубая настройка разрешающей способности, чувствительности и реагирования (1:1 и 1:10);
• изменение объема за оборот ручки с тонким / грубым приводом, мкл — 60/600;
• инъекционная трубка из фторированный этиленпропилен (FEP), длина 1,3 м, внутренний диаметр 0,5 мм, внешний диаметр 2 мм;
• максимальный давление, гПа — 3000;
• минимальный регулируемый объем, нл — 100;
• объем цилиндра, мл — 10;
• создание давления: пневматическая система цилиндр-поршень с воздушным наполнением.

Гидравлический микроинъектор CellTram 4r Oil является обновлённой версией микроинъекторов предыдущего поколения CellTramOil и CellTram vario.

Гидравлический микроинъектор для ИКСИ, переноса суспензионных, эмбриональных стволовых клеток, органелл, например ядер; для извлечения клеток, биопсии полярных телец и бластомеров. Имеет винт грубой и точной регулировки.

Микроинъекторы оснащены системами поршня и цилиндра, не требующими ухода и позволяющими проводить инъекцию с минимальной силой трения. Большие эргономичные ручки управления и устойчивое основание максимально уменьшают возможность случайных вибраций, что предотвращает гибель клеток вследствие повреждения капиллярами.

• Точная и грубая настройка разрешающей способности, чувствительности и реагирования (1:1 и 1:10);
• изменение объема за оборот ручки с тонким / грубым приводом, мкл — 1/10;
• инъекционная трубка из фторированный этиленпропилен (FEP), длина 1,3 м, внутренний диаметр 0,5 мм, внешний диаметр 2 мм;
• максимальный давление, гПа — 20000;
• минимальный регулируемый объем, нл — 1,5;
• объем цилиндра, мл — 1;
• создание давления: пневматическая система цилиндр-поршень с масляным наполнением.