Скрининг гликанов при разработке и производстве терапевтических протеинов и антител с применением систем Octet

Уровень содержания гликозилированных форм протеина является наиболее важным показателем оценки качества и эффективности конечного препарата. Эта модификация определяет биологическую активность и свойства протеинов и влияет на такие показатели как поведение препарата в организме, выбор метода выделения и очистки молекул на производстве, срок годности препарата, его стабильность при хранении и транспортировке.

Изменчивость показателей гликозилированных белка на стадии разработки и производства белков может отрицательно повлиять на его биологическую активность и стабильность конечного препарата.

Перспективным подходом для полного структурного анализа содержания гликопротеиновых олигосахаридов является применение систем безмаркерного анализа Octet с сочетании наборами GlyS Kit. Лектины, иммобилизованные на сенсорах BLI, представляют собой гликан-связывающие белки, которые селективно распознают гликановые эпитопы гликопротеинов, что обеспечивает специфичность анализа.

GlyS biosensor pre-immobilized with lectin

Binding

Selective amplification

Secondary amplification

Набор для определения содержания сиалатов GlyS Kit, ForteBio — удобный вариант для быстрого скрининга содержания производных сиаловой кислоты. Они предназначены для проведения тестов прямо в культуральной жидкости, что позволяет уйти от необходимости выделения анализируемых молекул и сэкономить время и ресурсы лаборатории. Это позволяет ускорить процедуру отбора подходящих клеток-кандидатов на самых ранних этапах, и сосредоточить всё внимание только на колониях клеток, которые обладают оптимальными показателями.

Предлагаем Вам ознакомиться с публикациями, подробно описывающих примеры использование систем Octet при анализе гликопротеинов:

• Высокопроизводительное измерение сиалилирования с использованием лектинов на платформе Octet для скрининга клонов.
  
  
• Ингибирование вируса гепатита С цианобактериальным белком лектином Microcystis viridis: механистические различия между высокоманнозными специфическими лектинами MVL, CV-N и GNA.
  
  
• Интерферометрия биослоя лектина для оценки качества продукта Fc-гликозилированного иммуноглобулина G.
  
  
• Применение технологии BLI в изучении галектина-13 - прототипа галектина, не облающего связыванием с β-галакто-сайтом и образующего димеры через межмолекулярные дисульфидные мостики между Cys-136 и Cys-138.
  
  
• Методы повышения производительности количественного анализа целевых белков для ускорения downstream –процессов при производстве муцинов.
  
  
• Опыт определение титров содержания гликанов на ранних стадиях отбора клеток-продуцентов.