Проточный цитометр Attune CytPix для широкого спектра задач – компактный, простой, удобный в использовании.
С помощью изображений полученных Attune CytPix можно оценит морфологию клеток, отслеживать контаминацию, показать межклеточные взаимодействия, морфологические характеристики апоптотических клеток и убедиться, что через луч лазера проходит отдельная клетка, а не конгломераты, их обломки или мусор, а так же можно просматривать и группировать изображения.
Уникальные особенности проточного цитометра Attune CytPix
- Возможность протокола анализа без лизиса и отмывок для минимизации потери клеток, и экономии время, а также упрощение подготовки;
- снижение времени пробоподготовки на 65%;
- характеристика клеточных популяций;
- стабильное качество изображения при высокой скорости потока;
- описание морфологии апоптотических клеток;
- исследование межклеточных взаимодействий;
- контроль качества клеточных культур, отслеживание контаминации;
- просмотр и группировка изображений, а также определение типов клеток;
- визуализация для подтверждения и настройки гейта, включая только отдельные клетки, представляющие интерес;
- система очистки, которая механически уменьшает возникновение засорения.
Протоколы подготовки образцов.
Примеры использования проточного цитометр Attune CytPix
Рисунок 1. Ядра эритроцитов курицы (CEN) склонны слипаться в дублеты или другие агрегаты. Стратегия гейтирования слипшихся ядер эритроцитов курицы с Attune CytPix.
Рисунок 2. С помощью проточного цитометра Attune CytPix можно просматривать и группировать изображения, а также определять типы клеток E. coli на основе их морфологических характеристик. В течении роста клетки E. coli, развиваются в два типа колониеобразующих клеток - короткие, которые напоминают отдельные клетки, и удлиненные структуры.
Рисунок 3. Отслеживание контаминации критически важно для анализа клеточных линий. На пример, перед трансплантацией клеток Вы можете их проверить на контаминацию с помощью Attune CytPix.
Рисунок 4. Визуализация Attune CytPix показывает межклеточные взаимодействия на примере CAR T-клеток, нацеленных на клетки лимфомы.
Рисунок 5. Анализ апоптоза клеток (с использованием аннексина V и PI) дополняется изображениями с выявленным морфологическим особенностями каждой клетки. Морфологические характеристики апоптотических клеточных популяции, полученные проточным цитометром Attune CytPix.
Особые преимущества проточного цитометра с визуализацией Attune CytPix
- Программное обеспечение и камера проточного цитометра Attune CytPix гарантируют, что события, которые анализируются, являются отдельными клетками, а не дублетами, скоплениями, обломками клеток или мусором.
- Акустическая фокусировка в 10 раз быстрее любой другой в проточном цитометре Attune CytPix.
Гидродинамическая фокусировка обеспечивает точное позиционирование клеток по центральной оси, позволяя клеткам быть сосредоточенными на точку лазерного луча и совместно с высокоскоростной камерой обеспечивает качественную картинку (Рисунок 6).
Проточный цитометр Attune CytPix с высокоскоростной камерой имеет большое значение для исследования в области клеточной биологии, генной терапии и оптимизации их протоколов.
Рисунок 6. Акустическая фокусировка в сравнении с традиционной гидродинамической фокусировкой.
Рисунок 7. Стабильное качество изображения при высокой скорости потока 12,5 мик/мин, 25 мик/мин, 100 мик/мин, 200 мик/мин, 500 мик/мин и 1000 мик/мин. Нет изменений в частоте визуализации и получению картин. Простая настройка фокуса и камеры для получения качественного изображения.
Технические характеристики проточного цитометра Attune CytPix
- Количество лазеров – 2/4;
- каналы детекции – канал прямого и бокового светорассеяния и 14 флуоресцентных каналов;
- освещение изображения – 405 нм лазер с менее 50 наносекундный импульс;
- акустическая фокусировка;
- чувствительность – ≤80 MESF for FITC, ≤30 MESF for PE, ≤70 MESF for APC;
- скорость анализа, событий/сек – более 35 тыс.;
- скорость фотографии, фото/сек – 6000;
- кратность увеличения – 20×;
- разрешение камеры, нм/Мп – 0,3;
- размер частиц, нм – до 800;
- статус использования – только для исследований;
- программное обеспечение – Invitrogen Attune 21 CFR Part 11;
- процессор – Nvidia Quadro P2200 GPU;
- жесткий диск – 2 x 8TB SSD, 2,5-inch Samsung 870 QVO, 560 MB/s;
- габариты, В × Ш × Г, см – 49 × 58 × 43.
Опции: автоподатчик Invitrogen CytKick Autosampler и робот подачи планшетов Orbitor RS2 Microplate Mover увеличат операционную мощность, уменьшат количество ошибок, связанных с человеческим фактором.
Рисунок 8. Дополнительные конфигурации увеличивают операционную мощность, уменьшают количество ошибок, связанных с человеческим фактором.
(A) Attune CytPix Flow Cytometer
(B) Invitrogen CytKick Autosampler
(C) Orbitor RS2 Microplate Mover
Таблица 1. Сравнение автосэмплеров Invitrogen CytKick и CytKick Max
|
|
|
Характеристика
|
Автосэмплер CytKick
|
Автосэмплер CytKick Max
|
Пропускная способность
|
42 мин для 96-луночного планшета в высокопропускном режиме
|
22 мин для 96-луночного планшета (в ускоренном режиме с одной промывкой, одного смешивания и полного анализа образца 20 мкл)
|
Совместимость
|
- 96-луночные глубоколуночные планшеты
-
96-луночные стандартные планшеты
-
384-луночные глубоколуночные планшеты
-
384-луночные стандартные планшеты
|
- 96-луночные глубоколуночные планшеты
-
96-луночные стандартные планшеты
-
384-луночные глубоколуночные планшеты
-
384-луночные стандартные планшеты
-
1,5 и 2 мл микроцентрифужные пробирки в шативе (до 24 мест)
-
96-луночные планшеты, запечатанные фольгой
-
384-луночные планшеты, запечатанные фольгой, дополнительные типы планшет
|
Таблица 2. Конфигурации цитометра Attune CytPix.
Лазеры
|
Конфигурация лазеров
|
Число каналов детекции для выбранных лазеров
|
Всего каналов детекции*
|
Каталожный номер
|
Фиолетовый,
405 нм
|
Синий,
488 нм
|
Желтый,
561 нм
|
Красный,
637 нм
|
2
|
Синий / желтый
|
†
|
3
|
4
|
†
|
9
|
A51842
|
Синий / красный
|
†
|
4
|
†
|
3
|
9
|
A51840
|
Синий / фиолетовый
|
4
|
4
|
†
|
†
|
10
|
A51841
|
Синий / фиолетовый 6
|
6
|
4
|
†
|
†
|
11
|
A51843
|
3
|
Синий / красный / желтый
|
†
|
3
|
4
|
3
|
12
|
A51845
|
Синий / фиолетовый /желтый
|
4
|
3
|
4
|
†
|
13
|
A51846
|
Синий / красный / фиолетовый
|
4
|
4
|
†
|
3
|
13
|
A51844
|
Синий / красный / фиолетовый 6
|
6
|
3
|
†
|
3
|
14
|
A51847
|
4
|
Синий / красный / желтый / фиолетовый
|
4
|
3
|
4
|
3
|
16
|
A51848
|
Синий / красный / желтый / фиолетовый 6
|
6
|
2
|
3
|
3
|
16
|
A51849
|
* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.
† - Доступна модификация лазеров, зеленый лазер не доступен в Attune CytPix.
Таблица 3. Конфигурация лазеров, количество каналов детекции в сравнении Attune CytPix с Attune NxT
Лазеры
|
Конфигурация лазеров
|
Фиолетовый,
405 нм
|
Синий,
488 нм
|
Желтый,
561 нм
|
Зеленый,
532 нм
|
Красный,
637 нм
|
Всего каналов детекции*
|
Attune CytPix
|
Attune NxT
|
1
|
Синий
|
**
|
4
|
**
|
**
|
**
|
6
|
N/A
|
A24864
|
2
|
Синий / зеленый
|
**
|
3
|
|
4
|
**
|
9
|
N/A
|
A28995
|
Синий / желтый
|
**
|
3
|
4
|
|
**
|
9
|
A51842
|
A24861
|
Синий / красный
|
**
|
4
|
**
|
**
|
3
|
9
|
A51840
|
A24863
|
Синий / фиолетовый
|
4
|
4
|
**
|
**
|
**
|
10
|
A51841
|
A24862
|
Синий / фиолетовый 6
|
6
|
3
|
**
|
|
**
|
11
|
A51843
|
A29002
|
3
|
Синий / зеленый / красный
|
**
|
3
|
|
4
|
3
|
12
|
N/A
|
A28997
|
Синий / красный / желтый
|
**
|
3
|
4
|
|
3
|
12
|
A51845
|
A28993
|
Синий / зеленый / фиолетовый
|
4
|
3
|
|
4
|
**
|
13
|
N/A
|
A28999
|
Синий / фиолетовый / желтый
|
4
|
3
|
4
|
|
**
|
13
|
A51846
|
A24859
|
Синий / красный / фиолетовый
|
4
|
4
|
**
|
**
|
3
|
13
|
A51844
|
A24860
|
Синий / красный / фиолетовый 6
|
6
|
3
|
**
|
|
3
|
14
|
A51848
|
A29003
|
4
|
Синий / красный / фиолетовый / зеленый
|
4
|
3
|
|
4
|
3
|
16
|
N/A
|
A29001
|
Синий / красный / желтый / фиолетовый
|
4
|
3
|
4
|
|
3
|
16
|
A51848
|
A24858
|
Синий / красный / желтый / фиолетовый 6
|
6
|
2
|
3
|
|
3
|
16
|
A51849
|
A29004
|
* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.
** - Доступна модификация лазеров, зеленый лазер не доступен в Attune CytPix.
Выбрать можно конфигурацию прибора, соответствующую вашим потребности. Проточный цитометр Attune CytPix доступен в конфигурациях с 2–4 лазерами с визуализацией в светлом поле, а проточный цитометр Attun NxT доступен с 1–4 лазерами без визуализации.
Таблица 4. Выбор красителей для определения жизнеспособности клеток
Лазер
|
Нефиксирующие красители
|
Фиксирующие красители
|
УФ
|
DAPI (470)
|
LIVE / DEAD Fixable Blue (450)
|
405 нм
|
SYTOX Blue (480)
|
LIVE / DEAD Fixable Violet (451)
|
LIVE / DEAD Fixable Lime (506)
|
LIVE / DEAD Fixable Aqua (526)
|
LIVE / DEAD Fixable Yellow (575)
|
405 нм
|
SYTOX Green (523)
|
LIVE / DEAD Fixable Green (520)
|
Propidium Iodide (617)
|
LIVE / DEAD Fixable Olive (557)
|
SYTOX AADvanced (647)
|
LIVE / DEAD Fixable Red (615)
|
561 нм
|
SYTOX Orange (570)
|
LIVE / DEAD Fixable Orange (602)
|
SYTOX AADvanced (647)
|
633/5 нм
|
SYTOX Red (660/20*)
|
LIVE / DEAD Fixable Far Red (665)
|
LIVE / DEAD Fixable Scarlet (723)
|
LIVE / DEAD Fixable Near IR (775)
|
LIVE / DEAD Fixable Near IR (780)
|
808 нм
|
|
LIVE / DEAD Fixable Near IR (876)
|