Определение фальсификации белкового состава молока с помощью вертикального электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ)

22.07.2021

Для оценки качества молока требуется убедиться в отсутствии сторонних белков в его составе. Разделение и выявление белков возможно при помощи вертикального электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ). В описанном ниже методе применяются готовые к использованию расходные материалы (полиакриламидные гели), что позволяет получать быстрые воспроизводимые результаты и не требует специальной подготовки сотрудников.

Нормативные документы требуют от производителей молочной продукции соблюдать белковый состав натурального молока. Быстрый, воспроизводимый и надежный метод выявления чужеродных белков чрезвычайно актуален как для производственных лабораторий, так и для контролирующих организаций.

Важным требованием к качеству молока является натуральность и отсутствие в его составе чужеродных веществ, в том числе белков немолочного происхождения. Для выявления факта фальсификации белкового состава молока используют варианты вертикального электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ). Широко применяется электрофорез по методу Лэммли (Laemmli, 1970) – в денатурирующих условиях с мочевиной, а также электрофорез без применения денатурирующих добавок согласно ГОСТ Р 53761-2009.

Идентификацию белков молочного и немолочного происхождения осуществляют визуально. Совпадение белковых фракций (полос) на электрофореграмме контрольного и исследуемых растворов (не менее чем в трех повторах) указывает на отсутствие в составе продукта белков немолочного происхождения (рис. 1). При наличии в исследуемой пробе белков немолочного происхождения на электрофореграмме присутствуют дополнительные белковые фракции (полосы), которые не наблюдаются в контрольных пробах (рис. 2).

Электрофореграмма раствора белков без белков немолочного происхождения
Электрофореграмма белков, в составе которой присутствует белок немолочного происхождения (согласно ГОСТ Р 53761-2009).
Рис. 1. Электрофореграмма раствора белков исследуемой пробы, в составе которой отсутствуют белки немолочного происхождения (согласно ГОСТ Р 53761-2009) Рис. 2. Электрофореграмма раствора белков исследуемой пробы, в составе которой присутствует белок немолочного происхождения (согласно ГОСТ Р 53761-2009)

Компания Thermo FS производит готовые (не требующие заливки) полиакриламидные гели под торговой маркой Novex Tris-Glycine. Разработанная этой же компанией процедура обработки белков в ПААГ дериватизирующим реагентом No-stain protein labeling позволяет существенно сократить общую продолжительность анализа по сравнению с традиционными способами окрашивания белков.

Применение готовых гелей гарантирует воспроизводимость результатов, не требует высокой квалификации сотрудников, и значительно экономит рабочее время. Особенно важны эти преимущества в производственных лабораториях с регулярным значительным потоком образцов, высокой ответственностью за результат и ограниченным временем на выполнение анализа.

Полиакриламидные гели под маркой Novex Tris-Glycine
Процедура обработки белков в ПААГ дериватизирующим реагентом No-stain protein labeling позволяет существенно сократить общую продолжительность анализа
Готовые гели Novex Tris-Glycine Реагент No-stain protein labeling

Оборудование для анализа молока на содержание белков немолочного происхождения

Для выявления фальсификации белкового состава молока мы рекомендуем следующее оборудование:

Пока нет данных. Перейти в каталог
STM1001
1 460 248
1 460 248 AMD

Характеристики электрофорезной вертикальной камеры SureLock Tandem Midi Gel Tank

  • Для полиакриламидных гелей;
  • постановка до 2-х миди-гелей одновременно, 2 изолированные камеры;
  • меньшее количество буфера- в камере два отдельных отсека, для одного геля заливка гелем только в один отсек;
  • заливка гелей без протечек и без использования смазки-герметика;
  • скорость электрофореза 35-60 минут;
  • запатентованная технология равномерного распределения тепла, не нужно охлаждение;
  • дополнительно можно использовать модуль для блоттинга SureLock Tandem Midi Blot Module кат.№ STM2001;
  • камера совместима с Novex, NuPAGE, Bolt гелями;
  • подходит источник питания PowerEase™ 350 W Power Supply (230 VAC) кат.№ PS0351;
  • в комплект входят танк с крышкой для электрофореза, рамки-зажимы для гелей, адаптеры для подключения танка к источникам тока и специальный нож;
  • количество гелей — 1-2;
  • размер геля, см — 8 × 13, гелевая кассета 10,3 × 15;
  • толщина геля, мм — 1,0;
  • условия проведения электрофореза, Вт — 250;
  • объем буфера — 300 мл на 1 гель;
  • габариты с крышкой, Д × Ш × В, см — 25 × 17,9 × 17,3.
PS0301
4 086 282
4 086 282 AMD

Источник питания для электрофоретического разделения НК, белков.

  • Выходное напряжение, В — 5-250;
  • выходной ток, мА — 10-3000;
  • выходная мощность, Вт — 300;
  • выход на 4 э/ф камеры;
  • таймер от 0 до 99 ч.;
  • ЖК-дисплей с подсветкой, графический тип;
  • мембранная клавиатура;
  • режимы работы — постоянное напряжение, постоянный ток, таймер;
  • безопасность — встроенный датчик перегрузки по току, восстановление в случае отказа электропитания;
  • рабочая температура, °С — 0… +40;
  • материал корпуса — огнеупорный ABS пластик;
  • габариты, мм — 200 × 290 × 70;
  • вес, кг — 2,6.

2131 2610 1
848 908
848 908 AMD
Применяются для просмотра окрашенных гелей интерколирующими агентами в УФ-лучах, либо для просмотра гелей/ пленок в лучах видимого света.

Трансиллюминаторы Vilber Lourmat:
  • возможность сниженной интенсивности излучения — 70% от максимальной (кроме серии TCP);
  • отсутствие эффекта мерцания благодаря лампам с частотой излучения 25 КГц;
  • нет нагревания геля во время экспозиции;
  • специальный отражатель, уменьшающий рассеивание УФ-лучей и обеспечивающий равномерное освещение геля;
  • съемный экран безопасности, который может быть размещен под любым углом к оператору, обеспечивая полную защиту от УФ-лучей;
  • корпус защищен от воздействия агрессивных веществ.

Серия Super-Bright — особый УФ-фильтр полностью поглощает видимый свет, излучаемый лампами, что способствует получению более контрастного изображения и визуализации слабовыраженных полос на геле, т. к. поле, при включенных лампах, почти черного цвета.

ECX-F26.MX:
  • длина волны излучения, нм — 312;
  • размер фильтра, мм — 210 x 260;
  • количество и мощность ламп, Вт — 6 х 8;
  • интенсивность излучения, μW/см² — 9000.

Видео о технологии Super-Bright, Vilber Lourmat
1611 2600 1
11 331 159
11 331 159 AMD

Системы E-Box CX5 полностью автономные системы с тачскрином и встроенным компьютером.

PadBox версия системы с трансилюминаторами-pad позволяет использовать до 6 источников света в УФ- и видимой областях.

E-Box CX5 идеальны для большого количества задач, таких как, визуализация ДНК или РНК гелей, 1D белковых гелей, stain free гелей. Все модели снабжены цифровой CCD камерой исследовательского типа CX5, светофильтром 590 нм для работы с этидиум бромидом, Sybr-Green, Sybr-gold и т.д.

Фильтры и трансилюминатор-pad для работы с другими красителями заказываются дополнительно.

  • Изображение 16 бит, 65536 оттенков серого;
  • разрешение камеры, Мп 5;
  • разрешение изображения, Мп — 20;
  • моторизованный зум;
  • линзы с фокусным расстоянием f 1,2;
  • автоматическая фокусировка;
  • автоматический подбор времени экспозиции и «захват» изображения; автоматическая индикация «оптимальности» экспозиции;
  • автоматическое управление светом;
  • автоматическое отключение УФ через 5 мин работы;
  • 10-ти позиционный держатель светофильтров;
  • верхнее Epi белое освещение в комнате – LED-источники света;
  • трансиллюминаторы-pad не встроены в «темную комнату» и могут (кроме Spectra Pad) использоваться самостоятельно (опция – зарядный адаптер), выдвигаются на полозьях, что позволяет значительно облегчить все манипуляции с гелями (локализация, вырезание и пр);
  • «темные комнаты» изготовлены из металла; устойчивы, надежны, удобны, компактны;
  • надежная удобная дверная защелка, совмещенная с системой выключения УФ при открывании дверцы;
  • тачскрин дисплей, см - 32;
  • автономное управление, встроенный компьютер;
  • сохранение изображения в памяти прибора - диск SSD 32Гб;
  • Network подключение;
  • полное соответствие GLP стандартам.

Подробное описание систем E-Box по сайту производителя см. здесь


Системы комплектуется ПО Vision-Capt:
  • библиотека применений AppsStudio, 3D изображение;
  • повышение качества изображения;
  • добавление текстовых комментариев, символов, даты;
  • вычисление молекулярного веса;
  • определение количества полос;
  • определение длины пробега;
  • подсчет колоний.
ПО Vision-Capt
ПО для гельдокументирующей системы E-Box, Vilber Lourmat

Вы можете модифицировать данную систему следующими опциями и аксессуарами, обратившись к специалистам отдела продаж.

Опции:

  • валидационные папки IQ, OQ, PQ.

Аксессуары:

Камера для вертикального электрофореза SureLock Tandem Midi Gel Tank, Thermo FS

Камера SureLock Tandem Midi Gel Tank предназначена для электрофоретического разделения анализируемых белков. На дно этой камеры укладывают готовый гель Novex Tris-Glycine, заливают до метки буфером для электрофореза, вносят в его лунки обезжиренные пробы молока и стандарты молочных белков с загрузочным буфером. Затем включают электропитание и проводят электрофорез согласно принятому протоколу. По окончании электрофореза камеру отключают от источника тока, вынимают из нее гель, который затем обрабатывают реагентом No-stain protein labeling reagent в соответствии с процедурой, рекомендованной Thermo FS.

Камера SureLock Tandem Midi Gel Tank предназначена для электрофоретического разделения анализируемых белков
Источник питания PowerEase 300W
Электрофорезная камера SureLock Tandem Midi Gel Tank Источник питания PowerEase 300W

Преимущества SureLock Tandem Midi Gel Tank, Thermo FS, 8х13 см, 2 геля, Thermo FS

  • 2 изолированные камеры емкостью до 2-х гелей;
  • заливка гелей без протечек и без использования смазки-герметика;
  • скорость электрофореза — 35-60 минут;
  • запатентованная технология равномерного распределения тепла, не нужно охлаждение;
  • совместима с готовыми гелями Novex, NuPAGE и Bolt компании Thermo FS.
Просмотр обработанного геля осуществляется в трансиллюминаторе Super-Bright, ECX-F26.MX V1

Трансиллюминатор Super-Bright, ECX-F26.MX V1, Vilber

Просмотр обработанного геля осуществляется в трансиллюминаторе Super-Bright, ECX-F26.MX V1, Vilber с использованием источника света в ультрафиолетовой области спектра.

Преимущества Super-Bright, ECX-F26.MX V1, Vilber

  • Отсутствие эффекта мерцания благодаря лампам с частотой излучения 25 КГц;
  • нет нагревания геля во время экспозиции;
  • специальный отражатель, уменьшающий рассеивание УФ-лучей и обеспечивающий равномерное освещение геля;
  • съемный экран безопасности, который может быть размещен под любым углом к оператору, обеспечивая полную защиту от УФ-лучей;
  • корпус защищен от воздействия агрессивных веществ.

Гельдокументирующая система E-Box-CX5.TS Edge-PADBox

Трансиллюминатор Super-Bright, ECX-F26.MX V1 в комплекте с гельдокументирующей системой E-Box-CX5.TS Edge-PADBox позволяет проводить фотосъемку и цифровое документирование результатов электрофореза, а также оценивать процентное содержание того или иного белка на электрофореграмме.

Гельдокументирующая система E-Box-CX5.TS Edge-PADBox, Vilber

Преимущества E-Box-CX5.TS Edge-PADBox, Vilber

  • Изображение 16 бит, 65536 оттенков серого цвета;
  • разрешение камеры 5 Мп;
  • моторизованный зум;
  • автоматическая фокусировка, управление светом и подбор времени экспозиции и «захвата» изображения;
  • автоматическое отключение ультрафиолетового света через 5 мин работы;
  • 10-ти позиционный держатель светофильтров;
  • тачскрин дисплей;
  • автономное управление, встроенный компьютер;
  • сохранение изображения в памяти прибора — диск SSD 32Гб;
  • Network подключение;
  • полное соответствие GLP стандартам.
  • комплектуется бесплатным программным обеспечением Vision-Capt для обработки изображений.

Здесь вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме

Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!