Молекулярная биология Thermo Fisher Scientific: Геномика. Протеомика. Клеточная биология

16.12.2016
лого1.png лого2.png лого3.png лого4.png лого5.png новая.jpg

Геномика

Выделение НК, ПЦР, обратная транскрипция, клонирование, электрофорез, классическое секвенирование, NGS, РНК-интерференция.

Протеомика

Экспрессия белков, выделение и очистка, электрофорез ПААГ, вестерн-блоттинг, анализ белков.

Клеточная биология

Культивирование, трансфекция, криоконсервация и хранение, проточная цитометрия и счетчики клеток, визуализация клеток, выделение клеток.


Phusion™ • FastDigest™ • GeneRuler™ • SuperSignal™ • Slide-A-Lyzer™ • HyPerforma™ • QuantStudio™ TaqMan™ • SYBR™ • ProFlex™ • BigDye™ • SimpliAmp™ • Molecular Probes™ • Novex™ • Ambion™ TOPO™ • SuperScript™ • Lipofectamine™ • Dynabeads™ • EVOS™ • Attune™ • NxT • GlutaMAX™ • B-27™ TrypLE™ • KnockOut™ • Neurobasal™ • Advanced™ • FluoroBrite™ • Ion AmpliSeq™ • Ion Proton™ Ion PGM™ • Ion S5 / Ion S5 XL Ion Reporter™ • Ion Chef™



Удобный поиск и заказ продуктов Thermo Fisher Scientific на сайте star-lab.am


Произвести поиск и заказать продукцию Thermo Fisher Scientific можно на сайте Стар-лаб star-lab.am в разделе Химические реактивы на заказ /reactive-fororder.php, который напрямую связан с сайтом Thermo Fisher Scientific.

1. Выберите Thermo Fisher Scientific.

Схема1.png

2. Введите название или каталожный номер в поле поиска; поиск производится по сайту Thermo Fisher Scientific.

Схема2.png

3. Результаты поиска (каталожный номер, наименование, фасовка) перенесите в специальное поле и заполните информацию для отправки заказа.

схема3.png

4. Специалист отдела продаж вышлет Вам предложение на запрошенный продукт.

схема4.png

На сайте Thermo Fisher Scientific вы найдете удобные он-лайн сервисы для выбора оптимального продукта в зависимости от задачи:

• выбор метода и набора для выделения НК в зависимости от материала, количества и дальнейшего использования НК;
• выбор оптимального вектора для клонирования в зависимости от цели и организма-носителя плазмиды;
• поиск рестриктазы по названию или расщепляемой последовательности, подбор условий для расщепления несколькими рестриктазами;
• выбор оптимальной полимеразы для ПЦР или обратной транскриптазы;
• дизайн праймеров при секвенировании по Сэнгеру;
• руководство по ПЦР в реальном времени;
• выбор готовых панелей для таргетного секвенирования или дизайн панелей по списку генов заказчика;
• выбор антител или набора ELISA в зависимости от исследуемого белка и организма;
• выбор флюоресцентного красителя для различных типов клеток и клеточных структур;
• дизайн ПЦР-праймеров, подбор оптимальных условий для ПЦР, поиск сайтов рестрикции и пр.



Выделение нуклеиновых кислот


  • Наборы для выделения геномной ДНК из различных биологических источников:

o GeneJet и PureLink — для выделения на спин-колонках;
o MagJet и MagMAX — для выделения на магнитных частицах.

  • Наборы для выделения плазмидной ДНК:

o GeneJet и MagJet — для рутинного выделения плазмидной ДНК;
o GeneJet EndoFree, PureLink и ChargeSwitch — для получения особо чистой плазидной ДНК с целью трансфекции.

  • Наборы для выделения РНК:

o GeneJet и PureLink — для выделения на спин-колонках;
o MagJet и MagMAX — для выделения на магнитных частицах;
o mirVana — наборы для выделения малых РНК.

  • Наборы для выделения и очистки НК из реакционных смесей, из агарозного геля и после пробоподготовки для NGS.
1.gif



1.png
  • Реагенты для выделения ДНК и РНК методом органической экстракции:

o DNAzol в различных модификациях для выделения ДНК;
o TRIzol и наборы реагентов TRIzol для выделения РНК;
o RNAlater — консервант для стабилизации РНК в тканях.

  • Оборудование для автоматического выделения НК:

o для выделения в формате планшетов — BenchPro 2100;
o для выделения на магнитных частицах — MagMAX Express-96 Deep Well или KingFisher.



Количественный анализ НК

2.png Флюориметр Qubit 3.0, реактивы и наборы для селективного количественного анализа ДНК, РНК, микроРНК, одноцепочечной ДНК и олигонуклеотидов.



Реактивы для ПЦР


  • Термостабильные ДНК-полимеразы:
o стандартные: DreamTaq, AmpliTaq;
o с горячим стартом: Maxima Hot Start, Phire Hot Star, Platinum; AmpliTaq Gold;
o высокоточные: Platinum High Fidelity, AccuPrime, Phusion, Platinum SuperFi.

  • Наборы реактивов и мастер-миксы на основе этих полимераз.
  • Наборы и мастер-миксы для прямой ПЦР (без выделения ДНК) на основе полимераз Phusion и Phire.
  • Буферы и нуклеозидтрифосфаты.
  • Реактивы для ПЦР в реальном времени:
o наборы реагентов с использованием технологии TaqMan;
o мастер-миксы с детекцией по SYBR Green.

Реактивы для обратной транскрипции

  • Обратные транскриптазы: RevertAid, Maxima и Verso, SuperScript III и IV.
  • Наборы для синтеза первой цепи кДНК RevertAid First Strand, Maxima First Strand и SuperScript IV VILO.
  • Наборы для одношаговой обратной транскрипции и ПЦР Verso 1-Step RT-qPCR Kit и SuperScript One-Step.

3.png


Оборудование и пластик для ПЦР


  • «Классические» амплификаторы Applied Biosystems: 2720, Veriti, SimpliAmp, ProFlex.
  • Амплификаторы в режиме реального времени: StepOne, StepOne Plus, 7500 и 7500 Fast, ViiA7.

4.png

  • Амплификаторы в режиме реального времени серии QuantStudio 3, 5, 6, 12K.
5.png
  • Оборудование для цифровой капельной ПЦР: ридер для ПЦР-чипов QuantStudio 3D + амплификатор ProFlex в модификации Flat Block.
  • Пластик для ПЦР: плашки Armadillo, пробирки, стрипы, плашки и плёнки MicroAmp.




Молекулярное клонирование

  • Эндонуклеазы рестрикции и ДНК-модифицирующие ферменты:

o стандартные рестриктазы и рестриктазы FastDigest;
o рестриктазы и ДНК-модифицирующие ферменты Anza.

  • Плазмиды и наборы для клонирования:

o ТА-клонирование;
o клонирование по тупым концам;
o клонирование ТОРО;
o Gateway-клонирование.
6.png

7.png

  • Продукция и технологии GeneArt:

o наборы для одностадийного клонирования длинных конструкций из нескольких фрагментов GeneArt Seamless Cloning и GeneArt High Order;
o cинтез генов: GeneArt Strings (синтетические последовательности ДНК) и GeneArt Gene Synthesis (готовые генно-инженерные конструкции по проекту клиента);
o редактирование генома: технологии CRISPR-Cas9 и TALEN.

8.png


Электрофорез нуклеиновых кислот
9.png
  • Всё для агарозного электрофореза:

o агароза различных типов и готовые агарозные гели E-Gel;
o бромистый этидий и красители на основе химии SYBR;
o системы для электрофореза Owl Electrophoresis Systems и E-Gel.

  • Готовые полиакриламидные гели Novex.


  • Маркеры длин ДНК и РНК:

o ДНК: GeneRuler, TrackIt DNA, E-Gel DNA;
o РНК: RiboRuler и Millenium RNA Markers.

10.png


Классическое секвенирование по Сэнгеру

11.png
  • Знаменитые капиллярные секвенаторы Applied Biosystems: 3500/XL и 3730/XL на 8/24, 48/96 капилляров, соответственно.
  • Наборы реагентов для секвенирования, для пробоподготовки и очистки ПЦР-фрагментов, стандарты секвенирования.
  • ПО для анализа данных: для анализа результатов секвенирования de novo, для поиска соматических мутаций, для идентификации микроорганизмов, для выявления точечных полиморфизмов.





Cеквенирование NGS по технологии IonTorrent

  • Секвенаторы Ion PGM, Proton, S5 и S5 XL; производительность — 2, 10, 15 Гб, соответственно.
  • Чипы для секвенирования производительностью от 30 Мб до 15 Гб.
  • Системы для пробоподготовки и секвенирования Ion OneTouch 2 и Ion Chef.
  • Наборы реагентов Ion AmpliSeq для геномного, экзомного, транскриптомного и таргетного секвенирования.
  • ПО для обработки данных.
12.png


РНК-интерференция

  • Малые интерферирующие РНК для нокдауна генов: Silenser и Stealth.
  • Ингибиторы и мимики природных микроРНК Ambion и mirVana.
  • Векторные конструкции BlockIT для экспрессии микроРНК.
  • Реагенты серии Lipofectamine для трансфекции микроРНК.

13.png


Получение рекомбинантных белков

15.png Системы для экспрессии в различных типах клеток:

  • в клетках млекопитающих — ExpiCHO, Expi293;
  • в клетках насекомых — Bac-To-Bac, BaculoDirect;
  • в бактериях и дрожжах.

Векторы для экспрессии белков с аффинными N- и С-концевыми последовательностями:

  • 6(His); Myc; LacZ; GFP; Xpress.



Cистемы и векторы для бесклеточной экспрессии:

  • в эукариотических системах: Retic Lysate IVT, 1-Step Human IVT, 1-Step CHO IVT;
  • в бактериях: MembraneMax, Expressway.

Выделение и очистка белков

Лизис клеток и фракционирование:

  • лизирующие растворы: RIPA Lysis, IP Lysis;
  • реагенты для выделения белков из различных клеток и тканей:

o для клеточных культур — M-PER,
o для нервной ткани — N-PER,
o для внутренних органов — T-PER,
o для бактерий — B-PER;
16.png


  • реактивы и наборы для выделения субклеточных фракций — лизосом, митохондрий, синаптосом;
  • ингибиторы протеаз и фосфатаз, коктейли ингибиторов: Halt Protease/Phosphatase Inhibitor и Pierce Protease/Phosphatase Inhibitor Mini Tablets.
17.png Очистка белков на магнитных частицах и методом колоночной хроматографии:

  • на ионообменных сорбентах: Pierсe SCX, Pierce SAX, POROS;
  • на аффинных сорбентах — HisPur (для металл-хелатной хроматографии), с иммобилизованными глютатионом, биотином и др.
  • активированные сорбенты для иммобилизации аффинных групп — с амино, сульфо, карбоксигруппами;
  • сорбенты для иммобилизации антител — с протеинами A, G, L; сорбент Melon Gel для негативной селекции;
  • хроматографические колонки различных типов.


Диализ, обессоливание и концентрирование белков:

  • устройства для диализа Slide-A-Lyser;
  • планшеты для микродиализа;
  • диализные мешки SnakeSkin;
  • устройства для концентрирования и диализа белков методом центрифугирования;
  • продукты Zeba для обессаливания белковых растворов: спин-колонки, планшеты и хроматографические колонки.


18.png

19.png



Электрофорез в полиакриламидном геле


Оборудование

  • Камера для электрофореза Bolt Mini Gel Tank;
  • системы для вертикального электрофореза XCell ShureLock (mini и midi);
  • система для заливки гелей SureCast Gel Handcast;
  • кассеты для гелей, гребёнки и наконечники для нанесения образцов Novex;
  • источники тока PowerEase и Zoom Dual Power.

Готовые полиакриламидные гели и реагенты

  • Готовые гели mini для денатурирующего электрофореза Bolt Bis-Tris Plus;
  • готовые гели mini для денатурирующего электрофореза Novex NuPAGE SDS-PAGE;
  • трис-глициновые гели для образцов большого объёма Novex WedgeWell;
  • гели Novex midi для денатурирующего электрофореза — трис-глициновые, трис-ацетатные, бис-трисовые;
  • специализированные гели: E-PAGE для одновременного анализа большого количества образцов, NativePAGE для нативного электрофореза, Novex IEF, трициновые гели для анализа низкомолекулярных белков (2–20 кДа) и др.;
  • реагенты для электрофореза: электродные буферы, буферы для образцов, акриламид и др.

20.png

Стандарты молекулярной массы белков

  • Окрашенные стандарты различных диапазонов PageRuler, Multicolor и HiMark;
  • неокрашенные стандарты PageRuler;
  • маркеры для вестерн-блоттинга MagicMark;
  • специальные стандарты: BenchMark — для флюоресцентных белков и белков с олигогистидиновыми последовательностями, CandyCane — для гликозилированных белков, PeppermintStick для фософорилированных белков;
  • стандарты для нативного электрофореза NativeMark и для изоэлектрофокусирования.

Оборудование и реагенты для окрашивания гелей

  • Система для окрашивания и отмывки гелей Pierce Power Stainer;
  • реагенты для окрашивания гелей: Кумасси, окрашивание серебром, флюоресцентное окрашивание, специализрованные реагенты для детекции аффинных последовательностей;
  • системы для мультиплексного анализа белковых гелей c красителями SYPRO Ruby и Pro-Q.

21.png


Вестерн-блоттинг

Оборудование для переноса и отмывки мембран

  • Системы отмывки, не требующие источника тока: iBind Western и iBind Western Flex;
  • система для сухого переноса iBlot 2;
  • модуль для мокрого переноса Bolt Mini Blot Module;
  • система для полусухого переноса Pierce Power Blotter.
22.png 24.png


Реагенты для переноса: нитроцеллюлозные и PVDF-мембраны; фильтровальная бумага; буферы для переноса; красители Pierce и Novex для обратимого окрашивания фильтров после переноса.

23.png Реагенты для визуализации белков после переноса:

  • хемилюминесцентные субстраты SuperSignal и Pierce ECL для пероксидазы и щелочной фосфатазы;
  • наборы с хромогенными субстратами — хлорнафтолом, диаминобензидином, ТМБ;
  • реагенты для флюоресцентной детекции на основе красителей Alexa Fluor и WesternDot;
  • отмывочные буферы, блокирующие растворы, рентгеновская плёнка;
  • антитела для вестерн-блоттинга: первичные, вторичные, конъюгаты с пероксидазой, фосфатазой, флюоресцентными красителями; контрольные антитела и белки.





Анализ белков


  • Реагенты для количественного анализа белков, пептидов и аминокислот: колориметрического (ВСА) и флюоресцентного (Quant-iT, NanoOrange, EZQ).
  • Количественный анализ белков на флюориметре Qubit 3.0.
  • Наборы для иммунопреципитации на основе магнитных частиц Dynabeads: с антителами, стрептавидином (для биотинилированных белков) или специальными лигандами для рекомбинантных белков с аффинными структурами.
  • Реагенты и наборы для ELISA — более 800 готовых наборов для анализа иммуноглобулинов различных организмов, цитокинов, бета-амилоида, оценки фосфорилирования, анализа внутриклеточных белков и др.
  • Наборы для анализа на платформе Luminex:
o анализ отдельных белков и мультиплексный анализ;
o разработка наборов с технологией xMAP на заказ.
  • Наборы и реагенты для анализа ферментативной активности цитохрома Р450, киназ, протеаз и пептидаз, оксидаз и пероксидаз, исследование биологии фосфатаз.
  • Белковые микрочипы:
o микрочипы с широким спектром человеческих белков — более 9000 видов молекул,
o микрочипы для анализа иммунного ответа,
o микрочипы на заказ.
  • Наборы, реагенты и технологии для анализа белок-белковых и белок-нуклеотидных взаимодействий:
o для количественной масс-спектрометрии: SILAC, TMT, йодо-TMT, аминоокси-ТМТ;
o стандарты, калибровочные растворы и сорбенты;
o реагенты и наборы для обогащения белков, фракционирования, очистки.

25.png




Культивирование клеток

Среды для выращивания клеточных культур

  • Стандартные среды клеток: DMEM, MEM, 199, RPMI 1640;
  • модифицированные среды: с добавлением F12 или GlutaMAX, Advanced, FluoroBrite;
  • среды для клеток насекомых: среда Грейса, Sf-900;
  • среды для стволовых клеток; Essential 8 для плюрипотентных клеток, StemPro для стволовых клеток крови, Neurobasal и В-27 для нервных стволовых клеток;
  • среды FreeStyle 293, Expi293 и ExpiCHO для экспрессии рекомбинантных белков в эукариотических клетках.

27.png

Сыворотки и компоненты сред
28.png
  • Фетальная (эмбриональная) сыворотка (FBS) различных степеней апробации и происхождения и категорий уровня эндотоксинов:

o Standard (для рутинных экспериментов),
o Performance и Performance Plus со сниженным содержанием эндотоксинов (для ведения большинства клеточных линий),
o Secure (для промышленных целей и доклинических испытаний),
o Speciality (для стволовых клеток, получения антител и иммунологических исследований);

  • термически инактивированная FBS;
  • FBS в фасовках One Shot по 50 мл — минимизация риска контаминации;
  • сервис iMATCH для подбора партий сыворотки с минимальными различиями;
  • сыворотки из других животных — лошадиная, овечья, свиная, кроличья и др.;
  • рекомбинантные факторы роста, хемокины, цитокины;
  • аминокислоты, липиды, витамины и др.;
  • глютамин и GlutaMAX;
  • факторы для культивирования стволовых клеток;
  • заменители сыворотки;
  • внеклеточный матрикс — коллаген, ламинин, фибронектин;
  • антибиотики и антимикотики.





Реагенты для работы с клетками


  • Сбалансированные солевые растворы и буферные растворы;
  • реагенты для диссоциации клеток — трипсин, TrypLE;
  • реагенты и наборы для замораживания клеток — среды для заморозки Recovery и Synth-A-Freeze, ДМСО и др.

29.png
Пластик для культивирования клеток

  • Флаконы от 25 до 500 см² — без покрытия, с различными типами покрытия для адгезивных культур, флаконы Nunclon Sphera для 3D-культур и т.д.;
  • чашки Петри, плашки и микропланшеты различных форматов с разным типом покрытий, более 100 видов;
  • пробирки — конические, круглодонные, плоскодонные; серия Nunc EZFlip со специальными крышками, предотвращающими контаминацию; серия Matrixдля хранения образцов;
  • серологические пипетки, скребки для адгезивных культур и т.п.

30.png


Трансфекция
Реагенты для трансфекции


Липидные реагенты для трансфекции серии Lipofectamine — наиболее широко используемые в молекулярной биологии, поскольку большой выбор реагентов даёт
возможность трансфекции практически любых типов клеток различными видами НК, а протокол трансфекции с использованием Lipofectamine достаточно прост:

  • Lipofectamine 2000 и Lipofectamine 3000 для трансфекции плазмидной ДНК;
  • Lipofectamine MessengerMAX для трансфекции мРНК;
  • Lipofectamine RNAiMAX для трансфекции микроРНК;
  • Invivofectamine 3.0 для трансфекции микроРНК in vivo;
  • Lipofectamine CRISPRMAX для трансфекции белков CRISPR-Cas9;
  • среды для трансфекции OptiMEM.

31.png


Система для электропорации Neon

32.png Neon предназначена для работы с клетками, трансфекция которых с помощью липидных реагентов низкоэффективна либо негативно влияет на жизнеспособность — первичными
клеточными культурами, стволовыми клетками. Система имеет единый протокол для всех типов клеток и гибка — количество клеток может варьировать от 2 х 104 до 6 х 106.




Криоконсервация клеток

Пластик для криохранения Nunc


  • Криопробирки и виалы для криохранилищ;
  • контейнеры для заморозки Mr. Frosty;
  • настольные термоконтейнеры для пробирок разного объёма,
поддерживающие температуру 0 или -20.
33.png
34.png Реагенты для криоконсервации


  • Среда для криоконсервации Recovery для стандартных культур клеток млекопитающих;
  • среда для криоконсервации Synth-A-Freeze для стволовых клеток и первичных культур;
  • набор для криоконсервации PSC Cryopreservation Kit, включающий реагент для увеличения жизнеспособности после оттаивания RevitaCell Supplement.



Системы EVOS для визуализации клеток


Системы EVOS предназначены для того, чтобы свести к минимуму отрицательные моменты
традиционной световой микроскопии.
EVOS компактны, просты в использовании и дают возможность проводить множество
исследований — от простой визуализации клеток до комплексного анализа
внутриклеточных макромолекул. Изображения, полученные с помощью EVOS, не требуют
дополнительной компьютерной обработки, совместимы со многими программами анализа
изображений и могут использоваться для публикаций или учебных целей.

35.png

Флюоресцентная микроскопия

EVOS FLoid — базовая система для флюоресцентной микроскопии — быстрая визуализация объектов; снабжена 1 объективом, 3 фиксированными каналами флюоресценции и монохромной фотокамерой.
EVOS FL — система микроскопии с мультиканальной флюоресценцией — расширенный набор функций; за счёт револьверной системы сменных объективов увеличение варьирует от 1.25х до 100х, предусмотрена возможность выбора 4 каналов флюоресценции и монохромной или цветной фотокамеры.
EVOS FL Auto — полностью автоматизированная система для флюоресцентной микроскопии. Большой 22'' сенсорный экран, возможность выбора 4 каналов флюоресценции и установки двойной фотокамеры — монохромной/цветной.

Световая микроскопия в проходящем свете

EVOS XL Core Cell — базовая система микроскопии; даёт возможность фазово-контрастной микроскопии и микроскопии в светлом поле.
EVOS XL Cell — система с расширенным набором функций: обладает дополнительными функциями подсчёта клеток и замедленной съемки.

Аксессуары: инкубатор для поддержания условий культивирования; световые LED-кубы для флюоресценции; объективы различных типов с увеличением от 2х до 100х; держатели для плашек, флаконов, слайдов и гемоцитометров.


Реагенты для визуализации клеток
36.png
  • Визуализация живых клеток — реагенты для отмывки клеток, красители и супрессоры фоновой флюоресценции;
  • визуализация фиксированных клеток — фиксирующие реагенты, реагенты для пермеабилизации, красители, усилители флюоресценции;
  • калибровка флюоресцентных микроскопов — стандарты, слайды и калибровочные гранулы;
  • флюоресцентные красители для определения жизнеспособности клеток, стадии клеточного цикла и наличия оксидативного стресса;
  • специальные флюоресцентные красители для визуализации клеточных структур и макромолекул.



Проточный цитометр Attune NxT

Технология акустической фокусировки потока даёт возможность анализировать образец в 10 раз быстрее по сравнению с обычными
цитометрами. Это позволяет работать с образцами большего объёма и/или с большим разведением, регистрировать редкие события и производить
подсчёт клеток с точностью, не зависящей от скорости потока. Простая пробоподготовка не требует концентрирования образца и лизиса
клеток, что позволяет избегать потерь времени и материала. Модульная система позволяет сконфигурировать прибор под задачи исследователя;
комбинирование 4 лазеров обеспечивает до 16 каналов детекции.
Tакже: антитела — человеческие, мышиные и кроличьи; конъюгированные с 24 флюоресцентными красителями, пробами Qdot или ферментами
(пероксидазой или фосфатазой); реагентика для калибровки и пробоподготовки (наборы FIX & PERM, блокирующие реагенты), растворы
для лизиса клеток; реактивы и наборы для анализа клеток — жизнеспособности клеток, клеточного цикла, апоптоза, пролиферации.

37.png


38.png


Автоматические счётчики клеток Countess II/FL
1478205160746.jpg Автоматические счётчики клеток Countess и Countess II FL:

  • точность, безошибочность подсчёта и высокая воспроизводимость;
  • подсчёт живых/мёртвых клеток и определение среднего размера клеток занимает не более 10 сек;
  • ручная и автоматическая фокусировка, сенсорный экран и простой интерфейс.



Countess II FL, в отличие от Countess II, работает не только в режиме видимого света, но и во флюоресцентном режиме на 2 каналах (опция), выбор
цвета — более 20 вариантов флюоресцентных LED-кубов; для Countess II FL предлагаются как одноразовые, так и многоразовые слайды (для Countess II
можно использовать только одноразовые слайды).

39.png


Выделение клеток на магнитных частица Dynabeads c аффинным покрытием

  • Выделение клеток из организмов человека или мыши;
  • выделение клеток из различных биологических материалов: крови, костного мозга, других тканей;
  • выделение различных типов клеток: Т- и В-лимфоцитов, моноцитов, лейкоцитов, стволовых клеток, эндотелия;
  • позитивная и негативная сорбция клеток;
  • активация клеток иммунной системы на частицах Dynabeads.

40.png

Возможно получение частиц, покрытых специфическими антителами по заказу исследователя.

Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!