Актуальность использования проточной цитометрии в ветеринарии и животноводстве

В последние годы применение проточной цитофлуориметрии (цитометрии) стало набирать популярность в ветеринарии и животноводстве, открывая новые возможности для диагностики как домашних, так и сельскохозяйственных животных, особенно при оценке иммунологического состояния.

Основным преимуществом проточной цитометрии является высокая скорость анализа частиц (до десятков тысяч в секунду) и получение статистически достоверных качественных и количественных данных по анализируемому образцу. При этом каждая клетка анализируется отдельно. С помощью проточной цитометрии можно изучать морфологию клеток, их поверхностные антигены, жизнеспособность, клеточный цикл, пролиферацию, апоптоз и пр.

Благодаря большому выбору моноклональных антител, конъюгированных с различными флуорохромами, в одном исследовании крови животных можно получить максимальную информацию о наличии или отсутствии различных патологий. Это позволяет ветеринарным врачам и исследователям проводить разнообразные анализы и получать точные результаты в кратчайшие сроки.

Компания Стар-лаб предлагает поближе познакомится с новыми проточными цитофлуориметрами (цитометрами) компании BioSino, Китай в нашей лаборатории в Москве, где Вы можете опробовать их в деле на своем образце!

Цитофлуориметр проточный, 1 лазер, 488 нм, 5 флуоресцентных параметров, 7S, BioSino

Цитофлуориметр проточный, до 3 лазеров, до 15 флуоресцентных параметров, SinoCyte, BioSino

Применение проточной цитометрии в ветеринарии и животноводстве

Проточная цитометрия может использоваться в ветеринарии для широкого спектра задач:

• Диагностика патологий крови. Например, выявление бешенства, паразитемий, различного вида анемий.
• Фармакодинамический мониторинг лекарственных препаратов для лечения животных. Например, исследование фармакодинамики циклоспорина – мощного лекарства, подавляющего выработку Т-клеток, используемого в ветеринарии для лечения воспалительных и аутоиммунных состояний.
• Анализ клеточных маркеров опухолевых клеток, определение их типа и степень злокачественности. Проточная цитометрия позволяет в кратчайшие сроки выявить острый лейкоз.

Примеры применения проточной цитометрии

В качестве примеров применения проточной цитометрии в животноводстве можно привести:

• Определение параметров коровьего молока в зависимости от состояния здоровья вымени.

Рис. 1. Стратегия гейтирования популяций лейкоцитов молока и экспрессии CD11b. A) Определение живых и мертвых клеток (LD-). B) Гейтирование CD45+ клеток в молоке. C) Отбор живых популяций лимфоцитов, макрофагов и полиморфноядерные лейкоциты (PMNs). D) Экспрессия CD11b на CD45+ клетках.

• Количественная оценка соматических клеток в коровьем молоке после различных физико-химических обработок. Ниже представлен протокол исследования молока.

Рис. 2. Краткое описание экспериментальной схемы подготовки соматических клеток и различных методов обработки: хранение в молоке или PBS в течение 72 ч, параметры центрифугирования и тепловой обработки.

• Количественное определение содержания ДНК спермы быков-производителей. Окрашивание образцов проводят красителем Hoechst 33342, который проникает в клетку и ядро и связывается избирательно с аденин-тиминовыми областями ДНК. Анализ сигнала флуоресценции позволяет исследователю дифференцировать X- и Y-сперматозоиды и разделить сперму по полу – получить сексированное семя, применение которого может существенно повысить продуктивность животноводческого предприятия.

Рис. 3. Схема получения сексированного семени быка-производителя с помощью проточной цитометрии.

Рис. 4. Гейтирование сперматозоидов, окрашенных Hoechst 33342. а) Отбор сперматозоидов по окраске FDA: область R1 – живые FDA-, R2 - мертвые FDA+. б) Гейтирование по окраске Hoechst 33342. (c) Гистограмма, показывающие два пика, соответствующие сигналам флуоресценции, генерируемым сперматозоидами, несущими Х- и Y-хромосомы.

В заключение, проточная цитометрия – это мощный инструмент, применение которого в диагностике и исследованиях значительно сокращает время получения результатов анализа образцов, способствуя таким образом улучшению качества ветеринарии и повышению комфорта и благополучия домашних и сельскохозяйственных животных.

Список использованной литературы

1) Li N, Richoux R, Perruchot M-H, Boutinaud M, Mayol J-F, Gagnaire V (2015) Flow Cytometry Approach to Quantify the Viability of Milk Somatic Cell Counts after Various Physico-Chemical Treatments. PLoS ONE 10(12): e0146071.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0146071

2) De Matteis G, Grandoni F, Scatà MC, Catillo G, Moioli B, Buttazzoni L. Flow Cytometry-Detected Immunological Markers and on Farm Recorded Parameters in Composite Cow Milk as Related to Udder Health Status. Veterinary Sciences. 2020; 7(3):114.

https://doi.org/10.3390/vetsci7030114

3) Yata V.K (2022). Sperm Sexing Using Flow Cytometry: Principles and Applications. In: Sperm Sexing and its Role in Livestock Production. Springer, Singapore.

https://doi.org/10.1007/978-981-19-1790-5_4

См. также:

Анализаторы газов крови и электролитов

Анализаторы глюкозы, лактата

Анализаторы молока и молочных продуктов

Биохимические анализаторы

Вортексы (вихревые смесители)

Лабораторные системы очистки воды

Наконечники для пипеток автоматических

Пипетки автоматические одноканальные механические и электронные

Пробирки до 45 мл типа Эппендорф

Пробирки до 50 мл типа Фалькон

Фильтрующие насадки (шприцевые фильтры)

Холодильники-морозильники +2...+14/ -20...-30 °C

Центрифуги для осаждения на низких оборотах

Ниже вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме: