Зональное центрифугирование - альтернатива бакетным роторам при работе на ультраскоростях

20.05.2016

См. также разделы: «Центрифуги от 6 л», «Центрифуги ультра».

Метод зонального центрифугирования заключается в наслаивании исследуемого образца на поверхность раствора с непрерывным градиентом плотности. Образец центрифугируют до тех пор, пока частицы не распределятся вдоль градиента в виде дискретных зон или полос (рис. №1). Благодаря созданию градиента плотности удается избежать смешивания зон. При разделении в градиенте плотности, объем вносимого образца ограничивается площадью поверхности, на которую наносится образец. Единственный способ существенно увеличить объем вносимого образца – это увеличить площадь поверхности. При разделении в градиенте плотности с использованием зонального ротора градиент и образец загружаются непосредственно в полость ротора. Вместимость цилиндрических или чашеобразных роторов для зонального центрифугирования в 50-100 раз превышает вместимость обычных бакет-роторов (ротор с подвесными стаканами). Таким образом, зональные роторы по сравнению с роторами других типов позволяют отцентрифугировать большее количество образца за гораздо меньшее время.

В начале работы градиент закачивается в ротор с помощью перистальтического насоса через уплотнительный узел для ввода и вывода исследуемого образца, далее загружается сам образец в центр ротора при этом ротор работает в режиме «загрузки» (2000 об/мин.) при использовании ротора со стандартным сердечником и в режиме полной остановки при использовании ротора с сердечником с переориентацией градиента. После загрузки ротор разгоняется до рабочей скорости, происходит разделение образца. По истечении необходимого времени центрифугирования из ротора выгружается образец, выгрузка происходит за счёт закачки в полость ротор вытеснительной жидкости.

При выполнении зонального центрифугирования в роторе могут использоваться два сердечника:

стандартный сердечник (динамический метод загрузки и разгрузки образца) и
сердечник с переориентацией градиента (статический метод загрузки и разгрузки образца).

Эти сердечники разделены на секторы. Ротор закрывается крышкой с резьбой.
Вращающийся уплотнительный узел позволяет подавать и откачивать раствор
из полости стандартного зонального ротора в процессе его вращения.

Примеры применений:

разделение гибридов РНК, ДНК, субъединиц рибосом и других клеточных компонентов;
выделение и очистка в градиенте плотности митохондрий, лизосом и белков;
выделение белковых примесей из различных препаратов.

Преимущества зонального центрифугирования: