Выделение и очистка нуклеиновых кислот

Набор Trizol Max для выделения бактериальной РНК (общей РНК, транскриптома, либо микро РНК) обеспечивает простой и надежный способ выделения РНК из грамположительных и грамотрицательных бактерий по технологии органической экстракции. В состав набора входит реагент TRIzol и реагент Max Bacterial Enhancement. Пятиминутная предварительная обработка бактерий с реагентом Max Bacterial Enhancement, содержащим хелатирующие агенты, ПАВ и буферные смеси, денатурирует бактериальные белки и эффективно деактивирует эндогенные РНКазы. Последующий бактериальный лизис с помощью реагента TRIzol обеспечивает получение высококачественной, минимально деградированной РНК.

Особенности набора Trizol Max

Набор Trizol Max имеет следующие особенности:

• полученная РНК может быть использована после выделения для ПЦР (кПЦР), ОТ-ПЦР, обратной транскрипции, молекулярного клонирования, блоттинга, конструирования библиотек кДНК;
• улучшает выделение суммарной РНК из грамположительных и грамотрицательных бактерий;
• более высокий выход благодаря улучшенному лизису бактериальных клеток и минимальной деградации РНК;
• минимальное загрязнение геномной ДНК;
• устранение необходимости в трудоемких стадиях механического и/или ферментативного лизиса клеток;
• выход РНК с одного выделения — 70 мкг;
• количество материала для выделения — до 1x108 клеток;
• быстрая процедура выделения (1 час).

Состав набора Trizol Max: реагент TRIzol и реагент Max Bacterial Enhancement.

Условия хранения и перевозки — температура от 2 до 25°C.

Набор для очистки РНК TRIzol Plus RNA Purification обеспечивает простой, надежный и быстрый метод выделения высококачественной общей РНК из широкого спектра образцов, включая клетки животных и растений, ткани, бактерии и дрожжи. Набор сочетает в себе лизирующий реагент TRIzol, а также картриджи с силикагелем PureLink RNA Mini для выделения сверхчистой общей РНК в течение часа, даже из сложных образцов, таких как волокнистые или жировые ткани. Набор обеспечивает эффективный лизис и даёт возможность получения РНК высокого качества за счёт ингибирования РНКаз.

Особенности набора TRIzol Plus RNA Purification:

• выделение из растений, дрожжей, тканей, бактерии, клеток;
• выход с одного выделения - 1000 мкг РНК;
• количество исходного материала - до 5·108 клеток или до 200 мг ткани.

Преимущества набора TRIzol Plus RNA Purification:

• сочетание технологии лизиса клеток на основе TRIzol и выделения РНК на основе спиновых колонок PureLink;
• удобные протоколы лизиса клеток и выделения РНК;
• является рекомендуемым методом очистки РНК в индустрии экспрессии генов.

Состав набора TRIzol Plus RNA Purification:

• реагент TRIzol (100 мл);
• лизирующий буфер (125 мл);
• промывочный буфер I (50 мл);
• промывочный буфер II (15 мл);
• вода свободная от РНКаз (15,5 мл);
• спин-картриджи с пробирками для сбора продукта (по 50 штук в каждой);
• пробирки для сбора продукта (по 50 штук в каждой).

Выделенная ДНК пригодна для следующих молекулярно-биологических манипуляций:

• анализа на микрочипах;
• ПЦР в реальном времени (qPCR);
• ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР);
• построения библиотек кДНК;
• модификации нуклеиновых кислот;
• футпринтинга; Нозерн-блоттинга.

Принцип работы набора TRIzol Plus RNA Purification:

Лизис образца с помощью TRIzol поддерживает целостность РНК, разрушая клетки и растворяя клеточные компоненты. TRIzol также обеспечивает немедленное и высокоэффективное ингибирование активности РНКаз во время гомогенизации образца. После лизиса в образце РНК связывается с мембраной на основе кремнезема в картриджах PureLink RNA Mini, промывается для удаления загрязнений, а затем элюируется водой свободной от РНКаз (также может использоваться Трис-буфер, рН 7,5).

Условия хранения и перевозки - комнатная температура.

Данный набор включает в себя реагент TRIzol LS и пробирки Phasemaker.

Реагент TRIzol LS — это готовый к использованию реагент для выделения высококачественной тотальной РНК из различных жидких биологических образцов человека и животных, а также из образцов растительного, бактериального происхождения и дрожжей.

Пробирки Phasemaker содержат густой жидкий полимер, который отделяет и полностью изолирует верхнюю водную фазу смеси реагентов TRIzol от органической фазы под ней, что значительно упрощает отбор верхней фазы, содержащей РНК.

Данный набор предназначен только для экстракции РНК, а не ДНК или белка. Объем анализируемого образца — 0,25 мл.

Преимущества реагента TRIzol LS:

• готовый к использованию реагент;
• надежность, эффективность и простота протокола выделения;
• новая формула лизирующего раствора на основе гуанидинового детергента;
• быстрая процедура выделения (60 минут);
• выделение тотальной РНК из 0,25 мл сыворотки с выходом 2,6-4 мкг РНК;
• выделение тотальной РНК из 7 × 10⁷ лейкоцитов с выходом до 60-70 мкг РНК.

Выделенная РНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР с использованием обратной транскрипции;
• создание библиотек кДНК;
• Нозерн-блоттинг;
• отбор поли-А содержащих РНК;
• анализ с защитой от действия нуклеаз;
• дот-блот-гибридизация.

Состав набора TRIzol LS:

• реагент TRIzol LS — 100 мл (A33252) или 200 мл (A33253);
• пробирки Phasemaker — 100 шт (A33252) или 200 шт (A33253).

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор включает в себя реагент для выделения РНК TRIzol Plus Purification Kit, а также пробирки Phasemaker.

Набор для выделения РНК TRIzol Plus Purification Kit характеризуется высокой лизирующей способностью реагента TRIzol в сочетании с удобным и быстрым протоколом выделения РНК с использованием картриджа с диоксидом кремния из набора PureLink RNA Mini Kit. Это позволяет получить сверхчистую тотальную РНК в течение одного часа, из разных типов образцов, таких как: человек, животные, растения, бактерии, дрожжи.

Пробирки Phasemaker содержат густой жидкий полимер, который отделяет и полностью изолирует верхнюю водную фазу смеси реагентов TRIzol от органической фазы под ней, что значительно упрощает отбор верхней фазы, содержащей РНК. Данный набор реагента для выделения РНК TRIzol Plus Purification Kit и пробирок Phasemaker предназначен для экстракции РНК, а не ДНК или белка. Масса анализируемого образца — 50-100 мг ткани. Масса образца культивированных клеток указана в инструкции к набору.

Преимущества реагента TRIzol Plus Purification Kit:

• готовый к использованию реагент;
• надежность, эффективность и простота протокола выделения;
• новая формула лизирующего раствора на основе гуанидинового детергента;
• быстрая процедура выделения (20 минут);
• выделение тотальной РНК из 50-100 мг образцов различного происхождения (растения, дрожжи, ткани, бактерии, клетки), с выходом до 250-500 мкг РНК.

Выделенная РНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР с использованием обратной транскрипции;
• Создание библиотек кДНК;
• Нозерн-блоттинг;
• анализ с защитой от действия нуклеаз;
• дот-блот-гибридизация.

Состав набора TRIzol Plus Purification Kit:

• реагент TRIzol — 100 мл;
• пробирки Phasemaker — 100 шт;
• набор PureLink RNA Mini — 1 набор.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Данный набор включает в себя реагент TRIzol и пробирки Phasemaker.

TRIzol — это готовый к использованию реагент для выделения высококачественной тотальной РНК из различных биологических образцов (человек, животные, растения, бактерии, дрожжи). Обеспечивает превосходный лизис даже сложных образцов.

Пробирки Phasemaker содержат густой жидкий полимер, который отделяет и полностью изолирует верхнюю водную фазу смеси реагентов TRIzol от органической фазы под ней, что значительно упрощает отбор верхней фазы, содержащей РНК. Этот набор реагента TRIzol и пробирок Phasemaker предназначен для экстракции РНК, а не ДНК или белка Масса анализируемого образца — 50-100 мг ткани. Масса образца культивированных клеток указана в инструкции к набору.

Преимущества реагента TRIzol:

• готовый к использованию реагент;
• надежность, эффективность и простота протокола выделения;
• новая формула лизирующего раствора на основе гуанидинового детергента;
• быстрая процедура выделения (60 минут);
• выделение тотальной РНК из 50-100 мг (или 0,25 мл) образцов различного происхождения (растения, дрожжи, ткани, бактерии, клетки), с выходом РНК:
• эпителиальные клетки (1×10⁶) — 8-15 мкг;
• фибропласты (1×10⁶) — 5-7 мкг;
• скелетные мышцы и мозг (1 мг) — 1-1,5 мкг;
• плацента (1 мг) — 1-4 мкг;
• печень (1 мг) — 6-10 мкг;
• почки (1 мг) — 3-4 мкг;

Выделенная РНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР с использованием обратной транскрипции;
• создание библиотек кДНК;
• созерн-блоттинг;
• анализ с защитой от действия нуклеаз;
• дот-блот-гибридизация.

Состав набора TRIzol:

• реагент TRIzol — 100 мл (A33250) или 200 мл (A33251);
• пробирки Phasemaker — 100 шт (A33250) или 200 шт (A33251).

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Готовый для использованию реагент для выделения РНК TRIzol LS (общей РНК, транскриптома, либо микро РНК) или одновременного выделения РНК, ДНК и белка из цельной крови, сыворотки или других жидких биологических образцов человека, животных, растений, грибов, бактерий и вирусов по технологии органической экстракции.

Особенности реагента TRIzol LS

Реагент TRIzol LS имеет следующие особенности:

• время выделения — 1 час;
• полученная РНК может быть использована после выделения для ПЦР, молекулярного клонирования, блоттинга, конструирования библиотек кДНК;
• реагент отличается от стандартного TRIzol большей концентрацией, что позволяет обрабатывать большее количество образцов;
• дополнительная очистка полученной РНК после выделения не требуется;
• рекомендован к использованию с пробирками Phasemaker;
• 200 мл реактива рассчитано на 200 выделений;
• рекомендуемый объём образца — от 250 до 1000 мкл;
• выход с одного выделения — 8 мг.

Условия хранения и перевозки: температура от 2 до 25°C.

Набор PureLink RNA Mini Kit предназначен для выделения суммарной РНК из широкого спектра биологических образцов — животных и растительных клеток и тканей, цельной крови, дрожжей и бактерий.

Преимущества набора:

• возможность выделения РНК одним набором из различных биологических материалов;
• минимальная контаминация геномной ДНК и возможность полного её удаления с помощью ДНКазной обработки;
• быстрый и простой протокол выделения;
• получение чистой РНК, пригодной для дальнейших манипуляций.

Выделение РНК происходит на спин-колонках; методика выделения заключается в гомогенизации и лизисе образцов в присутствии хаотропной соли, нанесении образца на спин-колонку, отмывке от загрязнений и элюции чистого препарата ДНК. Для эффективного лизиса сложных образцов можно использовать TRIzol.

Для получения РНК, не содержащей примеси ДНК, в качестве опции предлагается ДНКазаная обработка образца непосредственно на спин-колонке с помощью набора PureLink DNase Set (приобретается отдельно).

Выделенная РНК пригодна для следующих молекулярно-биологических манипуляций:

• ПЦР в реальном времени;
• количественная ПЦР в реальном времени;
• блоттинг РНК;
• амплификация РНК;
• получение библиотек кДНК (после поли(А)+ селекции).

Микроцентрифужные одноразовые пробирки Phasemaker с гелем, разделяющим несмешивающиеся фазы при органической экстракции.

Особенности пробирок Phasemaker

Пробирки Phasemaker имеют следующие особенности:

• гель Phasemaker разделяет водную и органическую фазы, что позволяет упростить экстракцию РНК из водной фазы;
• увеличивает выход РНК вплоть до 30% по сравнению с выделением без специальных пробирок;
• материал геля инертен и не вносит загрязнители в продукт;
• полученная РНК может быть использована после выделения для ПЦР, молекулярного клонирования, блоттинга, in vitro трансляции, футпринтинга;
• пробирки подходят для экстракции из свежих и замороженных образцов, включая ткани и кровь;
• пробирки совместимы с реагентами семейства TRIzol: реагентом TRIzol, реагентом TRIzol LS и набором очистки TRIzol Plus;
• не рекомендовано использовать с реактивами для выделения РНК самостоятельного изготовления;
• не рекомендовано использовать для выделения ДНК или белков;
• объём пробирок — 2 мл;
• пробирки совместимы с реагентами семейства RNAlater.

Условия хранения и перевозки: комнатная температура.

Пробирки Tempus предназначены для стабилизации РНК в образцах цельной крови для анализа экспрессии генов и прочих задач.

Особенности пробирок Tempus

Пробирки Tempus имеют следующие особенности:

• мгновенно лизируют клетки крови и стабилизируют РНК;
• не требуют дополнительных операций до последующего выделения РНК;
• сохраняют РНК до 5 дней при комнатной температуре и от 7 дней при 4°C;
• пробирки со стабилизированной РНК можно замораживать и хранить при температуре до -80°C;
• рекомендованы к использованию с реактивами семейства TRIzol;
• каждая пробирка содержит 6 мл стабилизирующего реагента, который эффективно лизирует клетки крови и стабилизирует РНК за одну стадию;
• не требуется дополнительной обработки крови перед дальнейшим выделением РНК;
• для получения образца рекомендовано использовать 3 мл крови;
• стабилизирующий реагент мгновенно инактивирует РНКазы и селективно осаждает РНК, в то время как белки и геномная ДНК остаются в растворе.

Условия хранения и перевозки: комнатная температура.