Реактивы по алфавиту на «»

Обратная транскрипция

Пока нет данных. Перейти в каталог

Фильтр

Сортировать:

Развернуть все Названия полностью

Диаэм

Набор реактивов для обратной транскрипции с MMLV-RH

1967.0050

50 реакций

хранение -20°C, транспортировка +4°C

24 535

24 535 AMD

1967.0250

250 реакций

хранение -20°C, транспортировка +4°C

96 893

96 893 AMD

Набор реактивов для обратной транкрипции с MMLV–RH представляет собой полную систему для эффективного синтеза первой цепи кДНК с использованием в качестве матрицы мРНК или суммарной РНК. Набор содержит все необходимые компоненты для проведения обратной транскрипции: обратную транскриптазу MMLV–RH, два варианта 5× ОТ-буфера, смесь dNTP, раствор ДТТ, растворы олиго(dT)₁₆ праймера и случайного гексапраймера, а также свободную от РНКаз воду.

MMLV–RH – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Она отличается от обратной транскриптазы MMLV дикого типа структурой, каталитическими свойствами и температурным оптимумом активности. Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность, но лишен активности РНКазы Н. MMLV–RH проявляет оптимальную активность при +42°С (активна до +50°С). Фермент способен синтезировать первую цепь кДНК длиной до 10 т.н. и включать модифицированные основания.

Кроме обратной транскриптазы, набор содержит два типа буфера на основе KCl и (NH₄)₂SO₄, оптимизированные для проведения эффективной реакции обратной транскрипции с любых матриц РНК, в том числе содержащих участки повышенной сложности (сильно структурированные или GC-богатые).

Олиго(dT)₁₆ праймер и случайный гексапраймер позволяют более узконаправленно подходить к обратной транскрипции интересующих типов или участков РНК. Случайный гексапраймер неспецифически связывается с РНК-матрицей и используется для синтеза кДНК со всех типов РНК в составе суммарной РНК. Олиго(dT)₁₆ праймер селективно отжигается на полиадениновых последовательностях РНК, обеспечивая синтез кДНК только с мРНК, содержащих поли(А)-3’-конец. Также можно использовать специфичные праймеры для синтеза определённой последовательности.

Состав набора

Компонент	Кат. #
Компонент	1967.0050	1959.0250
MMLV-RH ревертаза, 100 ед. акт./ мкл*	1 × 50 мкл (5000 ед.акт.)	2 × 250 мкл (25000 ед.акт.)
5× ОТ-буфер (KCl)	1 × 220 мкл	3 × 400 мкл
5× ОТ-буфер ((NH₄)₂SO₄)	1 × 220 мкл	3 × 400 мкл
20× смесь dNTP (10 мМ каждого)	1 × 120 мкл	2 × 300 мкл
Дитиотреитол	1 × 110 мкл	2 × 260 мкл
Случайный гексапраймер, 20 мкМ	1 × 50 мкл	1 × 260 мкл
Олиго(dT) праймер, 20 мкМ	1 × 50 мкл	1 × 260 мкл
Вода, обработанная ДЭПК	3 × 600 мкл	5 × 1.8 мл

* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль dTMP в кислотонерастворимый продукт за 10 мин при +37 °С.

Источник
Фермент получен из рекомбинантного штамма Е. coli, содержащего делеционный вариант гена обратной транскриптазы MMLV.

Буфер для хранения:
50 мМ Трис-HCl, pH 8.0 (при +25°C), 100 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 5 мМ дитиотреитол, 50 % (v/v) глицерин и 0.1 % (v/v) NP-40.

5× ОТ-буфер (KCl):
250 мM Трис-НCl, рН 8.3 (при +25°C), 250 мM KCl, 20 мМ MgCl₂, стабилизаторы.

5× ОТ-буфер ((NH₄)₂SO₄):
250 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при +25°C), 100 мM (NH₄)₂SO₄, 20 мМ MgCl₂, стабилизаторы.

Область применения:

Синтез первой цепи кДНК для ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в режиме реального времени.
Синтез кДНК для клонирования.
Получение меченых кДНК-зондов для микрочипов (microarray).
Мечение ДНК.
Анализ РНК с помощью праймер-экстеншн.

Хранение и транспортировка:
при -20°С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.

1967_Набор реактивов для обратной транскрипции с MMLV, инструкция, Стар-лаб, русск., стр. 3

Диаэм

Экстра-микс для обратной транскрипции и ПЦР в режиме реального времени одношаговым методом RT-qPCR SYBR Blue

1970.0080

80 реакций

37 074

37 074 AMD

1970.0400

400 реакций

169 304

169 304 AMD

Экстра-микс RT-qPCR SYBR Blue предназначен для проведения обратной транскрипции и количественной ПЦР в режиме реального времени одношаговым методом с использованием флуоресцентного красителя SYBR Green I. Кроме собственно экстра-микса RT-qPCR, в состав набора входят 2-кратный буфер RT-qPCR SYBR Blue и вода, обработанная диэтилпирокарбонатом (ДЭПК). Буфер оптимизирован для протекания как обратной транскрипции, так и ПЦР (в том числе на сложных и GC-богатых матрицах) и содержит все необходимые компоненты (за исключением РНК-матрицы и праймеров), а также интеркалирующий краситель SYBR Green I. Хранение буфера при комнатной температуре в течение 2 дней не снижает эффективность реакции. Инертный краситель в составе Экстра-микса окрашивает его в голубой цвет (максимум поглощения – 615 нм) и облегчает контроль за раскапыванием смеси при использовании многолуночных планшетов.

Экстра-микс RT-qPCR представляет собой смесь обратной транскриптазы MMLV-RH и HS-Taq ДНК-полимеразы с "горячим" стартом в оптимальном соотношении для протекания обеих реакций.

MMLV–RH – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Она отличается от обратной транскриптазы MMLV дикого типа структурой, каталитическими свойствами и температурным оптимумом активности. Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность, но лишен активности РНКазы Н. MMLV–RH проявляет оптимальную активность при +42°С (активна до +50°С). Фермент способен синтезировать первую цепь кДНК длиной до 10 т.н. и включать модифицированные основания.

HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза неактивна при температуре ниже +70^оС. Для её активации необходим прогрев реакционной смеси при +95°С в течение 5 мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; обладает способностью присоединять аденин к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.

SYBR Green I - флуоресцентный интеркалирующий краситель для количественной и качественной детекции продуктов в ходе ПЦР в режиме реального времени. SYBR Green I обеспечивает простой и экономичный вариант для детекции и количественного определения ПЦР-продуктов без необходимости использования специфичных флуоресцентных зондов (в том числе в режиме реального времени). В ходе амплификации краситель SYBR Green I встраивается в малую бороздку ДНК ПЦР-продуктов и испускает более сильный по сравнению с несвязанным красителем флуоресцентный сигнал. Максимумы поглощения и испускания SYBR Green I - 494 нм и 521 нм соответственно, что позволяет использовать его со всеми известными на сегодняшний день амплификаторами для проведения ПЦР в режиме реального времени.

Состав набора

Кат. №	Кол-во реакций по 50 мкл	Экстра-микс RT-qPCR	Буфер RT-qPCR SYBR Blue(2x)	ДМСО	Вода, обработанная ДЭПК
1969.0040	40	80 мкл	2 х 0,5 мл	0,5 мл	2 х 0,5 мл
1969.0200	200	2 х 200 мкл	4 х 1,25 мл	0,5 мл	3 х 1,8 мл

Состав Экстра-микса RT-qPCR:

50 мM Трис-НCl, рН 8.0 (при +25 °С);
100 мM NaCl;
MMLV-RH обратная транскриптаза;
HS-Taq ДНК-полимераза;
1 мМ ЭДТА;
5 мМ дитиотреитол;
50% (v/v) глицерин;
0,1% (v/v) NP-40.

Состав буфера RT-qPCR SYBR Blue (2х):

100 мM Трис-НCl, рН 8.3 (при +25 °С);
150 мM КCl;
0,6 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата;
10 мМ MgCl₂;
8 мМ дитиотреитол;
интеркалирующий краситель SYBR Green I;
инертный краситель;
стабилизаторы и усилители активности ферментов.

Преимущества использования экстра-микса:

Высокая специфичность.
Высокая чувствительность.
Простота и удобство в использовании.
Низкая ошибка пипетирования и вероятности кросс-контаминации.
Стандартизация условий постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).
Возможность ТА-клонирования ПЦР-продуктов.

Область применения:

Одношаговая стандартная ОТ-ПЦР.
Количественный анализ РНК, в том числе анализ экспрессии генов.

Ограничения к использованию:

Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 тыс. п.н.
Не рекомендуется использовать для ПЦР с флуоресцентными зондами.

Срок хранения и транспортировка:
9 месяцев при -20 °С; не более 30 циклов замораживания- азмораживания экстра-микса RT-qPCR.

Диаэм

Экстра-микс для обратной транскрипции и ПЦР одношаговым методом RT-PCR-Color

1971.0040

40 реакций

транспортировка -20°C

26 815

26 815 AMD

1971.0200

200 реакций

116 868

116 868 AMD

Экстра-микс RT-PCR Color предназначен для проведения обратной транскрипции и ПЦР одношаговым методом. Кроме собственно экстра-микса, в состав набора входят 2-кратный буфер RT-PCR Color, ДМСО и вода, обработанная диэтилпирокарбонатом (ДЭПК). Буфер оптимизирован для протекания как обратной транскрипции, так и ПЦР и содержит все необходимые компоненты (за исключением РНК-матрицы и праймеров). Хранение буфера при комнатной температуре в течение 2 дней не снижает эффективность реакции. Буфер содержит красители, не влияющие на работу ферментов, и компоненты, увеличивающие плотность пробы для удобства нанесения на гель.

Экстра-микс RT-PCR Color представляет собой смесь обратной транскриптазы MMLV-RH и HS-Taq ДНК-полимеразы с "горячим" стартом в оптимальном соотношении для протекания обеих реакций.

MMLV–RH – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Она отличается от обратной транскриптазы MMLV дикого типа структурой, каталитическими свойствами и температурным оптимумом активности. Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность, но лишен активности РНКазы Н. MMLV–RH проявляет оптимальную активность при +42°С (активна до +50°С). Фермент способен синтезировать первую цепь кДНК длиной до 10 т.н. и включать модифицированные основания.

HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза неактивна при температуре ниже +70^оС. Для её активации необходим прогрев реакционной смеси при +95°С в течение 5 мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; обладает способностью присоединять аденин к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.

Состав набора

Кат. №	Кол-во реакций по 50 мкл	Экстра-микс RT-PCR Color	Буфер RT-PCR Color (2x)	ДМСО	Вода, обработанная ДЭПК
1971.0040	40	80 мкл	2 х 0,5 мл	0,5 мл	2 х 0,5 мл
1971.0200	200	2 х 200 мкл	4 х 1,25 мл	0,5 мл	3 х 1,8 мл

Состав Экстра-микса RT-qPCR:

50 мM Трис-НCl, рН 8.0 (при +25 °С);
100 мM NaCl;
MMLV-RH обратная транскриптаза;
HS-Taq ДНК-полимераза;
1 мМ ЭДТА;
5 мМ дитиотреитол;
50% (v/v) глицерин;
0,1% (v/v) NP-40.

Состав буфера RT-qPCR (2х):

100 мM Трис-НCl, рН 8.3 (при +25 °С);
150 мM КCl;
0,6 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата;
6 мМ MgCl₂;
8 мМ дитиотреитол;
стабилизаторы и усилители активности ферментов;
маркерные красители.

Преимущества использования экстра-микса:

Высокая специфичность.
Высокая чувствительность.
Простота и удобство в использовании.
Низкая ошибка пипетирования и вероятности кросс-контаминации.
Стандартизация условий постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).
Возможность ТА-клонирования ПЦР-продуктов.
Сокращается стадия пробоподготовки для анализа результатов ПЦР - благодаря утяжеляющим добавкам и красителям, не требуется буфер для нанесения пробы на гель.

Область применения:

Одношаговая стандартная ОТ-ПЦР.
Анализ экспрессии генов.

Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 тыс. п.н.

Срок хранения и транспортировка:
9 месяцев при -20 °С; не более 30 циклов замораживания-размораживания экстра-микса RT-qPCR.

1971_Экстра-микс для RT-PCR Color, инструкция, Стар-лаб, русск., 5 стр.

Диаэм

Ингибитор РНКаз RiboBond, 40 е.а./мкл

3784.2000

2000 e.a.

хранение -20°C

22 798

22 798 AMD

3784.10000

10000 e.a.

хранение -20°C

93 017

93 017 AMD

Ингибитор РНКаз RiboBond ингибирует рибонуклеазную активность эукариотических ферментов, таких как РНКаза A, РНКаза B, РНКаза C, и защищает РНК от неспецифического гидролиза. Представляет собой рекомбинантный белок массой 50 кДа, экспрессируемый в E.coli, предназначен для использования в приложениях, где присутствие РНКаз может снизить качество результатов экспериментов, например при выделении РНК, синтезе кДНК, ОТ-ПЦР, транскрипции и трансляции in vitro.

Условия хранения: -20 °С.

Thermo FS

Набор для синтеза первой цепи кДНК с обратной транскриптазой RevertAid

K1622

100 реакций

хранение -20°C, транспортировка -20°C

682 001

682 001 AMD

Набор с обратной транскриптазой RevertAid - полная система для эффективного синтеза первой цепи кДНК ан РНК-матрицах. В состав набора входит обратная рестриктаза RevertAid - рекомбинантная обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей (M-MuLV-RT). Она активна при температурах от +42 до +50оС и способна синтезировать кДНК до 13 тыс. п.н.

В состав набора также входят: реакционный буфер, смесь дезокситрифосфатов, ингибитор РНКаз RiboLock, случайный 6-нуклеотидный праймер, олиго(дТ)18 праймер и контольный препарат - праймеры и матрица GAPDH.

Олиго(дТ)₁₈ праймер предназначен для специфического отжига на 3’-поли(А) матричной РНК. Для обратной транскрипции 5-концов РНК и РНК без поли(А)-концов используется случайный праймер.

Области применения:

Синтез первой цепи кДНК в реакциях ОТ-ПЦР или ОТ-ПЦР в реальном времени;
синтез полноразмерных библиотек кДНК;
синтез антисмысловой РНК.

Условия хранения: -20^оС

Bio-Rad

Набор реагентов SingleShot Cell Lysis Kit

1725080

100x50 мкл реакций

326 123

326 123 AMD

Набор реагентов для лизиса клеток. Полученные с помощью набора клеточные лизаты используются для постановки реакции ОТ-ПЦР без дополнительной очистки РНК. Доля лизата в реакционной смеси при постановке обратной транскрипции может составлять до 45%, при постановке количественной ПЦР – до 20%. Количество клеток в одной реакции лизиса – от 10 до 10⁵, время лизиса – 20 минут. В состав набора входят лизирующий буфер и растворы протеиназы К и ДНКазы.

Диаэм

Транскриптаза обратная M-MuLV–RH, термофильная

1968.1000

10000 единиц

хранение -20°C

34 197

34 197 AMD

Область применения: синтез первой цепи кДНК для ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в режиме реального времени, синтез кДНК для клонирования, получение меченых кДНК-зондов для микрочипов (microarray), мечение ДНК, анализ РНК с помощью праймер-экстеншн.

Thermo FS

Транскриптаза обратная RevertAid, 200 ед/мкл.

EP0441

10 000 единиц

транспортировка -20°C

137 948

137 948 AMD

EP0442

5х10 000 единиц

транспортировка -20°C

603 086

603 086 AMD

Обратная транскриптаза RevertAid — это рекомбинантная обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей (M-MuLV) с модифицированной структурой и каталитическими свойствами. Фермент обладает РНК-зависимой и ДНК-зависимой полимеразной активностью. Обратная транскриптаза RevertAid проявляет активность РНКазы Н в меньшей степени, чем обратная транскриптаза вируса миелобластоза птиц (AMV-RT).

Особенности обратной транскриптазы RevertAid

Обратная транскриптаза RevertAid имеет следующие особенности:

cинтезирует первую цепь кДНК до 13 тыс п.н.;
оптимальная температура реакции +42 °С;
активна до +50 °С;
способна встраивать модифицированные нуклеотиды — меченые Су3, Су5, родамином родамином или флюоресцеином.

Области применения обратной транскриптазы RevertAid

Обратная транскриптаза RevertAid применяется в следующих областях:

синтез первой цепи кДНК в реакциях ОТ-ПЦР или ОТ-ПЦР в реальном времени;
синтез кДНК для клонирования или экспрессии белков;
мечение ДНК для микрочипов;
анализ РНК с помощью праймер-экстеншн.

Комплектуется 5-кратным реакционным буфером.

Условия хранения: -20 °С.