Ферменты

Бензонуклеаза — это нуклеаза, расщепляющая все формы как ДНК, так и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые). Фермент эффективен в широком диапазоне рабочих условий. Оптимальное значение pH для активности фермента составляет от 8,0 до 9,2. Бензонуклеаза гидролизует фосфодиэфирные связи, что приводит к образованию олигодезоксинуклеотидов с концевыми 5’-монофосфатами длиной 3-5 оснований.

Применение:

Бензонуклеаза идеальна для широкого спектра применений, где желательно полное расщепление нуклеиновых кислот:

• для гидролиза природных или денатурированных нагреванием ДНК и РНК;
• для удаления нуклеиновых кислот во время экстракции белка: бензонуклеаза уменьшает вязкость образца и облегчает последующие операции по очистке рекомбинантного белка или экстракции белка из образцов клеток тканей;
• для удаления нуклеиновой кислоты из клеточного или бактериального лизата, снижения вязкости раствора и увеличения выхода белка;
• для удаления примесей нуклеиновых кислот из препаратов рекомбинантного белка для подготовки образцов для двумерного гель-электрофореза белков;
• для предотвращения слипания клеток в клеточной смеси;
• для расщепление нуклеиновых кислот для облегчения получения высококачественных телец включения перед ренатурацией нерастворимых белков;
• для удаления загрязнения ДНК при приготовлении проб вакцины и вируса.

Единица активности.

За единицу активности бензонуклеазы принимают количество фермента, превращающего 50 мкг ДНК спермы лосося в нуклеотиды за 30 минут при 37 °C в реакционном буфере: 50 мМ Трис-HСl, pH 8,0 и 1 мМ MgCl₂.

CAS No	9025-65-4
Чистота	≥ 90% (SDS-PAGE)
Концентрация	250 ед./мкл
Молекулярный вес (кДа)	30 000
Источник	Рекомбинантный белок полученный из E. coli
Оптимальная реакционная температура	20 - 37 °С
Оптимальный реакционный буфер	50 мМ Трис-HСl, 1 мМ MgCl₂, 50 - 150 мМ NaCl, pH 8,0
Токсичность	атоксичный
Условия хранения	50 мМ Трис-HCl, pH 8,0, 50 мМ NaCl, 5 мМ MgCl₂ и 50% глицерин
Температура хранения	-20 °C

Бензонуклеаза — это нуклеаза, расщепляющая все формы как ДНК, так и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые). Фермент эффективен в широком диапазоне рабочих условий. Оптимальное значение pH для активности фермента составляет от 8,0 до 9,2. Бензонуклеаза гидролизует фосфодиэфирные связи, что приводит к образованию олигодезоксинуклеотидов с концевыми 5’-монофосфатами длиной 3-5 оснований.

Применение:

Бензонуклеаза идеальна для широкого спектра применений, где желательно полное расщепление нуклеиновых кислот:

• для гидролиза природных или денатурированных нагреванием ДНК и РНК;
• для удаления нуклеиновых кислот во время экстракции белка: бензонуклеаза уменьшает вязкость образца и облегчает последующие операции по очистке рекомбинантного белка или экстракции белка из образцов клеток тканей;
• для удаления нуклеиновой кислоты из клеточного или бактериального лизата, снижения вязкости раствора и увеличения выхода белка;
• для удаления примесей нуклеиновых кислот из препаратов рекомбинантного белка для подготовки образцов для двумерного гель-электрофореза белков;
• для предотвращения слипания клеток в клеточной смеси;
• для расщепление нуклеиновых кислот для облегчения получения высококачественных телец включения перед ренатурацией нерастворимых белков;
• для удаления загрязнения ДНК при приготовлении проб вакцины и вируса.

Единица активности.

За единицу активности бензонуклеазы принимают количество фермента, превращающего 50 мкг ДНК спермы лосося в нуклеотиды за 30 минут при 37 °C в реакционном буфере: 50 мМ Трис-HСl, pH 8,0 и 1 мМ MgCl₂.

CAS No	9025-65-4
Чистота	≥ 99% (SDS-PAGE)
Концентрация	250 ед./мкл
Молекулярный вес (кДа)	30 000
Источник	Рекомбинантный белок полученный из E. coli
Оптимальная реакционная температура	20 - 37 °С
Оптимальный реакционный буфер	50 мМ Трис-HСl, 1 мМ MgCl₂, 50 - 150 мМ NaCl, pH 8,0
Токсичность	атоксичный
Условия хранения	50 мМ Трис-HCl, pH 8,0, 50 мМ NaCl, 5 мМ MgCl₂ и 50% глицерин
Температура хранения	-20 °C

10x буфер B (Blue) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Концентрация	10x
Состав	1x (10 мМ Tris-HCl (рН 7,5 при 37 °С), 10 мМ MgCl₂, 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Универсальный буфер FastDigest Green является уникальным буферным раствором для гидролиза, который обеспечивает 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции для ускоренного гидролиза ДНК FastDigest.

Буфер позволяет выполнять двукратный и многократный гидролиз ДНК с любой комбинацией ферментов. Нет необходимости в последовательном гидролизе разными эндонуклеазами рестрикции или смене буфера.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как лигазы, фосфотазы, киназы и мезофильные ДНК-полимеразы также имеют 100% активность в буфере FastDigest Green. Таким образом, ферменты, используемые в последующих применениях, могут быть непосредственно добавлены в реакционную смесь.

FastDigest Green содержит утяжеляющий раствор и трекинговые красители для прямого нанесения реакционной смеси на гель.

Для применений, требующих анализа продукта с помощью флуоресцентного возбуждения (например, измерения концентрации в УФ-свете), рекомендуется бесцветный FastDigest буфер.

Преимущества универсального буфера FastDigest Green:

• обеспечивает быстрое однократное, двойное или многократное расщепление ДНК в течение 5-15 минут;
• 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest;
• 100% активность ДНК/РНК модифицирующих ферментов;
• нет необходимости в промежуточных стадиях очистки ДНК;
• исключает стадии последовательного гидролиза и замену буфера;
• прямое нанесение реакционной смеси на гель.

Концентрация	10x
Примечание	Хранение при 4 °C не более 6 месяцев.
Условия хранения	-20 °С

Универсальный буфер FastDigest является уникальным буферным раствором для гидролиза, который обеспечивает 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции для ускоренного гидролиза ДНК FastDigest.

Буфер позволяет выполнять двукратный и многократный гидролиз ДНК с любой комбинацией ферментов. Нет необходимости в последовательном гидролизе разными эндонуклеазами рестрикции или смене буфера.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как лигазы, фосфотазы, киназы и мезофильные ДНК-полимеразы также имеют 100% активность в буфере FastDigest. Таким образом, ферменты, используемые в последующих применениях, могут быть непосредственно добавлены в реакционную смесь.

Преимущества универсального буфера FastDigest:

• обеспечивает быстрое однократное, двойное или многократное расщепление ДНК в течение 5-15 минут;
• 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest;
• 100% активность ДНК/РНК модифицирующих ферментов;
• нет необходимости в промежуточных стадиях очистки ДНК;
• исключает стадии последовательного гидролиза и замену буфера.

Концентрация	10x
Примечание	Хранение при 4 °C не более 6 месяцев.
Условия хранения	-20°С

Буфер G (Green) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Концентрация	10x
Состав	1x (10 мМ Tris-HCl (рН 7,5 при 37 °С), 10 мМ MgCl₂, 50 мМ NaCl 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

10X буфер GeneAmp PCR Gold оптимизирован для использования с ДНК-полимеразой AmpliTaq Gold и ДНК-полимеразой AmpliTaq Gold LD.

Буфер GeneAmp PCR Gold не содержит в своем составе ионы магния. Буфер поставляется в комплекте с раствором MgCl₂. Совместное использование буфера GeneAmp 10X PCR Gold и раствора MgCl₂ обеспечивает большую универсальность в оптимизации концентрации ионов магния для достижения оптимальных условий для ПЦР с любым специфическим набором праймеров и ДНК-матрицы.

Список компонентов:

• буфер GeneAmp PCR Gold, 10X: 150 мМ Tris-HCl, рН 8.0; 500 мМ KCl;
• раствор 25 мМ MgCl₂;
• все растворы приготовлены на автоклавированной, деионизированной, ультрафильтрованной воде.

Эндонуклеазы рестрикции от New England Biolabs комплектуются буфером, обеспечивающим максимальную активность конкретного фермента. Буфер NEBbuffer 1.1 (жёлтая маркировка) — один из четырёх стандартных рестриктазных буферов.

Состав 1-кратного буфера:

• 10 мМ MgCl₂;
• 10 мМ Бис-Трис-Пропан-HCl;
• 100 мкг/мл БСА;
• pH 7 (+25 °C).

Условия хранения — -20 ^°С.

Эндонуклеазы рестрикции от New England Biolabs комплектуются буфером, обеспечивающим максимальную активность конкретного фермента. Буфер NEBbuffer 2 (синяя маркировка) — один из четырёх стандартных рестриктазных буферов. В отличие от буфера NEBuffer 2.1, этот буфер не содержит БСА, поэтому рекомендуется использовать его с рестриктазами, не требующими БСА для своей работы.

Условия хранения — -20 ^°С.

Эндонуклеазы рестрикции от New England Biolabs комплектуются буфером, обеспечивающим максимальную активность конкретного фермента. Буфер NEBbuffer 2.1 (синяя маркировка) — один из четырёх стандартных рестриктазных буферов.

Состав 1-кратного буфера:

• 50 мМ NaCl;
• 10 мМ MgCl₂;
• 10 мМ Трис-HCl;
• 100 мкг/мл БСА;
• pH 7 (+25 °C).

Условия хранения — -20 ^°С.

Эндонуклеазы рестрикции New England Biolabs комплектуются буфером, обеспечивающим максимальную активность конкретного фермента. Буфер NEBbuffer 3 (красная маркировка) — один из четырёх стандартных рестриктазных буферов. В отличие от буфера NEBuffer 3.1, этот буфер не содержит БСА, поэтому рекомендуется использовать tuj с рестриктазами, не требующими БСА для своей работы.

Состав 1-кратного буфера:

• 10 мМ MgCl₂;
• 50 мМ Трис-HCl;
• 100 мМ NaCl;
• 1 мМ ДТТ;
• pH 7,9 (+25 °C).

Условия хранения — -20 °С.

Эндонуклеазы рестрикции от New England Biolabs комплектуются буфером, обеспечивающим максимальную активность конкретного фермента. Буфер NEBbuffer 3.1 (красная маркировка) — один из четырёх стандартных рестриктазных буферов.

Состав 1-кратного буфера:

• 10 мМ MgCl₂;
• 50 мМ Трис-HCl;
• 100 мМ NaCl;
• 100 мкг/мл БСА;
• pH 7,9 (+25 °C).

Условия хранения — -20 ^°С.

Эндонуклеазы рестрикции New England Biolabs комплектуются буфером, обеспечивающим максимальную активность конкретного фермента. Буфер NEBbuffer 4 (зелёная маркировка) — один из четырёх стандартных рестриктазных буферов. Этот буфер не содержит БСА, поэтому рекомендуется использовать его с рестриктазами, не требующими БСА для своей работы.

Состав 1-кратного буфера:

• 10 мМ MgCl_₂;
• 50 мМ ацетат калия;
• 20 мМ Трис-ацетат;
• 1 мМ ДТТ;
• pH 7,9 (+25 °C).

Условия хранения — -20 ^°С.

Эндонуклеазы рестрикции от New England Biolabs комплектуются буфером, обеспечивающим максимальную активность конкретного фермента. Буфер NEBbuffer 1 (жёлтая маркировка) — один из четырёх стандартных рестриктазных буферов. В отличие от буфера NEBuffer 1.1, этот буфер не содержит БСА, поэтому рекомендуется использовать его с рестриктазами, не требующими БСА для своей работы.

Состав 1-кратного буфера:

• 10 мМ MgCl₂;
• 1 мМ ДТТ;
• 10 мМ Бис-Трис-Пропан-HCl;
• pH 7,9 (+25 °C).

Условия хранения — -20 ^°С.

Буфер O (Orange) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Концентрация	10x
Состав	1x (50 мМ Tris-HCl (рН 7,5 при 37 °С), 10 мМ MgCl₂, 100 мМ NaCl, 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Буфер R (Red) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Концентрация	10x
Состав	1x (10 mM Tris-HCl (pH 8.5 at 37 °C), 10 мМ MgCl₂ , 100 мМ KCl, 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Буфер Tango (yellow) обеспечивает оптимальные условия реакции для эндонуклеаз рестрикции; предварительно смешан с BSA для повышения стабильности.

Буфер танго был разработан для проведения реакции двойного гидролиза ДНК эндонуклеазами рестрикции.

Концентрация	10x
Состав	1x (33 мМ трис-ацетат (рН 7,9 при 37 °С), 10 мМ ацетат магния, 66 мМ ацетат калия, 0.1 мг/мл BSA)
Примечание	Буфер содержит BSA, не рекомендуется хранить буфер при 4 °С более одной недели.
Условия хранения	-20 °С

Пятибуферная система Thermo FS обеспечивает оптимальные условия реакции для каждой эндонуклеазы рестрикции. Эта система состоит из буферов: B (blue), G (green), O (orange), R (red), и Tango (yellow). Все эндонуклеазы рестрикции поставляются в цветокодированных пробирках для указания рекомендуемого реакционного буфера. Рекомендуемый буфер и/или универсальный буфер Tango поставляются с каждым ферментом.

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Эндонуклеазы рестрикции от New England Biolabs комплектуются буфером, обеспечивающим максимальную активность конкретного фермента. Обычно это один из четырёх стандартных буферов - 1.1, 2.1, 3.1 или CutSmart (для некоторых рестриктаз необходим специальный буфер). Все эти буферы имеют соответствующую цветовую маркировку на этикетке - жёлтую, синюю, красную или зелёную.
Состав буферов приведён на сайте New England Biolabs.

Условия хранения — -20 ^°С.

ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5’-фосфорилированным и 3’-гидроксилированным концами двух фрагментов двойной цепи ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, но не однонитевые нуклеиновые кислоты.

В качестве кофермента требуется наличие АТФ.

ДНК-лигаза Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Реакция лигирования липких концов происходит в течение 10 минут при комнатной температуре.

Для лигирования тупых концов в комплект входит раствор полиэтиленгликоля.

Области применения:

• Клонирование фрагментов ДНК или ПЦР-фрагментов в вектор после рестрикции;
• пришивка олигонуклеотидных линкеров и адапторов к ДНК;
• лигазная детекция РНК ;
• репарация 1-цепочечных разрывов в двухцепочечных молекулах нуклеиновых кислот;
• циркуляризация линейной ДНК.

ДНК-лигаза Т4 Thermo Scientific комплекутется 10-кратным лигазным буфером и 50% растворов ПЭГ.

Активность ДНК-лигазы может измеряться в единицах лигирования липких концов (лигирование 50% HindIII-фрагментов ДНК фага в течение 30 минут) или в единицах Вейсса (каталитическое превращение 1 нмоль дифосфата в течение 20 минут). 1 единица Вейса равна 200 единицам лигирования липких концов.

Важно!

1) Связывание лигазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

2) При электротрансформации лигазной смеси необходимо произвести очистку ДНК от фермента (на спин-колонках или фенол-хлороформной экстракцией)

Условия хранения: -20^оС

ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5’-фосфорилированным и 3’-гидроксилированным концами двух фрагментов двойной цепи ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, но не однонитевые нуклеиновые кислоты.

В качестве кофермента требуется наличие АТФ.

ДНК-лигаза Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Реакция лигирования липких концов происходит в течение 10 минут при комнатной температуре.

Для лигирования тупых концов в комплект входит раствор полиэтиленгликоля.

Области применения:

• Клонирование фрагментов ДНК или ПЦР-фрагментов в вектор после рестрикции;
• пришивка олигонуклеотидных линкеров и адапторов к ДНК;
• лигазная детекция РНК ;
• репарация 1-цепочечных разрывов в двухцепочечных молекулах нуклеиновых кислот;
• циркуляризация линейной ДНК.

ДНК-лигаза Т4 Thermo Scientific комплекутется 10-кратным лигазным буфером и 50% растворов ПЭГ.

Активность ДНК-лигазы может измеряться в единицах лигирования липких концов (лигирование 50% HindIII-фрагментов ДНК фага в течение 30 минут) или в единицах Вейсса (каталитическое превращение 1 нмоль дифосфата в течение 20 минут). 1 единица Вейса равна 200 единицам лигирования липких концов.

Важно!

1) Связывание лигазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

2) При электротрансформации лигазной смеси необходимо произвести очистку ДНК от фермента (на спин-колонках или фенол-хлороформной экстракцией)

Условия хранения: -20^оС

ДНК-полимераза AmpiTaq - термостабильная рекомбинантная ДНК-полимераза. Представляет собой Taq ДНК-полимеразу, синтезируемую культурой клеток E.coli. Метод получения ДНК-полимеразы AmpliTaq и контроль качества обеспечивают постоянство характеристик полимеразы независимо от партиии, что даёт вопсроизводимость результатов ПЦР.

ДНК-полимераза AmpliTaq стабильно активна в диапазоне температур от +55 до +75^оС, что даёт возможность ставить ПЦР с различными праймерами, не оптимизируя уловия реакции.

Синтезирует фрагменты ДНК до 5 тыс п.н. с 3’-выступающим аденином.

Комплектуется 10-кратным буфером для ПЦР GeneAmp I. Также возможна комплектация с буфером GeneAmp II и раствором MgCl2.

Условия хранения: -20^оС

ДНК-полимераза AmpiTaq - термостабильная рекомбинантная ДНК-полимераза. Представляет собой Taq ДНК-полимеразу, синтезируемую культурой клеток E.coli. Метод получения ДНК-полимеразы AmpliTaq и контроль качества обеспечивают постоянство характеристик полимеразы независимо от партиии, что даёт вопсроизводимость результатов ПЦР.

ДНК-полимераза AmpliTaq стабильно активна в диапазоне температур от +55 до +75^оС, что даёт возможность ставить ПЦР с различными праймерами, не оптимизируя уловия реакции.

Синтезирует фрагменты ДНК до 5 тыс п.н. с 3’-выступающим аденином.

Комплектуется 10-кратным буфером для ПЦР GeneAmp II и раствором MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером GeneAmp I.

Условия хранения: -20^оС

Термостабильная ДНК-полимераза DreamTaq представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью. ДНК-полимераза DreamTaq требует тех же условий постановки и проведения реакции амплификации, что и обычная Taq ДНК-полимераза.

Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq Green, содержащим MgCl₂, утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР). Маркерные красители инертны, не взаимодействуют с компонентами ПЦР-смеси и не препятствуют использованию ПЦР-продуктов в реакциях рестрикции или лигирования, а также секвенированию. Если предполагается анализ ПЦР-продуктов с помощью спектрофотометрии или флуориметрии, рекомендуется использовать для амплификации бесцветный буфер DreamTaq или предварительно очищать ПЦР-продукт с помощью набора для очистки ДНК из реакционных смесей.

Также предлагается формат в виде 2-кратной готовой смеси для ПЦР – мастер-микс DreamTaq Green.

ДНК-полимераза DreamTaq способна синтезировать более длинные последовательности (по сравнению с обычной Taq ДНК-полимеразой) – до 6 тыс. пар нуклеотидов, а в случае вирусных ДНК – до 20 тыс. пар нуклеотидов.

ДНК-полимераза DreamTaq синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах.
Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Green:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность по сравнению с обычной Taq ДНК-полимеразой;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов, а в случае вирусной ДНК – до 20 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу;
• возможность нанесения продуктов ПЦР на гель без добавления специальных реагентов для электрофореза.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• рутинная ПЦР;
• высокопроизводительная ПЦР;
• генотипирование.

В состав набора входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 5 × 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 10 × 1,25 мл.

• 20 × 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 20 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 40 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Термостабильная ДНК-полимераза с горячим стартом DreamTaq Hot Start Green представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью.

Функция горячего старта реализована с помощью ингибирования активности фермента антителами при комнатной температуре. Это препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации. Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq Green, содержащим MgCl₂, а также утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР). Маркерные красители инертны, не взаимодействуют с компонентами ПЦР-смеси и не препятствуют использованию ПЦР-продуктов в реакциях рестрикции или лигирования, а также секвенированию. Если предполагается анализ ПЦР-продуктов с помощью спектрофотометрии или флуориметрии, рекомендуется использовать для амплификации бесцветный буфер DreamTaq или предварительно очищать ПЦР-продукт с помощью набора для очистки ДНК из реакционных смесей.

Также предлагается формат в виде 2-кратной готовой смеси для ПЦР – мастер-микс DreamTaq Hot Start Green.

ДНК-полимераза DreamTaq синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах, что делает их пригодными для ТА-клонирования.

ДНК-полимераза DreamTaq способна амплифицировать фрагменты ДНК до 6 тыс. п.н.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность и возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре благодаря технологии горячего старта;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу;
• возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель без добавления дополнительных реагентов для электрофореза.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:

• рутинная ПЦР;
• синтез фрагментов для ТА-клонирования;
• скрининг рекомбинантных клонов;
• обратная транскрипция с последующей ПЦР;
• генотипирование.

В набор входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 2500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

• 4 × 2500 единиц, 4 упаковки, каждая содержит:
v ДНК-полимеразу DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 10 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Термостабильная ДНК-полимераза с горячим стартом DreamTaq Hot Start представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью.

Функция горячего старта реализована с помощью ингибирования активности фермента антителами при комнатной температуре. Это препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации. Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq, содержащим MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером Dream Taq Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) или 2-кратный мастер-микс (готовая смесь для ПЦР) на основе полимеразы DreamTaq Hot Start.

ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах, что делает их пригодными для ТА-клонирования.

ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start способна амплифицировать фрагменты ДНК до 6 тыс. п.н.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность и возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре благодаря технологии горячего старта;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• рутинная ПЦР;
• синтез фрагментов для ТА-клонирования;
• скрининг рекомбинантных клонов;
• обратная транскрипция с последующей ПЦР;
• генотипирование.

В состав набора входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 2500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

• 4 × 2500 единиц, 4 упаковки, каждая содержит:
v ДНК-полимеразу DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Термостабильная ДНК-полимераза DreamTaq представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью. ДНК-полимераза DreamTaq требует тех же условий постановки и проведения реакции амплификации, что и обычная Taq ДНК-полимераза.

Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq, содержащим MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером Dream Taq Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) или 2-кратный мастер-микс (готовая смесь для ПЦР) на основе полимеразы DreamTaq.

ДНК-полимераза DreamTaq способна синтезировать более длинные последовательности (по сравнению с обычной Taq ДНК-полимеразой) – до 6 тыс. пар нуклеотидов, а в случае вирусных ДНК – до 20 тыс. пар нуклеотидов. ДНК-полимераза DreamTaq синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность по сравнению с обычной Taq ДНК-полимеразой;
• способность синтеза более длинных ампликонов - до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу.

В состав набора входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 5 × 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

• 10 × 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 10 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 20 × 1,25 мл.

• 20 × 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq – 20 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 40 × 1,25 мл.

Для постановки ПЦР стандартной и в реальном времени, поставляются отдельно и в составе наборов. Модификации: рекомбинантная ДНК полимераза из Th. aquaticus (94 кДа), для постановки стандартных ПЦР (Taq DNA Polymerase, TopTaq DNA Polymerase (термофильная)); модифицированная рекомбинантная ДНК полимераза из Thermus aquaticus (94 кДа), клонированная в E. coli, для постановки стандартных ПЦР "горячий старт", амплификации SNP локусов, специфичной на метилирование ПЦР, ПЦР с внутренними праймерами, анализа вирусной ДНК (HotStarTaq DNA Polymerase, HotStarTaq Plus DNA Polymerase); 5’–3’ экзонуклеазная активность – 5 ед./мкл, скорость удлинения – 2 – 4 кБ/мин при 72 °С, период полуинактивации – 10 мин при 97 °C; – 60 мин при 94 °C.

Для постановки ПЦР стандартной и в реальном времени, поставляются отдельно и в составе наборов. Модификации: рекомбинантная ДНК полимераза из Th. aquaticus (94 кДа), для постановки стандартных ПЦР (Taq DNA Polymerase, TopTaq DNA Polymerase (термофильная)); модифицированная рекомбинантная ДНК полимераза из Thermus aquaticus (94 кДа), клонированная в E. coli, для постановки стандартных ПЦР "горячий старт", амплификации SNP локусов, специфичной на метилирование ПЦР, ПЦР с внутренними праймерами, анализа вирусной ДНК (HotStarTaq DNA Polymerase, HotStarTaq Plus DNA Polymerase); 5’–3’ экзонуклеазная активность – 5 ед./мкл, скорость удлинения – 2 – 4 кБ/мин при 72 °С, период полуинактивации – 10 мин при 97 °C; – 60 мин при 94 °C.

Превосходная специфичность;
высокий выход продукта;
для амплификации длинных продуктов — до 37 000 н.п.;
высокая скорость — за 15–30 секунд синтезируется 1000 н.п.;
быстрый протокол — 30 мин;
расход — 0,25–1 ед/реак; подготовка реакции при комнатной температуре.

Полимераза «горячего старта» iTaq, инактивированная антителами;
активируется после 3 минут при 95ºС;
высокоспецифичный, чувствительный фермент;
подготовка реакции при комнатной температуре.

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокпроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

Использование для ПЦР ДНК-полимеразы с горячим стартом Phusion Hot Start II исключает возможность синтеза неспецифических продуктов в процессе подготовки ПЦР-смесей. Это происходит благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим активность полимеразы при комнатной температуре. Этот лиганд также ингибирует 3’→5’ экзонуклеазную активность, предотвращая деградацию праймеров и матрицы. При нагревании реакционной смеси до определённой температуры в ходе ПЦР лиганд быстро отщепляется от полимеразы, поэтому в протоколе реакции не требуется специальная стадия активации фермента.

Наборы Phusion Green Hot Start II комплектуются 5-кратными буферами Phusion Green, содержащими утяжеляющий агент и два маркерных красителя. Это позволяет наносить продукты ПЦР на гель без добавления дополнительных реактивов для электрофореза. Утяжеляющий агент и маркерные красители инертны, не влияют на ПЦР и не мешают использованию ПЦР-продуктов в реакциях лигирования или рестрикции, а также при секвенировании.

ДНК-полимераза Phusion Hot Start II синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion Green Hot Start II:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• быстрая ре-активация полимеразы при запуске ПЦР;
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента;
• возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель без добавления специальных реагентов для электрофореза.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы – более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

ДНК-полимераза Phusion синтезирует фрагменты ДНК с тупыми концами.

Наборы Phusion Green комплектуются 5-кратными буферами Phusion Green, содержащими утяжеляющий агент и два маркерных красителя. Это позволяет наносить продукты ПЦР на гель без добавления дополнительных реактивов для электрофореза. Утяжеляющий агент и маркерные красители инертны, не влияют на ПЦР и не мешают использованию ПЦР-продуктов в реакциях лигирования или рестрикции, а также при секвенировании.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы, и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

Использование для ПЦР ДНК-полимеразы с горячим стартом Phusion Hot Start II исключает возможность синтеза неспецифических продуктов в процессе подготовки ПЦР-смесей. Это происходит благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим активность полимеразы при комнатной температуре. Этот лиганд также ингибирует 3’→5’ экзонуклеазную активность, предотвращая деградацию праймеров и матрицы. При нагревании реакционной смеси до определённой температуры в ходе ПЦР лиганд быстро отщепляется от полимеразы, поэтому в протоколе реакции не требуется специальная стадия активации фермента.

Также возможна комплектация с буфером Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР).

ДНК-полимераза Phusion Hot Start II синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion Hot Start II:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• быстрая ре-активация полимеразы при запуске ПЦР;
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

• ДНК-полимераза Phusion Hot Start II (2 Ед/мкл);
• 5Х буфер Phusion HF*;
• 5Х буфер Phusion GC*;
• ДМСО;
• 50 мМ MgCl_₂.

* в состав 5Х буферов Phusion уже входит 7,5 мМ MgCl₂.

ДНК-полимераза Phusion Plus Thermo FS представляет собой высокоточную ДНК-полимеразу, которая имеет очень низкую частоту ошибок, быструю скорость элонгации и высокую устойчивость к ингибиторам. Частота ошибок у Phusion Plus ДНК-полимеразы более чем в 100 раз ниже, чем у Taq ДНК-полимеразы. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов, например, таких как ксилан, гуминовая кислота, гемин.

Новый реакционный буфер Phusion Plus включает запатентованные добавки, которые стабилизируют дуплексы праймера/матрицы во время стадии отжига при 60 °C. Эта уникальная буферная композиция повышает специфичность ПЦР без необходимости оптимизации температуры отжига для каждой пары праймеров, помогая экономить время и избегать ошибок при выполнении ПЦР. Кроме того, при проведении ПЦР с помощью ДНК-полимеразы Phusion Plus есть возможность совместной амплификации фрагментов ДНК разной длины с использованием одного и того же протокола.

ДНК-полимераза Phusion Plus неактивна при комнатной температуре благодаря ее механизму горячего старта, опосредованному молекулами Affibody, что позволяет проводить подготовку реакционной смеси при комнатной температуре. Активность фермента полностью восстанавливается после начальной стадии денатурации.

ДНК-полимераза Phusion Plus идеальна для применений, где важна точность, таких как клонирование, секвенирование, сайт-направленный мутагенез.

Преимущества Phusion Plus ДНК-полимеразы:

• в 100 раз большая точность синтеза, чем у Taq ДНК-полимеразы;
• универсальная температура отжига 60 °C;
• повышенная специфичность — механизм горячего старта снижает неспецифическую амплификацию и деградацию праймеров;
• высокая устойчивость к ингибиторам — работает с ДНК неоптимальной чистоты;
• обладает 5' →3' ДНК-полимеразной активностью;
• обладает 3' →5' экзонуклеазной активностью;
• обнаруживает мишени из 0,08 нг геномной ДНК человека;
• амплифицирует ПЦР-продукты с тупыми концами;
• возможность совместной амплификации фрагментов ДНК разной длины;
• амплифицирует до 10 тыс. п.о. геномной ДНК и до 20 тыс. п.о. фрагментов ДНК низкой сложности;
• работает как с AT, так и с GC богатыми мишенями (GC Phusion enhancer обеспечивает синтез мишений с содержанием GC более 65%);
• обладает скоростью синтеза 15-30 сек/kb.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для севенирования;
• синтез GC-богатых участков ДНК;
• амплификация длинных фрагментов (до 20 тыс. п.о.);
• сайт-специфический ПЦР;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР.

Условия хранения — 20°С.

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start – новая термостабильная ДНК-полимераза, полученная генно-инженерным путём. Благодаря внесению модификации в дНТФ-связывающий карман полимеразы Phusion было снято ограничение, характерное для высокоточных полимераз – неспособность встраивать дезоксиурацилтрифосфат. Phusion U способна как встраивать урациловый остаток, так и считывать его в ДНК-матрице.

Помимо этого, Phusion U обладает всеми характеристиками ДНК-полимераз Phusion – точностью, скоростью, способностью синтезировать длинные последовательности (до 20 тыс. п.н.). Частота ошибок у полимеразы Phusion U в 25 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы. Встроенная функция горячего старта реализуется благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим полимеразную и 3’→5’ экзонуклеазную активности при комнатной температуре.

Эти особенности делают ДНК-полимеразу Phusion U оптимальным ферментом для амплификации повреждённой ДНК, ДНК после бисульфитной конверсии, а также для постановки ПЦР со сниженным риском контаминации.

Наборы Phusion U Green Hot Start комплектуются 5-кратными буферами Phusion Green, содержащими утяжеляющий агент и два маркерных красителя. Это позволяет наносить продукты ПЦР на гель без добавления дополнительных реактивов для электрофореза. Утяжеляющий агент и маркерные красители инертны, не влияют на ПЦР и не мешают использованию ПЦР-продуктов в реакциях лигирования или рестрикции, а также при секвенировании.

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности наборов Phusion U Green Hot Start:

• высокая точность синтеза (в 25 раз выше по сравнению с Taq);
• способность встраивать в ДНК дУТФ и использовать урацил-содержащие последовательности ДНК в качестве матрицы;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель непосредственно после амплификации без добавления реагентов для электрофореза.

Области применения:

• амплификация ДНК после бисульфитной конверсии;
• амплификация повреждённой или деградированной ДНК;
• ПЦР с минимальным риском контаминации посторонними ПЦР-продуктами;
• методы клонирования на основе вырезания урациловых остатков ( USER).

В состав набора входят:

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start – новая термостабильная ДНК-полимераза, полученная генно-инженерным путём. Благодаря внесению модификации в дНТФ-связывающий карман полимеразы Phusion было снято ограничение, характерное для высокоточных полимераз – неспособность встраивать дезоксиурацилтрифосфат. Phusion U способна как встраивать урациловый остаток, так и считывать его в ДНК-матрице.

Помимо этого, Phusion U обладает всеми характеристиками ДНК-полимераз Phusion – точностью, скоростью, способностью синтезировать длинные последовательности (до 20 тыс. п.н.). Частота ошибок у полимеразы Phusion U в 25 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы. Встроенная функция горячего старта реализуется благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим полимеразную и 3’→5’ экзонуклеазную активности при комнатной температуре.

Эти особенности делают ДНК-полимеразу Phusion U оптимальным ферментом для амплификации повреждённой ДНК, ДНК после бисульфитной конверсии, а также для постановки ПЦР со сниженным риском контаминации.

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start также доступна в формате Green и в составе мастер-микса – готовой 2-кратной смеси для ПЦР.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности наборов Phusion U Hot Start:

• высокая точность синтеза (в 25 раз выше по сравнению с Taq);
• способность встраивать в ДНК дУТФ и использовать урацил-содержащие последовательности ДНК в качестве матрицы;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд.

Области применения:

• амплификация ДНК после бисульфитной конверсии;
• амплификация повреждённой или деградированной ДНК;
• ПЦР с минимальным риском контаминации посторонними ПЦР-продуктами;
• методы клонирования на основе вырезания урациловых остатков ( USER).

В состав набора входят:

• ДНК-полимераза Phusion U Hot Start (2 Ед/мкл);
  
• 5Х буфер Phusion HF*;
• 5Х буфер Phusion GC*;
• ДМСО.

* в состав 5Х буферов Phusion уже входит 7,5 мМ MgCl₂.

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы – более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

ДНК-полимераза Phusion синтезирует фрагменты ДНК с тупыми концами.

Также возможна комплектация с буфером Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) и мастер-миксы с ДНК-полимеразой Phusion – готовые 2-кратные реакционные смеси для ПЦР.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

• ДНК-полимераза Phusion (2 Ед/мкл);
• 5Х буфер Phusion HF*;
• 5Х буфер Phusion GC*;
• ДМСО;
• 50 мМ MgCl_₂.

* в состав 5Х буферов Phusion уже входит 7,55 мМ MgCl_₂.

ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start с "горячим" стартом представляет модифицированную Taq ДНК-полимеразу, имеющую повышенную устойчивость к ингибиторам реакции, содержащимся в образце. Полимераза имеет более высокую скорость синтеза ДНК и дает возможность получить результаты ПЦР в два раза быстрее, чем другие Taq ДНК-полимеразы.
Запатентованные антитела к Platinum II Taq Hot-Start ДНК-полимеразе блокируют активность полимеразы при комнатной температуре и диссоциируют после начальной стадии денатурации при 94 °C. Такой «горячий старт» обеспечивает повышенную чувствительность, специфичность и продуктивность, позволяя проводить подготовку реакции при комнатной температуре.
Благодаря уникальному составу буфера для ПЦР Platinum II температура отжига составляет 60 °C для большинства пар праймеров. Изостабилизирующие молекулы в буфере повышают стабильность дуплекса праймер-матрица во время стадии отжига и способствуют повышенной специфичности без необходимости оптимизации температуры отжига для каждой пары праймеров. С помощью Platinum II Taq Hot-Start ДНК-полимеразы с горячим стартом можно проводить амплификацию разных фрагментов ДНК вместе с использованием одного и того же протокола с универсальной температурой отжига праймеров и этапом элонгации, выбранным для самого длинного фрагмента, подлежащего амплификации.
ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start поставляется с усилителем Platinum GC Enhancer для специфической амплификации и повышения выхода ПЦР-продукта мишеней с высоким содержанием GC-участков (более 65%).

Особенности ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start

ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start имеет следующие особенности:

• ПЦР буфер Platinum II обеспечивает универсальную температуру отжига за счет изостабилизации дуплексных структур праймер-матрица, и дает возможность проведения совместной амплификации разных фрагментов ДНК;
• имеет повышенную устойчивость к ингибиторам реакции, остающемся в образце после стадий очистки;
• технология горячего старта — обеспечивает превосходную специфичность, чувствительность и продуктивность;
• имеет более высокую скорость синтеза ДНК и дает возможность получить результаты ПЦР в два раза быстрее, чем другие Taq ДНК-полимеразы.

Области применения ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start

ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start применяется в следующих областях:

• амплификация образцов неоптимальной чистоты;
• амплификация образцов с низкой концентрацией;
• прямая ПЦР из цельной крови;
• генотипирование;
• амплификация GC-богатых фрагментов (более 65%);
• метод молекулярных колоний;
• высокопроизводительная ПЦР.

ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start поставляется в комплекте:

• 100 реакций:
• ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start, 40 мкл;
• 5х Platinum II ПЦР буфер, 1.25 мл;
• Platinum GC Enhancer, 1.25 мл;
• 500 реакций:
• ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start, 200 мкл;
• 5х Platinum II ПЦР буфер, 4х1.25 мл;
• Platinum GC Enhancer, 4х1.25 мл;
• 2500 реакций:
• ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start, 1000 мкл;
• 5х Platinum II ПЦР буфер, 2х12.5 мл;
• Platinum GC Enhancer, 2х12.5 мл;
• 4х2500 реакций (4 упаковки, каждая из которых содержит):
• ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start, 1000 мкл;
• 5х Platinum II ПЦР буфер, 2х12.5 мл;
• Platinum GC Enhancer, 2х12.5 мл;
• условия хранения: -20 °С.

Также предлагаются форматы:

• Platinum II Hot-Start ПЦР мастер-микс (2X) содержит ДНК-полимеразу Platinum II Taq Hot-Start в смеси с буфером для ПЦР Platinum II и dNTPs, тем самым уменьшая количество шагов пипетирования во время постановки реакции ПЦР;
• Platinum II Hot-Start Green ПЦР мастер-микс (2X) — дополнительно содержит утяжеляющий реагент и два отслеживающих красителя для прямой загрузки продуктов ПЦР в гели, что дополнительно упрощает рабочий процесс ПЦР от постановки до окончательного анализа результата.