Колонка является основным элементом жидкостного хроматографа, обеспечивающим разделение смесей веществ и очистку целевого продукта. Материалом для ее изготовления может служить нержавеющая сталь, пластиковый полимер или стекло. В конструкционном плане она представляет собой трубку или полый цилиндр, заполненный изнутри сорбентом (твердой фазой). Внутренний диаметр разных типов колонок может варьировать от 1 мм до 1 м и более.
Каталоги, статьи, видео
Колонка является основным элементом жидкостного хроматографа, обеспечивающим разделение смесей веществ и очистку целевого продукта. Материалом для ее изготовления может служить нержавеющая сталь, пластиковый полимер или стекло. В конструкционном плане она представляет собой трубку или полый цилиндр, заполненный изнутри сорбентом (твердой фазой). Внутренний диаметр разных типов колонок может варьировать от 1 мм до 1 м и более. 
По своему предназначению хроматографические колонки подразделяются на аналитические, микропрепаративные, препаративные и промышленные. Помимо этого, в жидкостной хроматографии получили распространение защитные колонки (для предохранения основной колонки от загрязнения) и предколонки, используемые для предварительной очистки анализируемых проб перед их инжекцией. В качестве твердой фазы в колонках используют широкое разнообразие сорбентов, в т. ч.: дисперсные и монолитные силикагели, поперечно-сшитые на основе агарозы и декстрана, полимерные синтетические (см. табл. 1), изготовленные из оксидов алюминия и циркона. По своей структуре они бывают непористыми, поверхностно-пористыми и полно-пористыми. Их также классифицируют по форме (сферическая и нерегулярная) и размеру частиц.
Тип используемого сорбента определяет область его применения в разных видах жидкостной хроматографии: нормально-фазовая (НФХ), обращенно-фазовая (ОФХ), гидрофобная (HIC), гидрофильная (HILIC), аффинная, ионообменная (анионообменная, катионообменная), ион-парная и пр.
Наиболее распространенные силикагельные сорбенты условно подразделяют на немодифицированные и химически привитые. Плотность пришивки разных функциональных групп к поверхности сорбентных частиц может варьировать от 4 до 32% в пересчете на содержащийся в них углерод. По сравнению с немодифицированным силикагелем привитая фаза этого сорбента отличаются лучшей гидролитической стойкостью, более высокой емкостью и селективностью удерживания / элюирования.
Классификация силикагельных сорбентов осуществляется по единой номенклатуре с использованием целого ряда условных обозначений (см. табл. 2). Например, приставка sil (от лат. silica) в фирменных названиях ряда сорбентов (Supelcosil, Kromasil, Hypersil и пр.) без указания связанной фазы обычно означает, что они содержат немодифицированный силикагель.
Популярные производители колонок, предколонок и сорбентов: Agilent, Cytiva, Phenomenex, Supelco (Merck), Thermo FS, Tosoh Corporation, Waters.
|
Наименование |
Область применения |
|
CaptureSelect CH1-XL
|
Очистка CH1-XL-содержащих Fab и Fab2-фрагментов и IgG антител |
|
CaptureSelect KappaXP
|
Очистка каппа-содержащих Fab и Fab2-фрагментов и IgG антител |
|
CaptureSelect KappaXL
|
Очистка каппа-содержащих Fab и Fab2-фрагментов и IgG антител |
|
CaptureSelect FcXL |
Очистка IgA, IgM и IgG антител |
|
CaptureSelect C-tagXL |
Очистка рекомбинантных белков |
|
POROS CaptureSelect |
Очистка 8 серотипа Аденоассоциированного вируса (AAV8) |
|
POROS CaptureSelect |
Очистка 9 серотипа Аденоассоциированного вируса (AAV8) |
|
POROS CaptureSelect |
Очистка разных серотипов Аденоассоциированного вируса (AAV) |
|
POROS MabCapture |
Очистка моноклональных антител |
|
POROS A 20 μm |
Аналитическая хроматография моноклональных и поликлональных антител |
|
POROS G 20 μm |
Аналитическая хроматография моноклональных и поликлональных антител |
|
POROS HE 50 um |
Аналитическая хроматография белков и вирусов |
|
POROS MC 20 um |
Аналитическая хроматография гистидин-меченых белков |
|
POROS AL 20 um |
Аналитическая хроматография белков |
|
POROS EP 20 um |
Аналитическая хроматография белков и других биомолекул |
|
POROS HP2 |
Аналитическая хроматография белков |
|
LC Kappa |
Аналитическая хроматография каппа-содержащих Fab и Fab2-фрагментов и IgG антител |
|
FG, POROS LC-lambda |
Аналитическая хроматография лямбда-содержащих Fab и Fab2-фрагментов и IgG антител |
|
POROS IgM |
Аналитическая хроматография IgM антител |
|
POROS IgA |
Аналитическая хроматография IgА антител |
|
POROS CH1-XL |
Аналитическая хроматография CH1-XL-содержащих Fab и Fab2-фрагментов и IgG антител |
|
POROS FcXL |
Аналитическая хроматография IgA, IgM и IgG антител |
|
Наименование связанной фазы |
Свойства и область применения
|
|
C1, TMS, SAS, Триметил |
Фаза с очень низкой емкостью и высокой селективностью разделения высокомолекулярных полярных соединений в ОФХ. |
|
C2, RP-2, Диметил |
C2 обладает более сильной удерживающей способностью, чем фаза С1, уступая по этому показателю сорбентам: С4, С8 и С18. |
|
С3, Пропил |
C3 подходит для HIC хроматографии пептидов и белков. |
|
С4, Бутил |
Фаза с более низкой емкостью и удерживающей способностью, чем у сорбентов С8 и С18. Хорошо подходит для разделения макромолекул гидрофобных белков и пептидов с помощью HIC и ион-парной хроматографии. |
|
С5, Пентил |
С5 обладает более сильной гидролитической устойчивостью по сравнению с сорбентом С4. Привитую фазу пентила с диаметром пор 300Å используют в ОФХ гидрофобных белков и пептидов. |
|
С6, Гексил |
С6 обладает более сильной удерживающей способностью, чем фазы: С1, С2, С3, С4 и С5, уступая по этому показателю сорбентам: С8 и С18. Привитая фаза гексила находит применение ион-парной хроматографии |
|
С8, MOS, RP-8, LC8, Октил |
По своей селективности фаза С8 близка к С18, но уступает ей по удерживающей способности. Этот сорбент находит широкое применение в хроматографии нуклеотидов, стероидов, пептидов, небольших гидрофильных белков и прочих биомолекул. |
|
С12, Додецил |
С12 обеспечивает лучшее чем у С18 взаимодействие с целевыми молекулами и более чёткую форму пиков для неполярных и умеренно полярных соединений. |
|
RP Amide C16 |
Фаза с высокой селективностью разделения алкильных соединений |
|
С18, ODS, RP-18, LC-18, Октадецил |
Универсальная фаза с высокой емкостью удерживания в неполярных растворителях. Прекрасно работает в ион-парной хроматографии. Имеет широчайший спектр применений (разделение пептидов, нуклеотидов, стероидов, витаминов, жирных кислот, пестицидов и пр.). |
|
AQ-C18, Полярно-модифицированный октадецил |
Подходит для разделения образцов в водной фазе |
|
Peptide ES-C18, Ди-изобутилоктадецил |
Быстрое разделение пептидов и полипептидов с высокой пиковой нагрузкой |
|
C30, Триаконтанолдиметил |
Фаза с высокой селективностью разделения гидрофобных соединений, длинноцепочечных и структурно родственных изомеров |
|
С6H5, Фенил |
Обладает уникальной селективностью разделения ароматических соединений в хроматографии гидрофобного взаимодействия. |
|
С6H5–С6H5, Biphenyl, Дифенил |
Высокая селективность разделения ароматических соединений |
|
С6H5 (линкер C3H6O), Фенил-эфир |
Используют для разделения высоко-полярных ароматических веществ. |
|
С6H5 (линкер C6H12), Фенил-гексил |
Фаза с высокой селективностью разделения ароматических соединений – доноров электронов |
|
С6F5, PFP, |
Обеспечивает селективное разделение замещённых ароматических соединений. |
|
CN, Cyano, CPS, PCN, циано, цианопропил, нитрил |
Универсальная фаза как для НФХ, так и ОФХ. Обладает высокой удерживающей способность в отношении полярных соединений при слабом удерживании гидрофобных веществ. Слабая полярность и низкая емкость этого сорбента позволяет быстро уравновешивать его в режиме градиентного элюирования. |
|
Nitro, NO2 |
Низко-емкая фаза селективна к ароматическим соединениям в ОФХ и применима для НФХ |
|
NH2, APS, амино, аминопропилсилил |
Фаза является слабым анионообменником с универсальной областью применения в НФХ, ОФХ и ионообменной хроматографии. Хорошо подходит для разделения углеводов. |
|
Diol OH, Диол |
Универсальная фаза как для НФХ, так и ОФХ. Используют также в гель-фильтрационной хроматографии (GFC) высоко-полярных соединений, пептидов и белков. |
|
OH5, Пента-гидрокси |
Идеально подходит для разделения высоко-полярных соединений |
|
F5 (PFP) |
Высокая селективность разделения ароматических соединений – акцепторов электронов |
|
SCX |
Сильный катионобменник |
|
SAX |
Сильный анионобменник |
|
Карбоксил WSX |
Слабый катионобменник |
Раздел не найден.
