Проточные цитометры: анализаторы и сортеры

Проточные цитофлуориметры (цитометры) — высокопроизводительные системы анализа частиц (как правило, клеток) в потоке жидкости. Анализ частиц ведется с большой скоростью (до десятков тысяч в секунду), причем каждая частица анализируется отдельно. Метод проточной цитометрии позволяет получать за короткое время качественные и количественные данные по анализируемым частицам с высокой статистической достоверностью. Проточные цитометры используются для широкого круга задач, связанных с анализом клеток, таких как подсчет клеток, иммунофенотипирование (в иммунологии, гематологии, онкологии, при культивировании клеток и пр.), клеточный цикл и пролиферация, клеточное здоровье и апоптоз, автофагия, клеточный сигналинг, токсикология, эффективность трансфекции и т.д. Типичные объекты — клетки человека и животных, клетки растений и микроводоросли, дрожжи, бактерии, микрочастицы и экзосомы.
Каталоги, статьи, видео
Фильтр
Все производители
Все категории
Пока нет данных. Перейти в каталог
Фильтр
Доступность
  • На складе
  • В транзите и на складе
  • Все товары
0500-3115
20 142 673
20 142 673 AMD
Muse — компактный клеточный анализатор, работающий по принципу проточной цитометрии для простого и недорого и быстрого анализа. Управление через сенсорный дисплей, интуитивное программное обеспечение, оптимизированные наборы реагентов формата «смешать и измерить» вместе обеспечивают существенное упрощение решения исследовательских задач.

Клеточный анализатор Muse обеспечивает прямое измерение концентрации клеток (без использования референсных частиц) и количественную детекцию флуоресцентных параметров. Оптимизированные наборы реагентов и адаптированные к ним модули программного обеспечения позволяют определять жизнеспособность клеток, апоптоз на разных этапах, исследовать пролиферацию и клеточный цикл, клеточный сигналинг, параметры иммунного статуса и др.

Analisys

Cell concentration

Viability

Average % CV

% CV Range

Average % CV

% CV Range

Image-based Automated Counter

9,2% 1,2-23,3% 3,7% 0,8-12,1%

Manual Hemocytometer

9,2% 6,3% 4,5% 0,5-9,2%

Muse

4% 0,3-8,8% 2,2% 0,4-5,6%

Преимущества системы:

  • компактность: можно поставить в любом месте;
  • легкость и простота использования: готовые наборы реагентов c упрощенной пробоподготовкой;
  • интуитивное управление: позволяет сделать работу максимально комфортной;
  • программные модули адаптированы под наборы реагентов: простой анализ образцов;
  • универсальность: два открытых программных модуля под реагенты пользователя;
  • возможность обслуживания без участия сервисного инженера.

Другие методы анализа

Muse

Счетные камеры (например, камера Горяева)

Ограничения в связи с низким разрешением поглощения красителя для определения жизнеспособности. Погрешности, связанные с ручным подсчетом.
Анализ Muse Count and Viability

Точный, основанный на флуоресцентном окрашивании метод определения живых и мертвых клеток. Микрокапиллярная флюидика для прямого подсчета концентрации с высокой точностью.
Автоматические гемоцитометры и клеточные анализаторы на основе светлопольной микроскопии

Низкая точность в результате анализа небольшого числа клеток, использование ограничено подсчетом концентрации и жизнеспособности.
Методы анализа Muse

Флуоресцентный сигнал на основе специфичного связывания реагентов с мишенями. Статистическая достоверность достигается измерением тысяч клеток за несколько минут.
Вестерн-блот и другие методы обобщенного анализа клеточной популяции

Гетерогенность популяции теряется при пулировании.
Методы времязатратные и требуют внешнего контроля.
Реагенты должны быть оптимизированы и валидированы.
Результаты качественные или, в лучшем случае, полуколичественные.
Методы анализа Muse

Результаты для популяции в каждом образце на основе анализа каждой клетки.
Очень простые методы пробоподготовки, дополнительно нужны только пипетки.
Реагенты оптимизированы и валидированы для использования на разных типах клеток.
Большие проточные цитометры

Реагенты должны быть валидированы.
Оптимизация требует затрат времени и ценного образца.
Нужна отдельная настройка установок прибора под каждую задачу.
Методы анализа Muse

Флуоресцентные реагенты уже подобраны под лазер и детекторы Muse, оптимизированы для разных типов клеток.
Валидированные методы анализа, оптимизированная пробоподготовка и предустановленные настройки прибора в программном обеспечении.

Технические характеристики:

  • твердотельный зелёный диодный лазер — 532 нм, 20 мВт;
  • параметры: прямое светорассеяние, два параметра флуоресценции;
  • фильтры для детекции флуоресценции: 576/±28 (желтый), 680/±30нм (красный);
  • CV, % — менее 10, стандартно менее 5;
  • типы клеток: гомогенные или гетерогенные, адгезивные или суспензионные, первичные или клеточные линии;
  • диапазон концентрации клеток, тыс. кл./мл — 10-500;
  • размер клеток в диаметре, мкм — 2-60+;
  • объём образца, мкл — 50-200+;
  • формат загрузки образцов — пробирка (тип «эппендорф», 1,5 мл);
  • 3 скорости пробоотбора — 7,2, 14,4 и 36 мкл/мин;
  • кварцевая капиллярная ячейка 1,5 мм x 0,8 мм, внутренний диаметр канала — 100 мкм;
  • прецизионная шприцевая помпа с шаговым двигателем для подачи образца;
  • анализ: на самом анализаторе или внешнем компьютере (экспорт через USB pdf-отчетов, csv-файлов со статистикой, исходных данных в виде файлов fsc);
  • габариты, Ш × Г × В, мм — 207 × 283 × 221;
  • вес, кг — 5,9.


Проточный цитофлуориметр Muse, видеообзор, Luminex, 2019


Расширенные возможности клеточного анализатора Guava Muse с новыми открытыми модулями, Luminex, постер, англ. яз., 1 стр.pdf

Быстрая детекция каспазной активности в клетках, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 2 стр.pdf

Быстрая и чувствительная детекция апоптоза с использованием аннексина V, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 2 стр.pdf

Кинетика продукции внутриклеточного NO и цитотоксичности при липополисахарид- и гамма-интерферон-активации макрофагов, Muse, Luminex, брошюра, англ. яз., 4 стр.pdf



См. также: Заказ антител Abcam
A31266_comp
По запросу
По запросу
Уникальная особенность Attune NxT — функция акустической фокусировки, позволяющей проводить измерения с высокой скоростью без потери качества, сохраняя низкую вариабельность.

Возможности Attune NXT при анализе плоидности:
  • высокая скорость измерения с сохранением низких значений коэффициента вариации;
  • возможность использовать готовые реагенты Thermo FS для окраски ядер или использовать реагенты сторонних производителей;
  • отработанные протоколы для разных задач в анализе плоидности;
  • классический анализ плоидности при помощи голубого лазера (488 нм) и йодистого пропидия;
  • возможность установки дополнительных лазеров (можно докупать после покупки прибора);
  • легкая замена фильтров при необходимости их оптимизации;
  • возможность использовать опциональный автосэмплер и роботизированную подачу для автоматической смены образцов и ускорения производительности;
  • универсальность — при необходимости прибор можно использовать и для других задач в области проточной цитометрии.

Технические характеристики:
  • лазеры — 1 (488 нм, 50 мВт), возможен апгрейд на рабочем месте пользователя до 4х-лазерной конфигурации;
  • профиль лазера: 10 x 50 мкм, с плоской вершиной;
  • каналы детекции — FSC¹, SSC², 4 флуоресцентных (до 14 флуоресцентных параметров при покупке дополнительных лазеров);
  • чувствительность MESF³ — ≤ 80 MESF for FITC, ≤ 30 MESF for PE;
  • формат загрузки — пробирки размерами от 17 x 100 мм до 8,5 x 45 мм (включая стандартные пробирки на 1,5, 2 и 5 мл), опциональный автозагрузчик для 96- и 384-луночных планшетов;
  • скорость потока — 12,5-1000 мкл/мин;
  • скорость сбора данных — до 65 000 событий/сек;
  • метод определения концентрации частиц — прямой подсчет;
  • габариты, Ш × Г × В — 400 × 580 × 430 мм;
  • вес — 29 кг.
Предложение включает проточный цитофлуориметр Attune NxT, оснащенный лазером 488 нм и 4 детекторами флуоресценции, 1 год гарантии. В комплект поставки входит дополнительный фильтр 603/48, оптимизированный под флуоресценцию йодистого пропидия, и стартовый набор реагентов для запуска.

¹ forward scatter, прямое светорассеивание;
² side scatter, боковое светорассеивание;
³ molecules of equivalent soluble fluorochrome, число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.

Проточный цитометр Attune NxT, Thermo FS, брошюра, русск., 36 стр.
Технические характеристики Attune Nxt, Thermo FS, брошюра, англ., 8 стр.
0500-4012
По запросу
По запросу

Особенность всех проточных цитофлуориметров серии Guava easyCyte – проточная ячейка на основе запатентованной микрокапиллярной технологии. Использование микрокапиллярных взаимодействий для выравнивания клеток в потоке позволило отказаться от обжимающей жидкости и снизить количество отходов (до 50 мл за 8 часов работы).

Интуитивное программное обеспечение собирает и анализирует данные с помощью готовых программных модулей либо на основе настроек, самостоятельно оптимизированных пользователем для решения исследовательских задач.

Проточные цитометры Guava easyCyte компактны, экономичны и просты в работе и обслуживании. Микрокапиллярная проточная ячейка построена на основе кварцевого капилляра квадратного сечения со стороной 100 мкм, пригодна для работы с разным типом клеток, ее обслуживание (в том числе при забивке) проводится пользователем и не требует вызова сервисного инженера. Существуют конфигурации с разным набором лазеров и детекторов, с загрузкой из одиночных пробирок (конфиг. SL) и/или из 96-луночных планшетов (конфиг. HT). В целом, это простой, надежный и недорогой прибор для решения разного типа задач.


Технические характеристики:

  • твердотельные полупроводниковые лазеры, до 3 лазеров из списка: 405, 488, 532 и 642 нм;
  • регистрация до 14 параметров: 2 детектора светорассеяния и до 12 каналов флуоресценции;
  • минимальный объем образца — 100 мкл для лунок планшета, 150 мкл для пробирок объемом 0,5 мл, 900 мкл для пробирок объемом 1,5 мл;
  • диапазон концентрации клеток, тыс. кл./мл — 10-500;
  • скорость: 7-70 мкл/мин, 10-1000 событий в секунду;
  • точность: коэффициент вариации менее 4% (определен по ядрам эритроцитов курицы);
  • размер клеток/частиц, мкм: 0,2 – 60;
  • количество отходов: 50 мл за 8 часов работы;
  • формат загрузки образцов — пробирка «эппендорф» объемом 1,5 мл (SL), 96-луночные планшеты и пробирки «эппендорф» объемом 0,5/1,5 мл (HT);
  • габариты, Ш × Г × В, см — 61 × 45 × 24 (SL), 61 × 51 × 25 (HT);
  • вес, кг — 15,9 (SL), 31,8 (HT).

Конфигурации Guava EasyCyte:

Модель

Число каналов

405 нм
(100 мВт)

488 нм
(50 мВт)

488 нм
(150 мВт)

532 нм
(100 мВт)

642 нм
(100 мВт)

5, 5HT
5 V
5HPL, 5HPL HT
5 V
6-2L, 6-2L HT
6 V V
8, 8HT
8 V V
BG, BG HT
10 V V
11, 11HT
11 V V
BGR, BGR HT
12 V V V
12, 12HT
13 V V V
BGV, BGV HT
14 V V V

Guava-8.png


Проточные цитометры Guava easyCyte, видеообзор, Luminex, 2020




Сбор данных на проточном цитометре Guava easyCyte, видео, Luminex, 2019



Проточные цитометры Guava easyCyte, Luminex, брошюра, англ. яз.,16 стр.pdf

Технические характеристики Guava easyCyte, Luminex, англ. яз., 3 стр.pdf

См. также: Заказ антител Abcam


100370
По запросу
По запросу
Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это новое направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке.

Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости.

Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей
микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого
спектра новых приложений.

Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные
с изображениями:
  • нажмите на точку в любом плоте данных, чтобы увидеть соответствующее изображение;
  • кликните на интервал на любой гистограмме, чтобы увидеть каждую клетку в этом интервале;
  • нарисуйте гейты на дот-плотах и вы увидите результирующие популяции клеток для валидации результатов.
Иннновационная технология цитометров Amnis увеличивает сигнал и уменьшает шум, обеспечивая беспрецедентную фотонную чувствительность. Детали конфигурации, такие как специальный боковой скаттер-лазер, регулируемая интенсивность лазерного излучения и анализ светлопольных изображений для прямого анализа клеток позволяют системе более эффективно разделять клеточные популяции, чем при использовании более дорогих проточных цитометров. Простота в использовании, выдающаяся производительность и анализ изображений каждой клетки отвечают потребностям как новичков, так и экспертов в области проточной цитометрии.

  • Применим в любой научно-исследовательской дисциплине;
  • детекция с использованием высокочувствительной камеры Hamamatsu, что позволяет драматически улучшить разрешение по отношению к традиционным проточным цитометрам;
  • сконфигурирован для задач лабораторий любого фокуса и бюджета;
  • характеризует популяции практически по любому визуальному или флуоресцентному параметру;
  • лазеры — до 4-х:
  • стандартно — 488 нм;
  • опция — 405, 561, 642 нм;
  • до 12 каналов детекции;
  • опциональный автосэмплер для 96-луночных планшетов;
  • увеличение 20Х (стандарт).
A24858
По запросу
По запросу
Уникальная особенность Attune NxT — функция акустической фокусировки, позволяющей проводить измерения с высокой скоростью без потери качества, сохраняя низкую вариабельность.

Возможности технологии акустической фокусировки:
  • высокая скорость анализа при минимальном расходе реагентов;
  • высокая точность и минимальная вариабельность данных;
  • быстрый анализ без потери чувствительности;
  • детекция редких событий в количестве, достаточном для статистической обработки;
  • окраска антителами без необходимости отмывки.

Технические характеристики:
  • лазеры — до 4х одновременно из 5 доступных: 405 нм (50 мВт), 488 нм (50 мВт), 532 (100 мВт), 561 нм (50 мВт), 637 нм (100 мВт);
  • профиль лазеров: 10 x 50 мкм, с плоской вершиной;
  • каналы детекции — FSC¹, SSC², до 14 флуоресцентных, опциональный дополнительный параметр SSC на фиолетовом лазере (405 нм);
  • чувствительность MESF³ — ≤ 80 MESF for FITC, ≤ 30 MESF for PE, ≤70 MESF for APC;
  • формат загрузки — пробирки размерами от 17 x 100 мм до 8,5 x 45 мм (включая стандартные пробирки на 1,5, 2 и 5 мл), опциональный автозагрузчик для 96- и 384-луночных планшетов;
  • скорость потока — 12,5-1000 мкл/мин;
  • скорость сбора данных — до 65 000 клеток/сек;
  • метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
  • габариты, Ш × Г × В — 400 × 580 × 430 мм;
  • вес — 29 кг.

¹ forward scatter, прямое светорассеивание;
² side scatter, боковое светорассеивание;
³ molecules of equivalent soluble fluorochrome, число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.

Проточный цитометр Attune NxT, Thermo FS, брошюра, русск., 36 стр.
Технические характеристики Attune Nxt, Thermo FS, брошюра, англ., 8 стр.

См. также: Заказ антител Abcam.

Attune CytPix
По запросу
По запросу

Проточный цитометр Attune CytPix для широкого спектра задач – компактный, простой, удобный в использовании.

С помощью изображений полученных Attune CytPix можно оценит морфологию клеток, отслеживать контаминацию, показать межклеточные взаимодействия, морфологические характеристики апоптотических клеток и убедиться, что через луч лазера проходит отдельная клетка, а не конгломераты, их обломки или мусор, а так же можно просматривать и группировать изображения.

Уникальные особенности проточного цитометра Attune CytPix

  • Возможность протокола анализа без лизиса и отмывок для минимизации потери клеток, и экономии время, а также упрощение подготовки;
  • снижение времени пробоподготовки на 65%;
  • характеристика клеточных популяций;
  • стабильное качество изображения при высокой скорости потока;
  • описание морфологии апоптотических клеток;
  • исследование межклеточных взаимодействий;
  • контроль качества клеточных культур, отслеживание контаминации;
  • просмотр и группировка изображений, а также определение типов клеток;
  • визуализация для подтверждения и настройки гейта, включая только отдельные клетки, представляющие интерес;
  • система очистки, которая механически уменьшает возникновение засорения.
Протоколы подготовки образцов для цитометров в сравнении с Attune CytPix

Протоколы подготовки образцов.



Примеры использования проточного цитометр Attune CytPix


С помощью проточного цитометра Attune CytPix можно просматривать и группировать изображения, а также определять типы клеток E. coli на основе их морфологических характеристик. В течении роста клетки E. coli, развиваются в два типа колониеобразующих клеток - короткие, которые напоминают отдельные клетки, и удлиненные структуры.

Рисунок 1. Ядра эритроцитов курицы (CEN) склонны слипаться в дублеты или другие агрегаты. Стратегия гейтирования слипшихся ядер эритроцитов курицы с Attune CytPix.



Ядра эритроцитов курицы (CEN) склонны слипаться в дублеты или другие агрегаты. Стратегия гейтирования слипшихся ядер эритроцитов курицы с Attune CytPix.

Рисунок 2. С помощью проточного цитометра Attune CytPix можно просматривать и группировать изображения, а также определять типы клеток E. coli на основе их морфологических характеристик. В течении роста клетки E. coli, развиваются в два типа колониеобразующих клеток - короткие, которые напоминают отдельные клетки, и удлиненные структуры.



Отслеживание контаминации критически важно для анализа клеточных линий. На пример, перед трансплантацией клеток Вы можете их проверить на контаминацию с помощью Attune CytPix.

Рисунок 3. Отслеживание контаминации критически важно для анализа клеточных линий. На пример, перед трансплантацией клеток Вы можете их проверить на контаминацию с помощью Attune CytPix.



Визуализация Attune CytPix показывает межклеточные взаимодействия на примере CAR T-клеток, нацеленных на клетки лимфомы.

Рисунок 4. Визуализация Attune CytPix показывает межклеточные взаимодействия на примере CAR T-клеток, нацеленных на клетки лимфомы.



Анализ апоптоза клеток (с использованием аннексина V и PI) дополняется изображениями с выявленным морфологическим особенностями каждой клетки. Морфологические характеристики апоптотических клеточных популяции, полученные проточным цитометром Attune CytPix.

Рисунок 5. Анализ апоптоза клеток (с использованием аннексина V и PI) дополняется изображениями с выявленным морфологическим особенностями каждой клетки. Морфологические характеристики апоптотических клеточных популяции, полученные проточным цитометром Attune CytPix.



Особые преимущества проточного цитометра с визуализацией Attune CytPix

  • Программное обеспечение и камера проточного цитометра Attune CytPix гарантируют, что события, которые анализируются, являются отдельными клетками, а не дублетами, скоплениями, обломками клеток или мусором.
  • Акустическая фокусировка в 10 раз быстрее любой другой в проточном цитометре Attune CytPix.

Гидродинамическая фокусировка обеспечивает точное позиционирование клеток по центральной оси, позволяя клеткам быть сосредоточенными на точку лазерного луча и совместно с высокоскоростной камерой обеспечивает качественную картинку (Рисунок 6).

Проточный цитометр Attune CytPix с высокоскоростной камерой имеет большое значение для исследования в области клеточной биологии, генной терапии и оптимизации их протоколов.


Акустическая фокусировка в сравнении с традиционной гидродинамической фокусировкой.

Рисунок 6. Акустическая фокусировка в сравнении с традиционной гидродинамической фокусировкой.



Стабильное качество изображения при высокой скорости потока 12.5 мик/мин, 25 мик/мин, 100 мик/мин, 200 мик/мин, 500 мик/мин и 1000 мик/мин.

Рисунок 7. Стабильное качество изображения при высокой скорости потока 12,5 мик/мин, 25 мик/мин, 100 мик/мин, 200 мик/мин, 500 мик/мин и 1000 мик/мин. Нет изменений в частоте визуализации и получению картин. Простая настройка фокуса и камеры для получения качественного изображения.



Технические характеристики проточного цитометра Attune CytPix

  • Количество лазеров – 2/4;
  • каналы детекции – канал прямого и бокового светорассеяния и 14 флуоресцентных каналов;
  • освещение изображения – 405 нм лазер с менее 50 наносекундный импульс;
  • акустическая фокусировка;
  • чувствительность – ≤80 MESF for FITC, ≤30 MESF for PE, ≤70 MESF for APC;
  • скорость анализа, событий/сек – более 35 тыс.;
  • скорость фотографии, фото/сек – 6000;
  • кратность увеличения – 20×;
  • разрешение камеры, нм/Мп – 0,3;
  • размер частиц, нм – до 800;
  • статус использования – только для исследований;
  • программное обеспечение – Invitrogen Attune 21 CFR Part 11;
  • процессор – Nvidia Quadro P2200 GPU;
  • жесткий диск – 2 x 8TB SSD, 2,5-inch Samsung 870 QVO, 560 MB/s;
  • габариты, В × Ш × Г, см – 49 × 58 × 43.

Опции: автоподатчик Invitrogen CytKick Autosampler и робот подачи планшетов Orbitor RS2 Microplate Mover увеличат операционную мощность, уменьшат количество ошибок, связанных с человеческим фактором.

Дополнительные конфигурации увеличивают операционную мощность, уменьшают количество ошибок, связанных с человеческим фактором.

Рисунок 8. Дополнительные конфигурации увеличивают операционную мощность, уменьшают количество ошибок, связанных с человеческим фактором.
(A) Attune CytPix Flow Cytometer
(B) Invitrogen CytKick Autosampler
(C) Orbitor RS2 Microplate Mover


Таблица 1. Сравнение автосэмплеров Invitrogen CytKick и CytKick Max

Автосэмплеры Invitrogen CytKick и CytKick Max Автосэмплер CytKick Max, для работы с1,5 мл пробирками и 96-лун планшетами, Thermo FS
Характеристика Автосэмплер CytKick Автосэмплер CytKick Max
Пропускная способность 42 мин для 96-луночного планшета в высокопропускном режиме 22 мин для 96-луночного планшета (в ускоренном режиме с одной промывкой, одного смешивания и полного анализа образца 20 мкл)
Совместимость
  • 96-луночные глубоколуночные планшеты
  • 96-луночные стандартные планшеты
  • 384-луночные глубоколуночные планшеты
  • 384-луночные стандартные планшеты
  • 96-луночные глубоколуночные планшеты
  • 96-луночные стандартные планшеты
  • 384-луночные глубоколуночные планшеты
  • 384-луночные стандартные планшеты
  • 1,5 и 2 мл микроцентрифужные пробирки в шативе (до 24 мест)
  • 96-луночные планшеты, запечатанные фольгой
  • 384-луночные планшеты, запечатанные фольгой, дополнительные типы планшет


Таблица 2. Конфигурации цитометра Attune CytPix.

Лазеры Конфигурация лазеров Число каналов детекции для выбранных лазеров Всего каналов детекции* Каталожный номер
Фиолетовый,
405 нм
Синий,
488 нм
Желтый,
561 нм
Красный,
637 нм
2 Синий / желтый 3 4 9 A51842
Синий / красный 4 3 9 A51840
Синий / фиолетовый 4 4 10 A51841
Синий / фиолетовый 6 6 4 11 A51843
3 Синий / красный / желтый 3 4 3 12 A51845
Синий / фиолетовый /желтый 4 3 4 13 A51846
Синий / красный / фиолетовый 4 4 3 13 A51844
Синий / красный / фиолетовый 6 6 3 3 14 A51847
4 Синий / красный / желтый / фиолетовый 4 3 4 3 16 A51848
Синий / красный / желтый / фиолетовый 6 6 2 3 3 16 A51849

* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.

† - Доступна модификация лазеров, зеленый лазер не доступен в Attune CytPix.

Таблица 3. Конфигурация лазеров, количество каналов детекции в сравнении Attune CytPix с Attune NxT

Лазеры Конфигурация лазеров Фиолетовый,
405 нм
Синий,
488 нм
Желтый,
561 нм
Зеленый,
532 нм
Красный,
637 нм
Всего каналов детекции* Attune CytPix Attune NxT
1 Синий ** 4 ** ** ** 6 N/A A24864
2 Синий / зеленый ** 3 4 ** 9 N/A A28995
Синий / желтый ** 3 4 ** 9 A51842 A24861
Синий / красный ** 4 ** ** 3 9 A51840 A24863
Синий / фиолетовый 4 4 ** ** ** 10 A51841 A24862
Синий / фиолетовый 6 6 3 ** ** 11 A51843 A29002
3 Синий / зеленый / красный ** 3 4 3 12 N/A A28997
Синий / красный / желтый ** 3 4 3 12 A51845 A28993
Синий / зеленый / фиолетовый 4 3 4 ** 13 N/A A28999
Синий / фиолетовый / желтый 4 3 4 ** 13 A51846 A24859
Синий / красный / фиолетовый 4 4 ** ** 3 13 A51844 A24860
Синий / красный / фиолетовый 6 6 3 ** 3 14 A51848 A29003
4 Синий / красный / фиолетовый / зеленый 4 3 4 3 16 N/A A29001
Синий / красный / желтый / фиолетовый 4 3 4 3 16 A51848 A24858
Синий / красный / желтый / фиолетовый 6 6 2 3 3 16 A51849 A29004

* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.

** - Доступна модификация лазеров, зеленый лазер не доступен в Attune CytPix.

Выбрать можно конфигурацию прибора, соответствующую вашим потребности. Проточный цитометр Attune CytPix доступен в конфигурациях с 2–4 лазерами с визуализацией в светлом поле, а проточный цитометр Attun NxT доступен с 1–4 лазерами без визуализации.


Таблица 4. Выбор красителей для определения жизнеспособности клеток

Лазер Нефиксирующие красители Фиксирующие красители
УФ DAPI (470) LIVE / DEAD Fixable Blue (450)
405 нм SYTOX Blue (480) LIVE / DEAD Fixable Violet (451)
LIVE / DEAD Fixable Lime (506)
LIVE / DEAD Fixable Aqua (526)
LIVE / DEAD Fixable Yellow (575)
405 нм SYTOX Green (523) LIVE / DEAD Fixable Green (520)
Propidium Iodide (617) LIVE / DEAD Fixable Olive (557)
SYTOX AADvanced (647) LIVE / DEAD Fixable Red (615)
561 нм SYTOX Orange (570) LIVE / DEAD Fixable Orange (602)
SYTOX AADvanced (647)
633/5 нм SYTOX Red (660/20*) LIVE / DEAD Fixable Far Red (665)
LIVE / DEAD Fixable Scarlet (723)
LIVE / DEAD Fixable Near IR (775)
LIVE / DEAD Fixable Near IR (780)
808 нм LIVE / DEAD Fixable Near IR (876)


ZE5
По запросу
По запросу

Проточный цитофлуориметр ZE5 — надежный, гибкий, высокопроизводительный анализатор для лабораторий с большим потоком образцов.

Уникальные особенности проточного цитофлуориметра ZE5, Bio-Rad

Цитофлуориметр ZE5 имеет до пяти лазеров и 30 детекторов, позволяет работать с любой вашей панелью; переключается между пробирками, штативами или планшетами без изменения конфигурации программного обеспечения; проводит автоматическую проверку всех фильтров на предмет их наличия и правильного расположения.

Цитофлуориметр ZE5 обеспечивает высокопроизводительный скрининг отдельных клеток, эффективный скрининг процессов передачи белков, мониторинг пациентов, проходящих иммунотерапию. Кроме исследований иммуногенности, разработки вакцины, открытия фенотипических лекарств, скрининга терапевтических антител, открытие биомаркеров рака, также может проводить работу по исследованию наночастиц.

В ситуации пандемии коронавируса облегчает скрининг сывороточных антител, реактивных к антигенам SARS-CoV-2.

Возможности цитофлуориметра ZE5:

  • большое количество анализируемых параметров (до 30) обеспечивают гибкость в работе;
  • высокая скорость анализа (до 100 000 событий в секунду, < 8 мин на 96-луночный планшет) обеспечивает высокую производительность;
  • конструкция оптической системы (одинаковое расстояние от проточной ячейки до каждого детектора), фотоумножители Hamamatsu H11903 обеспечивают высокую чувствительность и разрешение;
  • увеличенная стабильность лазерного пучка, верифицирование оптической системы ZE5 EYE обеспечивают стабильность и надежность результатов;
  • возможность прямого подключения внешнего источника деионизированной воды и слива, замена емкостей с сервисными растворами без остановки измерения, автоматические процедуры старта и выключения обеспечивают удобство в обслуживании;
  • универсальный автоматический автозагрузчик для любого типа пробирок или планшетов, контроль температуры, переноса пробы, предотвращение повреждения пробозаборника;
  • возврат неиспользованного образца;
  • конструкция проточной ячейки, высокочувствительная электроника обеспечивают низкие CV даже при высокой скорости потока.

Технические характеристики цитофлуориметра ZE5:

  • лазеры — до 5: 355 нм (50 мВт), 405 нм (100 мВт), 488 нм (100 мВт), 561 нм (50 мВт), 640 нм (100 мВт);
  • каналы детекции — FSC¹, SSC², до 27 флуоресцентных, опциональный дополнительный детектор FSC для субмикронных частиц;
  • чувствительность MESF³ — <100 для FITC, PE, APC;
  • формат загрузки — универсальный автозагрузчик для пробирок и планшетов (до 384 лунок);
  • скорость потока — 0,025-3,5 мкл/сек (1,5-210 мкл/мин);
  • скорость сбора данных — до 100 000 клеток/сек;
  • метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
  • габариты, Ш × Г × В — 740 × 690 × 660 мм;
  • вес — 110 кг.
¹ forward scatter, прямое светорассеивание;
² side scatter, боковое светорассеивание;
³ molecules of equivalent soluble fluorochrome, число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.

Проточный цитофлуориметр ZE5, Bio-Rad, англ., 12 стр.

Видеообзор клеточного анализатора ZE5, Bio-Rad.

B75408
По запросу
По запросу
Компактный, легкий в использовании проточный цитометр CytoFLEX для широкого спектра научных исследований.
Уникальная конструкция цитометра и конфигурации от 1 до 6 лазеров и от 4 до 21 флуоресцентных параметров обеспечивают поддержку большинства мультипараметрических приложений.
Компактные размеры, простое обслуживание, исключительные чувствительность, разрешение и надежность отличают CytoFLEX во всех его конфигурациях. Все это вместе со стабильной производительностью обеспечивает конкурентные преимущества CytoFLEX.
Запатентованный детекторный модуль на базе технологии спектрального мультиплексирования состоит из твердотельных, высокоэффективных фотодиодных детекторов с низким уровнем шума, что обеспечивает экстраординарное разрешение для получения более точных данных и лучшей регистрации редких событий.

Бренд CytoFLEX включает три серии приборов: CytoFLEX, CytoFLEX S и CytoFLEX LX, различающиеся по максимальному числу лазеров и количеству флуоресцентных параметров, позволяя подобрать прибор под любую исследовательскую задачу.

Технические характеристики цитометров CytoFLEX

Все цитометры CytoFLEX имеют следующие технические характеристики:
  • фиксированная встроенная оптика и кварцевая проточная ячейка
  • непревзойденная чувствительность лавинных фотодиодов: FITC < 30 MESF, PE < 10 MESF
  • абсолютная линейность детекторов обуславливает новые подходы к компенсации
  • FITC: < 30 MESF (молекул эквивалентного растворимого флуорохрома)
  • PE: < 10 MESF
  • Разрешение частиц < 200 нм с помощью дополнительного параметра бокового светорассеяния на фиолетовом лазере (VSSC)
  • габариты, Ш х Г х В, см — 42,5 x 42,5 x 34;
  • вес, кг — 23,4.

Характеристики цитометров серии CytoFLEX

Цитометры серии CytoFLEX отличаются следующими характеристиками:
  • широкий спектр конфигураций: от 1 лазера и 4 флуоресцентных параметров до 3 лазеров и 13 флуоресцентных параметров
  • до 5 каналов синего лазера (488 нм), до 3 каналов красного лазера (638 нм) и до 5 каналов фиолетового лазера (405 нм)
  • 13 переставляемых полосовых оптических фильтров

Характеристики цитометров серии CytoFLEX S

Цитометры серии CytoFLEX S отличаются следующими характеристиками:
  • широкий спектр конфигураций: от 2 лазеров и 4 флуоресцентных параметров до 4 лазеров и 13 флуоресцентных параметров
  • 13 переставляемых полосовых оптических фильтров

Характеристики цитометров серии CytoFLEX LX

Цитометры серии CytoFLEX LX отличаются следующими характеристиками:
  • 2 конфигурации: 5 лазеров, 19 флуоресцентных параметров и 6 лазеров, 21 флуоресцентный параметр
  • 3 канала синего лазера (488 нм), 3 канала красного лазера (638 нм), 5 каналов фиолетового лазера (405 нм), 5 каналов желто-зеленого лазера (561 нм), 3 канала лазера, излучающего ближний УФ (375 нм), и до 2 каналов ИК-лазера (808 нм)
  • 21 переставляемый полосовой фильтр
100220
По запросу
По запросу
Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это новое направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке.

Системы ImageStreamX MKII и FlowSight обеспечивают анализ большого количества изображений каждой клетки в потоке, включая светлопольный и темнопольный каналы (SSC) и до 10 флуоресцентных каналов на высокой скорости.

Комбинирование скорости, чувствительности и фенотипических возможностей проточной цитометрии с одной стороны и детализации изображений и функциональных возможностей
микроскопии с другой стороны, позволяют визуализирующим проточным цитометрам ImageStream и FlowSight обойти ограничения обоих методов и открывают двери для широкого
спектра новых приложений.

Цитометры FlowSight и ImageStreamX функционируют как обычные проточные цитометры, но также обеспечивают анализ изображений каждой клетки. Мощное и интуитивно понятное программное обеспечение позволяет беспрепятственно связывать количественные данные
с изображениями:
  • нажмите на точку в любом плоте данных, чтобы увидеть соответствующее изображение;
  • кликните на интервал на любой гистограмме, чтобы увидеть каждую клетку в этом интервале;
  • нарисуйте гейты на дот-плотах и вы увидите результирующие популяции клеток для валидации результатов.
Иннновационная технология цитометров Amnis увеличивает сигнал и уменьшает шум обеспечивая беспрецедентную фотонную чувствительность. Детали конфигурации, такие как специальный боковой скаттер-лазер, регулируемая интенсивность лазерного излучения и анализ светлопольных изображений для прямого анализа клеток позволяют системе более эффективно разделять клеточные популяции, чем при использовании более дорогих проточных цитометров. Простота в использовании, выдающаяся производительность и анализ изображений каждой клетки отвечают потребностям как новичков, так и экспертов в области проточной цитометрии.

  • Анализирует тысячи клеток в секунду при 60X увеличении;
  • простой пользовательский интерфейс с графиками и гейтированием в режиме реального времени;
  • система может быть сконфигурирована с любым числом лазеров — от одного до семи;
  • изменение увеличения микроскопа позволяет осуществлять анализ изображений как мелких частиц, так и очень больших клеток или даже их конгломератов.
Технические характеристики:
  • лазеры – до 7:
    • стандартно 488 нм;
    • опция 375, 405, 561, 592, 642, 730 нм;
  • стандартно 6 каналов флуоресценции высокого разрешения (до 12 каналов опционально);
  • увеличение 40Х (стандарт) и 20Х, 60Х (опция);
  • опциональный автосэмплер для 96-луночных планшетов.
Система проточной визуализирующей цитометрии Amnis, Merck, русск. яз, 36 стр.

CS-100196
По запросу
По запросу
Проточный цитометр CellStream, Luminex — компактная система, обладающая высокой чувствительностью и гибкостью для мультипараметрического анализа клеток и субмикронных частиц:
  • до 7 неколлинеарных лазеров,
  • до 20 флуоресцентных каналов,
  • возможность визуальной верификации результатов.
Уникальная система детекции сигнала Amnis, используемая в цитометрах CellStream, обеспечивает высокую чувствительность, до 10 раз превышающую чувствительность фотоумножителей (PMT, photomultiplier tube) традиционных систем проточной цитометрии. CCD камера с большой скоростью захватывает усиленные с помощью технологии TDI (time delay integration, накопление сигнала во времени) изображения низкого разрешения и трансформирует их в высокоинформативные данные по интенсивности. В результате исследователь получает данные по интенсивности, привычные для традиционной проточной цитометрии, но с большей чувствительностью флуоресценции.

В отличие от традиционных систем на базе PMT, проточный цитометр CellStream регистрирует изображения, что дает возможность анализировать морфологические параметры и обеспечивает визуализацию всех событий, а следовательно, и простую верификацию выделения популяций, отделения одиночных событий от агрегатов и т.д.

Уникальные возможности CellStream:
  • запатентованная камера с уникальной технологией TDI для проточных цитометров Amnis;
  • визуальное подтверждение результатов;
  • высокие чувствительность и разрешение;
  • анализ морфологических параметров: площадь, соотношение сторон, значение интенсивности самого яркого пикселя — наряду с данными по общей интенсивности;
  • детекция и разделение субмикронных частиц;
  • автоматические очистка и калибровка;
  • автосэмплер для 96-луночного планшета уже в базовой комплектации;
  • валидация по стандартам GMP.

Технические характеристики:
  • максимально 7 лазеров, нм — 375, 405, 488, 532, 561, 642, 730 нм;
  • мощность лазеров: 375 нм — 70 мВт, 405 нм — 175 мВт, 488 нм — 200 мВт, 532 нм — 150 мВт, 561 нм — 150 мВт, 642 нм — 150 мВт, 730 нм — 40 мВт;
  • каналы детекции – FSC¹, SSC², до 20 флуоресцентных;
  • чувствительность MESF³ — <10 FITC, <5 PE;
  • разрешение по параметрам светорассеяния — FSC < 300 нм, SSC < 200 нм;
  • коэффициент вариации (CV) — < 3% (определен по ядрам эритроцитов курицы);
  • формат загрузки — 1 пробирка или 96-луночный планшет;
  • скорость потока — 3.66 / 14.64 мкл/мин;
  • скорость сбора данных — до 20 000 клеток/сек;
  • метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
  • габариты, Ш × Г × В — 440 × 625 × 495 мм.

¹ FSC, forward scatter — прямое светорассеивание.
² SSC, side scatter — боковое светорассеивание.
³ MESF, molecules of equivalent soluble fluorochrome — число молекул эквивалентного растворимого флуорохрома.


Проточный цитометр Amnis CellStream, видеообзор, Luminex, 2019



16-цветное иммуннофенотипирование главных субпопуляций лимфоцитов и миелоидных клеток в мононуклеарной фракции и цельной крови с помощью проточного цитометра Amnis CellStream, постер, англ.яз., 1 стр.pdf

Проточный цитометр Amnis CellStream, Luminex, брошюра, англ.яз., 7 стр.pdf

Иммуннофенотипирование экстрацеллюлярных везикул с помощью проточного цитометра Amnis CellStream, брошюра, англ.яз., 4 стр.pdf.

1451006_comp
По запросу
По запросу

Сортер клеток S3e от Bio-Rad — это инновационная система сортинга с классической системой гидродинамической фокусировки, предназначенная для решения научно-прикладных задач в области сортировки клеток, в зависимости от сигнала флуоресцентной метки. В приборе реализована инновационная технология ProDrop.

В проточном цитометре, оборудованном системой для сортировки клеток, проточная ячейка закреплена на пьезокристалле. При подаче на него напряжения кристалл вместе с ячейкой совершает колебания с заданной частотой, в результате чего струя жидкости с клетками разбивается на отдельные капли. Проходя сквозь заряжающее кольцо, капля может приобретать положительный или отрицательный заряд в зависимости от того, какая клетка содержится внутри капли. Пролетая мимо отклоняющих пластин, капля с клеткой притягивается к ним, выходит из основного потока и попадает в пробирку. Суть технологии ProDrop заключается в том, что после прохождения процедуры детекции и сортинга калибровочных частиц ProLine, несортированные частицы подвергаются вторичной детекции на выходе, что позволяет оценить, насколько успешно прошла процедура сортировки, и в автоматическом режиме внести коррекцию процедуры без вмешательства пользователя.

Технические характеристики сортера клеток S3e

  • Уровень чувствительности, событий/сек — до 100000;
  • частота сортировки, событий/сек — до 30000;
  • точность сортировки, % — более 99;
  • диаметр сопла, мкм — 100;
  • направление сортировки — 2-х линейное;
  • источник света — до 3 лазеров на выбор из 4 доступных (405, 488, 561, 640 нм);
  • детекция в 4-х флуоресцентных каналах (525/30, 586/25, 615/25, 655 нм);
  • чувствительность менее <125 MESF для красителей FITC и PE;
  • сортировка до 5 пробирок по 5 мл каждого направления селекции,
  • возможность сортировки в стрипованные пробирки и на предметные стекла
  • для микроскопии;
  • минимальное разрешение — 0,5 мкм;
  • система охлаждения Пельтье, температурный диапазон, °C — от 4 до 37;
  • габариты, ШхГхВ, см — 70×65×65.

Комплект поставки: сортер клеток S3e, лазерs 488 и 561 нм, 4 флуоресцентных детектора, калибровочный набор, контейнеры (2 шт.) для реагентов и отходов, соединительные трубки, ПО ProSort, кабель, ПК.

CFX-SRT
256 552 974
256 552 974 AMD

Настольный клеточный сортер на базе CytoFLEX S от компании Beckman Coulter CytoFLEX SRT – вобрал все лучшее от клеточных анализаторов CytoFLEX (лавинные фотодиодные детекторы (APD), высокую чувствительность и удобство использования), добавив возможность сортировки до 4 клеточных популяций.

Технические характеристики:

  • фиксированная встроенная оптика и кварцевая проточная ячейка;
  • непревзойденная чувствительность лавинных фотодиодов;
  • абсолютная линейность детекторов упрощает настройки компенсации;
  • до 4-х лазеров и 15 флуоресцентных параметров;
  • доступные лазеры: 488 нм 50 мВт, 405 нм 80 мВт, 561 нм 30 мВт, 638 нм 100 мВт;
  • 4-струйная сортировка с поддержкой комбинированных режимов, позволяющих собирать отклоненные капли (aborts) для последующего анализа;
  • сортировка в 96 и 384-луночные планшеты с опцией индексной сортировки;
  • автоматизированная настройка сортировки:
    • автоматизированное формирование капель и расчет drop-delay;
    • автоматизированный мониторинг и оптимизация боковых струй;
  • опциональный модуль температурного контроля;
  • опциональная система удаления аэрозоля и/или шкаф биобезопаности.

Флуоресцентные каналы и примеры флуорохромов для работы на CytoFLEX SRT
Configuration Blue Red Yellow Violet
525 690 660 712 780 585 610 675 710 780 450 525 610 660 780
4L15C (BRVY) FITC
B525-FITC
PerCP
B690-PC5.5
APC
R660-APC
APC-A700
R712-APCA700
APC-A750
R780-APCA750
PE
Y585-PE
ECD
mCherry
PC5
Y675-PC5
PC5.5
Y710-PC5.5
PC7
Y780-PC7
PB450
V525-KrO
KO525
V450-PB
Violet610
V610
Violet660
V660
Violet780
V780
3L12C (BVY) FITC
B525-FITC
PerCP
B690-PC5.5



PE
Y585-PE
ECD
mCherry
PC5
Y675-PC5
PC5.5
Y710-PC5.5
PC7
Y780-PC7
PB450
V525-KrO
KO525
V450-PB
Violet610
V610
Violet660
V660
Violet780
V780
3L10C (BRV) FITC
B525-FITC
PerCP
B690-PC5.5
APC
R660-APC
APC-A700
R712-APCA700
APC-A750
R780-APCA750





PB450
V525-KrO
KO525
V450-PB
Violet610
V610
Violet660
V660
Violet780
V780
3L10C (BRY) FITC
B525-FITC
PerCP
B690-PC5.5
APC
R660-APC
APC-A700
R712-APCA700
APC-A750
R780-APCA750
PE
Y585-PE
ECD
mCherry
PC5
Y675-PC5
PC5.5
Y710-PC5.5
PC7
Y780-PC7





2L7C (BV) FITC
B525-FITC
PerCP
B690-PC5.5








PB450
V525-KrO
KO525
V450-PB
Violet610
V610
Violet660
V660
Violet780
V780
2L7C (BY) FITC
B525-FITC
PerCP
B690-PC5.5



PE
Y585-PE
ECD
mCherry
PC5
Y675-PC5
PC5.5
Y710-PC5.5
PC7
Y780-PC7





2L2C (BR) FITC
B525-FITC
PerCP
B690-PC5.5
APC
R660-APC
APC-A700
R712-APCA700
APC-A750
R780-APCA750










A66831
По запросу
По запросу
Bigfoot
По запросу
По запросу
Проточные цитофлуориметры (цитометры) — высокопроизводительные системы анализа частиц (как правило, клеток) в потоке жидкости. Анализ частиц ведется с большой скоростью (до десятков тысяч в секунду), причем каждая частица анализируется отдельно. Метод проточной цитометрии позволяет получать за короткое время качественные и количественные данные по анализируемым частицам с высокой статистической достоверностью.
Проточные цитометры используются для широкого круга задач, связанных с анализом клеток, таких как подсчет клеток, иммунофенотипирование (в иммунологии, гематологии, онкологии, при культивировании клеток и пр.), клеточный цикл и пролиферация, клеточное здоровье и апоптоз, автофагия, клеточный сигналинг, токсикология, эффективность трансфекции и т.д. Типичные объекты — клетки человека и животных, клетки растений и микроводоросли, дрожжи, бактерии, микрочастицы и экзосомы.

Центральным элементом проточного цитометра является проточная ячейка, в которой клетки выстраиваются друг за другом в ламинарном потоке жидкости и проходят через луч лазера. Лазерный луч, проходя через клетку, отклоняется, рассеивается и вызывает флуоресценцию красителей, которыми маркируются исследуемые структуры.
CD3.png Viability.png Leuko_.png
Отклоненный и рассеянный свет облучающего лазера, а также свет, полученный в результате флуоресценции, попадает на детекторы, переводится в цифровой сигнал, значение которого пропорционально интенсивности попавшего на детекторы света. Данные по интенсивности обрабатываются компьютером и выводятся в виде графиков и статистических характеристик.

Существует несколько типов проточных ячеек. Большинство проточных цитометров использует проточную ячейку с гидродинамической фокусировкой: ламинарный поток создается потоком обжимающей жидкости (sheath fluid), которая со всех сторон «обжимает» образец. Другой тип проточных ячеек использует капиллярные взаимодействия для создания ламинарного потока: образец подается в микрокапилляр или в чип, работающий по принципу микрофлюидики.

Скорость, с которой клетки движутся в потоке, определяет время измерения: чем выше скорость, тем быстрее проходит измерение, но выше вариабельность результатов (часто выражается в виде коэффициента вариации, CV, coefficient of variation). Высокие значения CV могут затруднить разделение популяций клеток, усложнить трактовку результатов измерения. Для уменьшения CV при больших скоростях может применяться акустическая фокусировка клеток в потоке.
Scheme.png
В качестве источника света в проточных цитометрах используются лазеры. Наиболее универсальный — голубой (длина волны 488 нм), широко распространены также красный (642 нм) и фиолетовый (405 нм) лазеры. Для решения специальных задач могут дополнительно устанавливаться лазеры с другими волнами излучения. От «цвета» лазера зависит выбор флуорохромов, которые можно использовать для окраски. Увеличение количества лазеров существенно расширяет этот выбор, позволяет подбирать более эффективные комбинации флуорохромов для характеристики клеток, увеличивать количество параметров клеток, которые можно проанализировать за одно измерение.

В системах с несколькими лазерами свет, полученный при облучении клетки, может собираться для всех лазеров одновременно (коллинеарные системы) или для каждого лазера отдельно (например, при пространственном разделении точек облучения клеток каждым лазером). В последнем случае можно в рамках одного измерения использовать флуорохромы, имеющие сходный спектр эмиссии, если они различаются по спектру возбуждения.
FlowCell_trad.PNG FlowCell_capil.PNG acoustic_focusing.png
В качестве детекторов светового сигнала от клеток в традиционных проточных цитометрах используются PMT (photomultiplier tube, фотоумножители), которые представляют собой вакуумную лампу с двумя основными электродами (катод и анод) и несколькими промежуточными (диноды). Свет, полученный при облучении клеток, падает на фотоэлектрод PMT и выбивает из него электроны. Эти электроны летят к диноду и каждый из них выбивает еще несколько, которые летят к следующему диноду и т.д. Таким образом, PMT не только преобразует световой сигнал в электрический, но и значительно его усиливает. Благодаря своей чувствительности, PMT до сих остается самым распространенным детектором для проточных цитометров.
Другой вариант детекторов — фотодиоды — все больше набирает популярность с развитием технологии их производства, повышением их чувствительности.

Lasers.png

PMT.jpg
Таким образом, фотоны света преобразуются в электрический импульс, величина которого пропорциональна попавшему на детектор свету. То есть, например, чем больше в клетке окрашенных структур, тем ярче она флуоресцирует, тем сильнее электрический сигнал, регистрируемый на детекторе. Детектор регистрирует весь свет, который на него попадает, поэтому для многоцветного анализа весь спектр, который приходит от клеток необходимо делить на узкие спектральные полоски при помощи серии фильтров, и каждый участок спектра попадает на отдельный детектор, соответствующий определенному «цвету».

В системах, использующих PMT или фотодиоды, анализируется общая интенсивность светового сигнала с каждой клетки, саму клетку, ее форму при этом увидеть невозможно. О том, что точка на графике — это именно исследуемая клетка, приходится догадываться с той или иной степенью вероятности (вместо термина «клетка» принято говорить «событие»). Проблема верификации выделенных популяций «событий» стоит остро и решается дополнительными процедурами анализа, контролями, привлечением клеточного сортинга с последующей микроскопией. Удачным сочетанием наглядности микроскопии и скорости проточной цитометрии стали визуализирующие проточные цитометры (Imaging Flow Cytometers). В качестве детектора в них используется CCD-камера. Хотя чувствительность CCD-матрицы ниже, чем PMT, ее можно значительно усилить. Так, технология TDI (time delay integration, накопление сигнала во времени) предусматривает электронное сопровождение движущихся объектов (клеток). Скорость «перемещения» засвеченных пикселей по матрице синхронизируется со скоростью клетки в потоке, собранные данные по интенсивности изображения на каждом участке матрицы накапливаются и собираются в одно изображение с повышенной яркостью и четкостью. В результате, такие системы обладают чувствительностью, не уступающей и даже превышающей чувствительность PMT. Визуализация любого события обеспечивает верификацию без дополнительных ухищрений и позволяет исследовать популяции, которые в традиционной цитометрии отбрасываются. Каждой точке на графике в визуализирующей проточной цитометрии соответствует изображение, на котором можно проследить не только наличие или отсутствие определенной структуры, но и подсчитать количество этих структур, локализацию в клетке, качественно и количественно оценить морфологию клеток.
Amnis_scheme.jpg Amnis_TDI.png Amnis_dots_images.PNG sorter.PNG

По возможности отделить нужную популяцию от остальных клеток проточные цитометры делят на анализаторы (только логическое выделение) и сортеры (логическое и физическое выделение нужных клеток). Клеточные сортеры способны провести анализ, выбрать нужную популяцию и выделить ее в отдельную пробирку, лунку планшета или перенести на предметное стекло. Для разделения клеток большинство сортеров использует электростатическую сепарацию. После прохождения через луч лазера (т.е. после анализа) клетка изолируется в капле жидкости. В зависимости от результатов анализа капля с клеткой получает определенный электрический заряд, благодаря которому она отклоняется в электромагнитном поле и, в итоге, оказывается в пробирке с такими же клетками. Капли, не получившие заряд, попадают в слив и удаляются. В некоторых сортерах сортировка производится при помощи чипов на основе микрофлюидики.

Существуют также другие методы сортировки клеток: при помощи магнитной сепарации (MACS, magnetic-activated cell sorting), при помощи микропузырьков (BACS, buoyancy activated cell sorting), сортировка единичных клеток при помощи микрочипов.

Проточные цитометры придуманы и используются для анализа дискретных частиц: клеток животных и человека, растительных клеток, водорослей, грибов, микроорганизмов. Исследуемые структуры или вещества должны быть расположены на поверхности или внутри этих частиц. Однако существуют также приложения для исследования растворенных веществ — то, чем традиционно занимается ИФА. Для детекции на проточном цитометре растворенных аналитов их нужно связать с частицами, которые сможет «увидеть» проточный цитометр. В качестве таких частиц используют бидсы (beads) — полимерные микросферы, сопоставимые по размеру с клетками (5-15 мкм), с которыми прочно связывают (иммобилизируют) антитела к исследуемому аналиту. В растворе молекулы аналита связываются с нанесенными на бидсы антителами, далее аналит дополнительно метят флуоресцентным красителем (также при помощи антител). По яркости флуоресценции этого красителя судят о концентрации аналита в растворе. Развитие этого метода привело к созданию мультиплексных анализаторов.
По спектру решаемых задач можно разделить проточные цитометры на открытые и закрытые. В открытых системах (большинство проточных цитометров) задачи и способ их решения определяются пользователем и ограничены только возможностями прибора и фантазией исследователя. Закрытые системы ориентированы на решение специализированных задач (одной или нескольких), методы анализа и, зачастую, реагенты определяются производителем этих приборов. Преимущества таких приборов – простота в использовании, минимальная необходимость оптимизации метода, зачастую меньшая цена, чем у открытых систем.

При выборе проточного цитометра стоит обращать внимание на следующие факторы:
  • какие наиболее типичные измерения, какие цветовые комбинации будут использоваться, какие характеристики прибора должны быть для проведения измерений: количество лазеров, количество флуоресцентных параметров;
  • тип детекторов флуоресценции (возможность визуализации);
  • разрешающая способность — способность различать тускло окрашенные популяции;
  • скорость анализа (актуальна при анализе редких популяций), складывается из возможного количества событий в секунду и скорости потока;
  • точность измерения, коэффициент вариации (CV) — особенно актуально при анализе клеточного цикла;
  • минимальный размер анализируемых частиц (актуально для изучения микроорганизмов и микровезикул);
  • наличие автосэмплера для автоматического анализа из нескольких пробирок или лунок планшета существенно освобождает время исследователя.
multiplex.jpg
Специалист Стар-лаб по проточной цитометрии и мультиплексному анализу всегда поможет вам с подбором оптимальной модели.

Частично задачи можно решать на других приборах:

При работе с проточными цитометрами может понадобиться дополнительное оборудование: автоматические пипетки, микро- и миницентрифуги, вортексы, системы очистки воды.
Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!