Анализаторы микотоксинов

Анализаторы микотоксинов находят широкое применение в сельском хозяйстве и пищевой промышленности. В зависимости от выбранного способа диагностики этих токсикантов используют разные виды аналитического оборудования и расходных материалов: иммунохроматографические тест-полоски и кассеты, биочипы и иммунохимические микрочиповые ридеры, иммуноферментные анализаторы и пр.

Микотоксины (эрготоксины спорыньи, афлатоксины, трихотеценовые микотоксины, охратоксины, фумонизины, Т-2 токсины, зеараленон и его производные, патулин и пр.) – токсичные продукты метаболизма определенных видов фитопатогенных и сапрофитных грибов, способные вызывать канцерогенное и мутагенное воздействие, пищевые отравления, поражение печени, почек и прочие заболевания человека и животных. При отборе проб для анализа на микотоксины необходимо учитывать их неравномерное распределение и/или низкий уровень накопления в зараженном материале.

Наилучшим скрининговым методом определения микотоксинов в продуктах растительного (зерно, комбикорма, орехи и пр.) и животного происхождения (мясо, молоко, яйца и пр.) по праву считается высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Используемые для этой цели аналитические системы ВЭЖХ обычно компонуют из отдельных блоков: градиентных насосов на стороне высокого или низкого давления, детекторов, хроматографических колонок и реакционного модуля (в отдельных моделях).

На предварительном этапе проведения хроматографической процедуры анализируемые образцы подвергают обязательной пробоподготовке, включающей их механическое разрушение (для твердых образцов), обработку органическими растворителями и очистку экстрагированных токсикантов на сорбентах. Экспресс-процедура пробоподготовки включает использование специальных концентрирующих патронов, обеспечивающих быстрое выделение и концентрирование (в 10–1000 раз) целевых биомолекул с помощью метода твердофазной экстракции (ТФЭ, Solid Phase Ecstaction, SPE).

В зависимости от полярности молекул микотоксинов их разделение проводят посредством нормально-фазовой или обращенно-фазовой хроматографии. Детекция этих токсикантов может осуществляться напрямую (без дериватизации) по интенсивности флуоресценции и электрохимическим показателям, либо опосредованными методами с использованием предколоночной или постколоночной дериватизации трифторуксусной кислотой, трифторуксусным ангидридом (ТФА), гептафтормасляным ангидридом (ГФМА), 9-(флуоренилметил)хлорформиатом, о-фталевым дикарбоксальдегидом и растворами галогенов.

Метод предколоночной дериватизации отличается наиболее высокой чувствительностью. Однако эту процедуру можно использовать только при условии высокой степени чистоты хроматографических реагентов. Постколоночной дериватизации отдают предпочтение при разделении более концентрированных образцов, а также в случае их недостаточной чистоты, например, при загрязнении мочевиной, детергентами и другими компонентами солевых растворов.